C组轮状病毒主要基因全片段扩增及武汉地方株Wu82的VP6和VP7编码基因序列分析

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轮状病毒分子生物学研究进展

轮状病毒分子生物学研究进展摘要：轮状病毒是导致儿童及许多幼畜感染的重要原因，近年来，轮状病毒在全球范围内造成了大量的人类和动物死亡。

而且还带来了很大的经济损失。

所以WHO要求开发轮状病毒疫苗作为首要任务。

本文综述了轮状病毒分子生物学方面的最新进展，为进一步深入开展轮状病毒相关基因的实验室工作奠定了基础。

关键词：前言：轮状病毒是呼肠病毒科的一种，是婴幼儿及幼畜腹泻的重要病原。

每年全球有超过800,000人死于这种病毒。

在发展中国家，每年死于轮状病毒感染的儿童约为500,000。

猪轮状病毒主要是在0~60天龄的仔猪身上传播，对其生产和经济产生了重大的影响。

另外，轮状病毒也可以传染给大熊猫、羊、狗和马。

本文对轮状病毒的分子生物学特性、血清型、主要编码蛋白等方面作了简要的介绍。

1.轮状病毒的血清和分子结构轮状病毒是一种非囊膜的双链RNA病毒，它包括三个包衣的外壳，直径大约70毫米，具有二十面体的对称性，在电子显微镜下表现为“车轮状”。

轮状病毒由11个片段组成，每个片段均编码（VP1~VP4;VP6;VP7）及6个非结构蛋白（NSP1~NSP6),VP1-VP3是该病毒的核心蛋白。

VP6是一种特殊的抗体， VP4、VP7是影响该病毒毒性的主要因素，并能诱发人体中和抗体的生成。

按VP6抗原型轮状病毒可划分为A型GE型，A型轮状病毒最容易受人类感染。

比如非洲和亚洲，每年有453,000个儿童因轮状病毒感染而死亡。

根据VP4血凝素抗原与VP7中和抗原的差异，可以将其划分为G型（24种）和P型（33种）。

G1P[8]、G2P[4]、G3P[8]、G4P[8]、G9P[8]等，而我国G1P[8]、G3P[8]是最常见的。

2轮状病毒基因中的关键蛋白与作用2.1主要的非结构蛋白质和功能能轮状病毒NSP1（NSP1）是由5个基因组片段编码的，它在病毒感染细胞时起到了一定的抑制作用。

NSP1对IRF3、IRF5的抑制作用；IRF7、NF-KB对宿主细胞IFN-I的表达有一定的抑制作用。

轮状病毒VP7基因的克隆及核苷酸序列分析

了ＡＧ — ７个可变区，片段涉及了Ｒ的抗原区，此Ｖ对于轮状病毒疫苗的研制具有重要意义，为下一步基因工程苗的开发打下了基础。
Ｍ一０胞为解放军军需大学病毒室传代，Ａ１４细液氮保存。按常规方法培养、代，长液为含有５传生％
小牛血清、％的谷氨酰胺、３双抗的ＭＭ，Ｈ值７２Ｅｐ．
～
７４维持液为不含血清的ＭＥ．【；Ｍ。根据对从Ｇｎａｋ获得的ＲｅＢｎＶ毒株Ｖ７序列所Ｐ
１４引物的设计．
作的同源性分析结果，计ｒｌ设对简并引物，引物核
（河子大学动物科技学院，疆石河子８２０；２解放军军需大学军事兽医研究所，吉林长春１０６）１新３０３３０２
摘要：用反转录聚合酶链式反应（ＴＰＲＲ－Ｃ）技术，从轮状病毒感染的细胞中扩增了９６ｂ１ｐ的Ｖｒ片段中抗原表Ｆ７位区。通过ＴＤＡ连接酶将其直接连接于克隆载体质粒ｐＥＴ上，转化至受体菌Ｄ５ｔ４ＮＧＭ．Ｈｃ中。提取质粒经ＰＲ扩Ｃ增、酶切鉴定，证明重组质粒ｖ７中含有轮状病毒的Ｖｒ基因片段。经核苷酸序列分析，表明正确克隆了轮Ｆ７
２００２年６月
文章编号：１ｏ—３３２０）２０８ —４０７７８（０２０ —０７０

牛轮状病毒VP4、VP6、VP7基因分子生物学研究进展

牛轮状病毒VP4、VP6、VP7基因分子生物学研究进展梁浩勤;李琼毅;赵克学;邓盈盈;赖露菊;魏锁成;冯若飞【期刊名称】《西北民族大学学报（自然科学版）》【年(卷),期】2018(039)003【摘要】轮状病毒是引起幼龄动物急性胃肠炎和腹泻的主要病因.犊牛感染轮转病毒会对集中饲养的牛群造成严重的经济损失,制约养牛产业的发展.轮状病毒的11个节段基因分别编码了6种结构蛋白(VP1-VP4,VP6,VP7)和6种非结构蛋白(NSP1-NSP6),其中VP4和VP7与病毒的毒力密切相关,分别决定了病毒的P型和G型.VP6是病毒的特异性抗原,也是决定轮状病毒分组的重要蛋白.通过综述VP4、VP6、VP7的分子特征及研究进展,对目前开发的疫苗产品进行了简述.【总页数】7页(P33-39)【作者】梁浩勤;李琼毅;赵克学;邓盈盈;赖露菊;魏锁成;冯若飞【作者单位】西北民族大学生物工程与技术国家民委重点实验室,甘肃兰州730030;西北民族大学生命科学与工程学院,甘肃兰州 730030;西北民族大学生命科学与工程学院,甘肃兰州 730030;西北民族大学生物工程与技术国家民委重点实验室,甘肃兰州 730030;西北民族大学生命科学与工程学院,甘肃兰州 730030;西北民族大学生物工程与技术国家民委重点实验室,甘肃兰州 730030;西北民族大学生命科学与工程学院,甘肃兰州 730030;西北民族大学生命科学与工程学院,甘肃兰州 730030;西北民族大学生命科学与工程学院,甘肃兰州 730030;西北民族大学生物工程与技术国家民委重点实验室,甘肃兰州 730030;甘肃省动物细胞工程技术研究中心,甘肃兰州 730030【正文语种】中文【中图分类】S852.65【相关文献】1.C组轮状病毒主要基因全片段扩增及武汉地方株Wu82的VP6和VP7编码基因序列分析 [J], 王远虹;周璇;小林宣道;朱泽荣;刘满清;杨占秋2.结构蛋白VP4、VP6和VP7对牛轮状病毒的致病作用 [J], 冯春花;郭东光;陈明艳3.结构蛋白VP4、VP6和VP7对牛轮状病毒的致病作用 [J], 冯春花;郭东光;陈明艳;;;;;4.新成人腹泻轮状病毒J19株的全基因组克隆和VP4、VP6和VP7基因序列分析[J], 蒋盛军;纪绍忠;唐青;杨红彦;崔晓英;毕烨;阚飙;高守一5.轮状病毒VP4基因和VP7基因原核表达载体的构建及表达 [J], 王鹏雁;陈创夫;余兴龙;徐兴然;涂长春;张高轩因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

轮状病毒-医学微生物学课件优质教材

· D、E、F、G组轮状病毒仅引起动物腹泻。（S）
· A组抵抗力：耐乙醚、耐酸碱（pH 3.5~10），室温中传染性可保持7个月，-20℃长期保存。（S）
1. 病毒复制 2. 病毒的传播 3. 对宿主防卫的逃逸 4. 病毒的发病机理 5. 轮状病毒的微生物学检查 6. 轮状病毒的防治
1. 病毒复制
· 轮状病毒感染后通常不会对后续感染产生完整的免疫力。部分原因：免疫系统对轮状病毒记忆不强；大多数侵犯黏膜的病毒刺激产生的免疫应答持续时间较短。
· 与其他RNA病毒一样，轮状病毒具有很高的突变率。导致总有几种不同的轮状病毒血清型在人群中循环传播。
4. 病毒的发病机理
· 轮状病毒是婴幼儿重症胃肠炎的主要致病原。 · 在患严重腹泻住院的婴幼儿中，有1/3是轮状
· 由于病毒还处于两层衣壳保护状态下时，病毒mRNA已开始复制，同时由于病毒刚包被第一层衣壳时，新病毒的双链基因组已开始构建，因此轮状病毒被称作“从事秘密复制活动的病毒”。
2. 病毒的传播
· 轮状病毒喜欢感染肠绒毛顶端的柱状上皮细胞。原因可能是：（1）这些细胞是病毒穿过时最容易附着的细胞。（2）顶端细胞是绒毛里最成熟的上皮细胞，可为轮状病毒的繁殖提供特别适合的细胞内环境。
轮状病毒侵入靶细胞的机制
· 细胞摄入轮状病毒后，将其固定在内体里，由细胞膜包裹。
· 初始钙离子的浓度和细胞外环境中的一致。 · 然后，VP4，或VP7，或VP4和VP7在内体
内形成孔洞，使病毒四周钙离子浓度下降，并与胞浆里的钙离子浓度一致。使病毒易于脱壳。
· 在完整的病毒衣壳里，VP7以三聚体的形式存在。当钙离子浓度下降，三聚体分开。中和抗体结合的是VP7的三聚体形式，推测这种结合可能通过“夹紧”VP7三聚体从而防止病毒脱壳。

轮状病毒的LLR疫苗株全基因组克隆及结构蛋白VP6基因遗传特征

Ｌａｎｚｈｏｕ７３００４６，ＧａｎｓｕＰｒｖｉｏｎｃｅ，Ｃｈｉｎａ
Ｃｏｒｒｅｓｐｏｎｄｉｎｇａｕｔｈｏｒ：ＧａｏＸｕｅ￣ｕｎ。Ｅ — ｍａｉｌ：ｘｊｇａｏ＠ｖａｃｍｉｃ．ｃｏｎｒ
基酸变化完全一致，与ＧｅｎＢａｎｋ中ＬＬＲ参考株（Ｌ１１５９５）同源性分别为９９．９％和９９．７％。与１６株ＳＧＩ亚群ＲＶ
代表株之间，核苷酸与推导的氨基酸序列同源性分别为８４．０％～９９．７％和９７．０％一９９．２％；与不同亚群ＲＶ代表
株之间，ＶＰ６基因核苷酸与推导的氨基酸同源性分别为７７．７％一８２．２％和９２．２％一９３．５％；ＬＬＲ株各代病毒ＶＰ６基因核苷酸、氨基酸序列高度保守，各关键功能区未发生变异。结论确定该病毒的分类学地位提供了科学依据。关键词：轮状病毒；兰州羔羊轮状病毒（ＬＬＲ）株；基因组克隆；ＶＰ６基因；遗传稳定性
ＬＬＲ株全基因组１１条ＲＮＡ，由１８４９８个核苷酸组成，共
的质量控制和研发提供依据。方法
４９代病毒ＲＮＡ。通过ＲＴ．ＰＣＲ方法扩增ｕＩＲ株（３８代）全基因组１１个ｄｓＲＮＡ片段和传代病毒ＶＰ６基因，分别将
ｓｔｒａｉｎＬＬＲ。ｔｏｉｍｐｒｏｖｅｓｔｕｄｙｏｆｔｈｅｋｅｙｇｅｎｅｔｉｃｓｔａｂｉｌｉｔｙ，ａｎｄｔｏｐｒｏｖｉｄｅａｂａｓｉｓｆｏｒｔｈｅｑｕａｌｉｔｙｃｏｎｔｒｏｌａｎｄｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔｏｆ

猪轮状病毒GD株VP6基因的克隆及序列分析

Ｋ盯ｗ呻ｄ：ｏｃｅｒｍｖｒ（Ｉ）ＶＰｅｏ；ｌｎｎ；ｅｕｎｅａａｙｉＩｐｒｉｏｉＰ；６ｇｎｍｅｃｏｉｇｓｑｅｃｎｌｓｎｕｓ
轮状病毒（ｏａｉｕＶ）Ｒｔｖｒ，Ｒ是呼１材料和方法１５轮状病毒Ｖ６基因的扩增．Ｐ肠孤病毒科轮状病毒属的成员，是各１１病毒．按Ｔｉｏ试剂盒说明的方法，ｒｚｌ种幼龄动物非细菌性腹泻的主要病猪轮状病毒为本实验室从广东从病毒培养液中提取病毒基因组原之一［１］国猪轮状病毒ＰＶ感染某规模化猪场分离获，。我Ｒ猪轮状病毒从ＲＡＮ，按１ＩＬ反转录体系进行反转０ｌ非常普遍，染后，仔猪机体免疫广东分离获得，感使病毒经Ｋ４细胞培录，ＴＰＲ反应参照试剂盒说明书进Ｍ０Ｒ —Ｃ力急剧下降，从而诱发多种腹泻病原养，６代毒用于本研究。第行，同时设立阴阳性对照．．体混合感染，导致仔猪死亡率上升，１２载体与菌株．１６ＰＲ产物克隆与鉴定．Ｃ或生长缓慢、停滞［。２］ｐＤ８Ｔ自ＴｋｒＭ１一购ａａａ公司，肠大所得阳性扩增产物经纯化后克Ｖ６是ＲＰＶ唯一的内衣壳蛋白，由杆菌（Ｈ本实验室保存。Ｄ５ａ）隆到ｐＤ８Ｔ体中，Ｍ１－载转化大肠杆菌基因片段６编码３７９个氨基酸，占１３试剂和工具酶约．Ｊ１９提取质粒，酶切和ＰＲ鉴定Ｍ０，经Ｃ病毒蛋白总量的５％Ｐ１。Ｖ６是重要的Ｔｉｏ试剂盒购自大连宝生物为阳性样品后，往宝生物工程（ｒｚｌ送大表位标志，具有免疫原性和抗原性，工程有限公司；Ｎ胶回收试剂盒，ＤＡ质连）限公司测序。利用ＤＡｔｒ软有ＮＳａ是ＲＶ的群抗原和亚群抗原，同一血粒快速提取试剂盒均购自美国Ｏｅａ件对测序结果进行分析。ｍｇ清群具有共同抗原［５３］＿。在Ａ组轮状Ｂｏｔｋ公司；Ｎａｋｒ为北京鼎１７ＲＰ基因序列的同源性比较ｉ— ｅＤＡＭｒｅ．ＶＶ６病毒中，ＰＶ６蛋白基因在序列上具有国生物技术有限公司产品。用Ｂａｔ和ＤＡｔｒ软件对ｌｓＮＳａ高度的保守性，诊断实验中检测到１４引物是．Ｇｎａｋ中ｌ株ＰＶ的ｖ６全基因ｅＢｎ１ＲＰ的主要抗原，所有Ａ群轮状病毒都具根据Ｇｎａｋ中ＰＶ核酸序列序列进行同源性比较，ｅｌｎ３Ｒ并绘制基因系有共同的群特异性抗原Ｖ６。Ｐ［设计ｌＶ６片段扩增引物。引物由统发育进化树。对Ｐ本研究通过对ＰＶ６Ｐ基因上海生物工程有限公司合成。引物序２结果ＲＤＶ６进行分析，从基因角度分析广东省流列、位置及扩增片段大小见表１。２１目的基因扩增．．行毒株与其他毒株间的关系，为探索

轮状病毒基因重配株[发明专利]

专利名称：轮状病毒基因重配株专利类型：发明专利
发明人：白植生,朱伟文
申请号：CN02117686.8
申请日：20020516
公开号：CN1396258A
公开日：
20030212
专利内容由知识产权出版社提供
摘要：本发明涉及一组轮状病毒基因重配株及其构建方法，该组基因重配株是携带人轮状病毒(G1型，G2型G3型G4型)特异性有效抗原VP7编码基因片段的动物轮状病毒，构建成一组安全，高效的轮状病毒活疫苗的理想疫苗株，具有良好的生物学性状，可用于生产口服轮状病毒活疫苗，轮状病毒诊断试剂及轮状病毒抗原和抗体，用于小儿轮状病毒腹泻的预防和诊断。

申请人：北京诺泰科华生物技术开发有限公司
地址：100089 北京市海淀区万柳阳春光华10-3-1201
国籍：CN
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2005～2006年武汉地区A组轮状病毒G和P基因型别的特征

2005～2006年武汉地区A组轮状病毒G和P基因型别的特征轮状病毒(Rotavirus，RV)属于呼肠孤病毒科(Reoviridae)轮状病毒属，是引起婴幼儿急性胃肠炎最常见的病毒病原，每年全世界因RV感染从而导致约1.25亿婴幼儿腹泻和90万婴幼儿死亡，其中大多数发生在发展中国家。

RV引起的腹泻至今尚无特效药物进行治疗，只能对症进行补液纠治，所以预防就显得特别重要。

而疫苗预防又是最有效的方法，因此发展RV疫苗成为当今世界卫生组织疫苗发展计划的首要任务之一。

RV的外壳结构蛋白VP4、VP7具有中和抗原活性，能刺激机体产生中和抗体，根据VP7、VP4蛋白的差异，RV可分为不同的G、P 基因型。

RV的基因型会随着区域的不同而不同，即使同一区域的RV，其基因型会随着时间的不同而不同。

因此，为了研制合适的RV疫苗，必须开展对当地RV基因型的监测。

本研究即对武汉地区2005～2006年的A组轮状病毒的G、P基因型进行分析，以期为轮状病毒的防治及研制适合武汉地区的疫苗提供实验依据。

具体研究内容如下：第一节综述了轮状病毒的蛋白质功能，流行病学研究，临床表现，主要血清型及变化，发病机理，治疗和预防，实验室诊断以及RV疫苗研究的现状和展望。

第二节利用PAGE检测了武汉地区收集的腹泻儿童粪便标本，初步分析了武汉地区腹泻儿童中RV的区域，时间和人群分布；发现男女宿主间的发病率无显著性差别，在不同年龄组的宿主中RV的阳性率存在明显差异，6月～1岁年龄组的阳性率最高。

第三节利用多重RT-PCR对武汉地区2005～2006年A组轮状病毒G基因型构成进行研究，发现武汉地区A组轮状病毒性腹泻是以G3(66.2％)型为主，其次是G1(20.5％)型，G1／G3混合型占8％。

第四节利用多重巢式RT-PCR对武汉地区2005～2006年A组轮状病毒P基因型构成进行研究，结果显示武汉市A组轮状病毒由P[4]、P[8]基因型构成，以P[8]基因型为主，占94.35％，而P[4]仅占1.32％，未能P基因分型的占1.51％。

结构蛋白VP4、VP6和VP7对牛轮状病毒的致病作用

结构蛋白VP4、VP6和VP7对牛轮状病毒的致病作用作者：冯春花，郭东光，陈明艳来源：《现代畜牧科技》 2018年第6期摘要：牛轮状病毒是引发犊牛严重腹泻的重要病原体，其结构蛋白VP4、VP6与VP7三者的相互作用对病毒的组装与感染发挥着至关重要的作用。

在病毒感染过程中，VP4可以影响VP7的抗原性，而VP7通过反向调节VP4又可以影响病毒体对宿主细胞的特异性吸附作用，此外，三者在结构上的特异性分布，不仅可以构成病毒框架和稳定VP4、VP7的空间结构，而且可以增强它们的免疫原性。

所以，对结构蛋白VP4、VP6和VP7在结构上和生物学特性上的认识，对于今后在治疗和预防轮状病毒性疾病具有非常重要的生物学意义。

关键词：牛；轮状病毒；结构蛋白VP4；结构蛋白VP6；结构蛋白VP7中图分类号：S858. 23文献标识码：B文章编号：2095-9737(2018)06-0015-011 流行特点牛轮状病毒(BRV)属于呼肠孤病毒科，轮状病毒属的成员，是引起人和多种幼龄动物非细菌性腹泻的重要病原之一，多数新生犊牛腹泻与轮状病毒感染有关，给全球养牛业带来巨大的经济损失。

自1969年首次从Nebraska新生牛犊腹泻粪便中分离到牛轮状病毒NCDV株以来，世界各地均有不同RV感染牛的报道。

2 轮状病毒结构特征BRV病毒为双股RNA病毒，其基因组共包含11个不连续的基因片段，且每段含一个ORF，除NSP5和NSP6两个非结构蛋白由基因组最小的一段RNA编码外，其余每段均编码一个蛋白，即6种结构蛋白( VPl - VP4，VP6，VP7)和6种非结构蛋白(NSPl-NSP6)‘3]。

因VP4、VP6和VP7三种结构蛋白的免疫原性与轮状病毒的抗原特性有重要关系，目前已成为很多学者研究开发预防牛轮状病毒疫苗的重要靶标蛋白。

2.1 VP4结构蛋白功能及特征VP4是由BRV第4基因片段编码，由776个AA组成，分子量为88kDa的病毒多肽。

猪轮状病毒L1株VP 7基因克隆及序列分析

猪轮状病毒L1株VP 7基因克隆及序列分析陈晓春;王继文;吴华伟;蔡青秀;邓永;高金源;郎洪武【摘要】The VP 7 gene ofporcine rotavirus have been cloned and sequenced using a pair of primers designed according to the published cDNA sequence.The results demonstrated that the VP7 gene was 1062 nucleotides long and contains a long open reading frame,which codes fora VP7 protein of 326 amino acids.The VP7 gene shared from 88.8% to 93.7% nucleic acid identity and from 93.3% to 94.2% amino acid identity with PRV G5 genotype reference strains. Phylogenetic analysis revealed that the VP7 gene of L1 strain grouped very closely G5 genotype reference strains. SoL1 strain was proved to belong to G5 genotype. Results from the analysisof antigenic index, L1 strain and G9 genotype NMTL strain had differences in amino acid 25 to 29,86 to 102,142 to 152,211 to 226, 263 to 286,which fields would play a important role of immunogenicity of PRV.%根据GenBank已发表的猪轮状病毒VP7基因保守序列，设计特异性引物扩增猪轮状病毒L1株VP 7全基因序列并进行序列测定及分析。

一例猪轮状病毒的实验室诊断及VP7基因序列分析

一例猪轮状病毒的实验室诊断及VP7基因序列分析
唐慧伦;欧阳璐;李清竹;欧云文
【期刊名称】《湖南畜牧兽医》
【年(卷),期】2024()2
【摘要】为确定湖南省怀化市某规模化猪场仔猪腹泻原因,采用RT-PCR试验方法对病死仔猪肠道内容物及粪便进行流行性腹泻病毒、传染性胃肠炎病毒、轮状病毒检测,并对RT-PCR产物进行测序分析、同源性比对。

结果表明,仔猪腹泻为轮状病毒感染引起,经序列分析发现该毒株与G9亚型毒株位于同一分支上,且同源性最高,为95.8%,因此判断此次引起仔猪发病为G9型猪轮状病毒感染所致,为当前省内流行毒株。

【总页数】4页(P14-17)
【作者】唐慧伦;欧阳璐;李清竹;欧云文
【作者单位】四川省达州市动物疫病预防控制中心;湖南省桂阳县农业农村局;四川省开江县动物疫病预防控制中心;中国农业科学院兰州兽医研究所
【正文语种】中文
【中图分类】S858.28
【相关文献】
1.猪轮状病毒GD1株VP7基因的克隆及序列分析
2.猪轮状病毒中国分离株JL94 VP7基因的克隆与序列分析
3.A群猪轮状病毒JS株vp7基因序列分析
4.华东地区
猪A群轮状病毒的VP7和VP4基因序列分析5.一例猪德塔冠状病毒的实验室诊断及S基因部分序列与分析
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轮状病毒NSP5结构与功能的研究进展

轮状病毒NSP5结构与功能的研究进展刘洋;林晓晨;李鸿钧【期刊名称】《生物学杂志》【年(卷),期】2018(035)005【摘要】轮状病毒(RV)是世界范围内导致婴幼儿胃肠道疾病的主要病原体,RV基因组由11个分节段的双链RNA组成,分别编码6个结构蛋白(VP1、VP2、VP3、VP4、VP6和VP7)和6个非结构蛋白(NSP1、NSP2、NSP3、NSP4、NSP5和NSP6),其中第11基因片段编码非结构蛋白NSP5.NSP5蛋白较大,NSP5在病毒感染细胞中以二聚体形式存在,是一个高度磷酸化的蛋白,可与轮状病毒其他非结构蛋白或结构蛋白相互作用,具有RNA结合活性,在病毒复制过程中主要通过与NSP2的一系列相互作用发挥功能.对轮状病毒的相关结构与功能的研究十分必要,近年来,对轮状病毒的非结构蛋白进行了大量研究,主要集中在其结构、表达、功能及免疫学性质方面,现就目前国内外对轮状病毒NSP5结构与功能的研究进展进行综述.【总页数】3页(P72-74)【作者】刘洋;林晓晨;李鸿钧【作者单位】昆明医科大学,昆明650500;中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所,云南省重大传染病疫苗研发重点实验室,昆明650118;中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所,云南省重大传染病疫苗研发重点实验室,昆明650118;中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所,云南省重大传染病疫苗研发重点实验室,昆明650118【正文语种】中文【中图分类】Q522;R373【相关文献】1.传染性支气管炎病毒非结构蛋白nsp5在真核细胞中的重组表达及鉴定 [J], 耿阳;牟小东;刘然;边葶苈;廖敏;周继勇2.A群轮状病毒NSP5蛋白在细胞器中定位特性 [J], 谷凤丽;石达;时洪艳;陈建飞;张鑫;袁婧;徐天;董慧;冯力3.轮状病毒NSP5真核表达载体的构建、鉴定及功能研究 [J], 陈林林; 周艳; 林晓晨; 杜静; 刘洋; 汪艺; 李鸿钧4.牛轮状病毒NSP5基因SYBR Green Ⅰ荧光定量RT-PCR检测方法的建立与应用 [J], 于德斌;曹存;徐晓静;于力;常继涛5.轮状病毒NSP5克隆、鉴定、表达及其条件优化 [J], 林家锋;陶晓莉;陆恒章;于美玲;李婷婷;李藤菲;程美慧;李永刚因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

A组轮状病毒G4型地方株VP7基因在杆状病毒系统中的表达

A组轮状病毒G4型地方株VP7基因在杆状病毒系统中的表
达
何湘君;钱渊
【期刊名称】《微生物学报》
【年(卷),期】1999(039)002
【摘要】Ａ组轮状病毒是导致婴幼儿重症腹泻的最主要病毒病原，位于病毒外壳上的ＶＰ４和ＶＰ７蛋白具有中和抗原活性，与病毒的毒力及免疫保护性有关。

ＶＰ７是外壳上的主要糖蛋白，根据其抗原性的不同，可将Ａ组轮状病毒划分出不同的血清型（Ｇ１～Ｇ１４）［１］，而对疫苗的研...
【总页数】3页(P168-170)
【作者】何湘君;钱渊
【作者单位】首都我科研究所北京市感染与免疫中心实验室;首都我科研究所北京市感染与免疫中心实验室
【正文语种】中文
【中图分类】R373.2
【相关文献】
1.新城疫病毒F48E9株和La Sota株F基因在Bac-to-Bac昆虫杆状病毒系统中的表达 [J], 袁萍;闫丽辉;冉多良;刘培欣;闻晓波;曹殿军
2.兔轮状病毒VP7基因在重组杆状病毒中的表达 [J], 周洁;王娱;胡建华;高诚
3.猪生殖和呼吸综合征病毒中国分离株B13株ORF5基因在杆状病毒系统中的表
达 [J], 赵耘;罗长宝;林志雄;陈茹;李树根;陈博文;刘尚高
4.A组轮状病毒我国地方株VP6基因的序列测定及其在杆状病毒系统中的表达 [J], 李国华;钱渊;何湘君;霍云雯
5.G1型A组轮状病毒地方株VP7基因在杆状病毒系统中的表达 [J], 何湘君;钱渊;靖宇;李国华
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猪A组轮状病毒VP6基因转植物的研究的开题报告

猪A组轮状病毒VP6基因转植物的研究的开题报告
题目：猪A组轮状病毒VP6基因转植物的研究
研究背景：
轮状病毒是引起人和动物严重肠胃道感染的主要病原体之一。

目前，猪A组轮状病毒是世界各地猪群中最常见的病毒之一，它能引起猪的腹泻和呕吐等临床表现，严重影响了养猪业的发展。

目前，预防和控制猪A组轮状病毒主要依靠疫苗，并且现有疫苗的效果并不理想。

近年来，植物基因工程技术被广泛应用于生产医药和食品。

由于植物无法感染动物病毒，因此可以将动物病毒的免疫原基因转化到植物体内，制作出植物源性疫苗，具有良好的安全性和经济性。

因此，将猪A组轮状病毒VP6基因转化到植物中，制作出植物源性疫苗，成为了解决猪A组轮状病毒问题的新思路。

研究内容：
本研究计划从猪A组轮状病毒中克隆VP6基因，将其转化到大豆和玉米等植物中。

通过PCR扩增，电泳分析和DNA测序鉴定转基因植物的正确性。

采用Western blotting等方法检测转基因植物中VP6蛋白的表达情况，并对其免疫原性进行评价。

研究意义：
本研究将为猪A组轮状病毒疫苗的研制和生产提供新的思路和方法，具有重要的应用前景。

同时，研究成果还能为植物源性疫苗的研究和开发提供新的基础数据和实验方法。

猪轮状病毒VP6基因的原核表达载体构建和表达

猪轮状病毒VP6基因的原核表达载体构建和表达张二芹;马强;王会岩;闫明田【期刊名称】《河南农业科学》【年(卷),期】2008(000)005【摘要】根据已报道的猪轮状病毒VP6基因序列设计了2对引物,利用pGEM-T-Easy-VP6重组质粒为模板,经PCR扩增获得了1194bp的产物.将扩增片段分别插入到pET5a和pGEX-4T-2构建表达载体,并分别在大肠杆菌BL21(DE3)Plyss和ER2566中表达.结果表明:成功构建了重组质粒,而且该片段在大肠杆菌中也成功表达,获得了大小为44kD的蛋白.【总页数】3页(P104-106)【作者】张二芹;马强;王会岩;闫明田【作者单位】南阳师范学院,生命科学与技术学院,河南,南阳,473061;河南省农业科学院,畜牧兽医研究所,河南,郑州,450002;吉林农业大学,动物科技学院,吉林,长春,130118;信阳市明港镇农村经济发展中心,河南,信阳,464194【正文语种】中文【中图分类】S828【相关文献】1.表达猪轮状病毒VP4基因重组乳酸球菌表达载体构建及免疫原性分析 [J], 李桂伟;乔薪瑗;刘伯臣;马广鹏;刘敏;刘力威;李一经2.猪轮状病毒JL94株vp4全基因克隆及原核表达载体构建 [J], 于晓龙;宋岩;李宝贤;李一经3.猪轮状病毒地方株JL94株VP6基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达 [J], 陈淑红;李一经;师东方4.新疆部分地区牛轮状病毒VP6基因的原核表达与免疫反应性分析 [J], 陆亚冬;刘贤侠;陈创夫5.APEC毒力基因ygeG的原核表达载体构建、表达纯化及鉴定 [J], 姜楠;郑倩倩;李倩文;涂健;宋祥军;邵颖;刘红梅;祁克宗因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

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维普资讯
２００７，２（２３１）
ＣｈｉｓｒｌｏｏｎｅｎｅｅＪｏｕｎａｆＺｏｏｓｓ
中国人兽共患病学报
１６１７
文章编号：０２６４２０）２１６～０１０ —２９ｉｈａｍｅｈｄｔｍｐｉｈｎｉｅｆａｍｅｔｆｇｎｓＶＰ６，７，４ａｄＮＳ４ｆｏｇｏｐＣｒｔ — ＳＴ：ｓａｌｔｏｏａｌｙｔｅｅｔｒｇｎｅｅｓｆｒｏＶＰＶＰｎＰｒｍｒｕｏａｖｒｓＩｒｅｏｄｆｅｔｅｐｙｏｅｅｉｒｌｔｎｍｏｇｔｅｆｌｔａｎＷｕ８ｎｔｅｉａｔａｎ，３２ｓｏｌｓｅｉｎｉｕ．ｎｏｄｒｔｅｉｈｈｌｇｎｔｅａｉｓａｎｈｉｄｓｒｉｎｃｏｅ－２ａｄｏｈｒｖｒｌｓｒｉｓ４６ｔｏｐｃｍｅｓｆｏｐｔｎｓｗｉｈｄａｒｅｌａｅｒｏｌｃｅｕｉｇｔｅｉｄｆｔｒｍａｉｔｔｉｒｈａｉａｌｇｓｗｅｅｃｌｔｄｄｒｎｗｏｐｒｏｓｏｉ，ｒｍｃ２０ｏＡｐ０３ａｄｆｏＮｏ０３ｅｎｅｍｅｆｏＤｅ００ｔｒ２０ｎｒｍｖ２０ｔｅ０７ｏＦｂ２０．ＴｈｒｓｎｅｏｏａｉｕｅｎＳＯｌｐｃｍｅｓｗａｅｅｍｉｅｙｄｔｃｉｎｏｈｓｅｐｅｅｃｆｒｔｖｒｓｓｉｔＯｅｉｎｓｄｔｒｎｄｂｅｅｔｆｔｅｄＲＮＡｒｇｎｆｒｔｖｒｓｓｏｆａｍｅｔｏｏａｉｕｂｏｙｃｙａｄｅｌｃｒｐｏｅｉ，ｎｈｎｉｅｆａｍｅｔｆＶＰ７ＶＰ６ＶＰ４ａｄｎｐｅｅｒｍｐｉｉｙＲＰＲｙｐｌａｒｌｍｉｅｇｌｅｅｔｏｈｒｓｓａｄｔｅｅｔｒｇｎｓｏｒ，，ｎｓ４ｇｎｓｗｅｅａｌｅｂＴ— Ｃｆｄｗｉａｒｆｐｃｆｃｐｉｒ．Ｎｕｌｉｃｄｓｑｅｃａａａｄｈｄｏｈｌｉｙａａｙｉｏｈｅｃｄａｉｏａｉｓｗｅｅａａｙｅｔ９ｐｉｓｏｅｉｉｒｍｅｓｈｓｃｅｃａｉｅｕｎｅｄｔｎｙｒｐｉｃｔｎｌｓｓｆｔｅｄｄｕｅｍｎｃｄｒｎｌｚｄｉ
Ｃ组轮状病毒主要基因全片段扩增及武汉地方株Ｗｕ２的Ｖ６和Ｖ７码基因序列分析＊８ＰＰ编
王远虹，。周璇小林宣道。朱泽荣刘满清杨占秋。，，，，
摘要：目的建立ｃ组轮状病毒ＶＰ、７Ｖ４和ＮＳ４基因全片段扩增方法；６ＶＰ、ＰＰ明确武汉地方株Ｗｕ２与其他毒株的８
９．２和９．４～９．３。结论Ｃ组轮状病毒基因非常保守，化缓慢。２０７１９３４８进０１年武汉地方株Ｗｕ２与１９８９５年武汉地方株２８相比．７和ＶＰ０株ＶＰ６抗原表位存在差异。
关键词：状病毒；组；因；列测定；化分析；轮Ｃ基序进亲水性分析中图分类号：３３９文献标识码：Ｒ７．Ａ
ＡｍｐｉｉａｉｎｏｈｎｔｒｒｇｅｆｇｏｐＣｏａｉｕｅｅｎｄｔｅｓｑｕｎｅｌｆｃｔｏｆｔｅｅｉｅｆａｍｎｔｏｒｕｒｔｖｒｓｇｎｓａｈｅｅｃａｌｓｓｏｎａｙｉｎＶＰ６ａｎｄＶＰ７ｇｎｓｉｈｉｌｔａｎＷｕ８ｓｌｔｄｉｕｎａｅｅｅｎｔｅｆｅｄｓｒｉ一２ｉｏａｅｎＷｈａｒａ
系统发生关系。腹泻患者大便。方法ＰＧＥ筛查病毒；计９对引物Ｒ — Ｃ扩增ＶＰ、７ＶＰＡ设ＴＰＲ６ＶＰ、４和ＮＳ４基因；６ＰＶＰ、
ＶＰ７序列及亲水位点分析。结果Ｗｕ２ＶＰ和ＶＰ８６７基因核酸序列与其它人Ｃ组轮状病毒相比同源性分别为９．５～８４
ＷＡＮＧａ－ｏｇ，ＯＵＹｕｎｈｎＺＨＸｕａＫＯＢＡＹＡＳＨＩＮｏｕｍｉｈ，ｎ，ｂｃｉＺＨＵ－ｏｇ，Ｕａ－ｉｇ，ＺｅｒｎＵＭｎｑｎＹＡＮＧｈｎｑｕＺａ－ｉ
（ｈｎＣｎｅｓｏｓｓｓｒｖｎｉｎ＆Ｃｎｒ１Ｗｕａ３０２ＣｉａＷｕａｅｔｒｆｒＤｉａｅＰｅｅｔｅｏｏｔ．ｈｎ４０２．ｈｎ）ｏ