fgg在结直肠癌中的表达及意义
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F G G 在结直肠癌中的表达及意义
马舒 婷 ,谢 风 ,刘 金 华 ,李 威 *
( 吉 林 大 学 中 日 联 谊 医 院 检 验 科 ,吉 林 长 春 130033)
摘 要 :目 的 研 究 F G G 蛋 白 在 结 直 肠 癌 及 其 周 围 的 癌 旁 组 织 的 表 达 情 况 ,探 讨 F G G 在 结 直 肠 癌 中 的 临 床 意 义 .
tography, and their accuracy was verified by Western blot. Results The expression of FGG in colorectal cancer was
higher than that in normal tissues after mass spectrometry identification,and Western blot revsults were consistent with
测 序 级 胰 蛋 白 酶 、D N A 酶 、R N A 酶 、考马斯亮
* 通讯作者
蓝-G2 5 0 均 购 于 西 格 玛 (美 国 )公 司 . 蛋 白 定 量 试 剂 盒 、I A A ( 购 于 Bio-Rad 公 司 ),D T T , F A ,尿 素 , TM ED 。液 相 色 谱 分 析 仪 (A gilen t公 司 ) , LTQ XL 离 子 讲 质 谱 仪 ( Thermo F is h e r 公 司 ),UV- 2 0 0 0 型 分光光度计。 1.3 实验方法 1 . 3 . 1 总 蛋 白 的 提 取 、蛋 白 浓 度 测 定 将 冻 存 的 待 测 组 织 样 本 取 出 ,充 分 研 磨 至 匀 浆 。在 4 C ,12 000 g 条 件 下 离 心 ,l h ,留 取 上 清 液 待 用 。考 马 斯 亮 蓝 染 色 后 用 U V -2000型分光光度计于590 n m 处进行 比 色 ,从 而 计 算 出 样 本 蛋 白 的 浓 度 。 1.3.2组织蛋白水解多肽混合物的制备将样本 从 冰 箱 中 取 出 置 于 室 温 下 平 衡 后 ,为 降 低 尿 素 在 样 本 中 的 浓 度 ,应 用 N H i H C O a 稀 释 。 加 人 一 定 量 D T T 后 充 分 混 匀 ,使 终 浓 度 调 至 20 mmol/L , 置 5 6 C .避 光 1 h 。待 上 述 操 作 完 成 后 降 至 室 温 . 取 1 mol/L 1A M 适 量 ,使 终 浓 度 调 至 50 m m oV L ,置 室 温 ,避 光 30 min。测 序 级 胰 酶 按 胰 酶 与 蛋 白 质 1: 5 0 的 比 例 加 人 ,而 后 置 于 37'C 水 浴 箱 中 ,过 夜 ,酶切 产 物 (真 空 抽 干 ),保 存 于 一 8 0‘C 条 件 下 。 1 . 3 . 3 液 质 联 用 技 术 分 析 待 测 样 本 用 F A 溶解 后 取 50 y g 上 样 ,洗 脱 的 多 肽 用 L T Q X L 质 谱 仪 进
2 3 例 结 直 肠 癌 患 者 (均 被 吉 林 大 学 中 日 联 谊 医 院 确 诊 ),手 术 中 切 除 的 新 鲜 组 织 作 为 研 究 对 象 ,同 时 留 取 与 其 配 对 的 癌 旁 组 织 (距 离 取 材 的 癌 组 织 10 c m 以上)。 以 上 取 材 离 体 后 液 氮 速 冻 ,置 _ 8 ( TC保 存备用。 1 . 2 主要试剂与仪器
that. Conclusion FGG can be regarded as a potential marker for early diagnosis of co words:F G G ; Colorectal cancer; Two dimensional chromatography and m assspectrometry; Western blot
结果显示fgg在结直肠癌中的表达水平明显高于与其配对的癌旁组织如图23讨论结直肠癌的发病率在近几年里居高不下与其他一些癌症相似发病具有隐匿性?一经确诊已接近中晚期
中国实验诊断学 2020年 3 月 第 2 4 卷 第 3 期
399
文 章 编 号 :1007 —4287(2020)03 —0399 —03
blot结果与 之 吻 合 。结 论 可 将 F G G 视为结直肠癌病情监测以及疗效预测中的潜在标志物之一。
关 键 词 :F G G ;结 直 肠 癌 ;液 质 联 用 技 术 ;Wes tern blot
中 图 分 类 号 :R 735.3+ 5 R 735.3+ 7
文 献 标 识 码 :A
The Expression and Significance of FGG in Colorectal cancer M A Shu-ting , X I E
以 及 评 价 作 为 该 病 肿 瘤 标 志 物 的 潜 力 。方 法 应 用 液 质 联 用 技 术 ,分 析 结 直 肠 癌 中 表 达 的 差 异 蛋 白 情 况 ,利 用 W est
ern blot 方 法 对 其 准 确 性 进 行 验 证 。结果 经 质 谱 鉴 定 后 得 出 F G G 在 结 直 肠 癌 中 较 正 常 组 织 中 表 达 增 高 ,Western
( C h i n J Lab D/ag-w,2 0 2 0 ,2 4 :0399)
纤 维 蛋 白 原 7 链 (FG G)是 纤 维 蛋 白 原 (F G ) 的 一 种 组 分 ,D N A 分 析 显 示 是 10. 5 k b 中 存 在 1 0 个 外 显 子 和 9 个 内 含 子 [1]的 片 段 。人 血 浆 中 F G 主要 由 肝 脏 产 生 ,由 a ,p 以 及 y 三 条 多 肽 链 以 二 硫 键 为 连 接方式组成m ,三 条 多 肽 链 分 别 由 FG A 、F G B 以 及 FGG基因编码。FGG可在凝血过程中发挥功 能 ,同 时 在 早 期 创 伤 性 修 复 中 具 有 稳 定 病 灶 和 引 导 上皮细胞迁移的作用。本 研 究 旨 在 探 究 F G G 在结 直 肠 癌 和 其 癌 旁 组 织 中 的 表 达 情 况 以 及 差 异 性 ,探 讨 FGG与肿瘤的发生及发展间的关系.进而为临 床提供诊断依据。 1 材料与方法 1 . 1 研究对象
, L I U J i?i-hua ^et a l . (D e p a r t
ment o f Clinical Laboratory ^China-J a pan Union H ospital o f J ili?i University %Chan^chun 130033-.China)
Abstract :Objective To study and discuss the expression of FCiG protein in colorectal cancer and its surrounding
healthy tissu es»and to explore its clinical significance in colorectal cancer and its potential as a tumor marker for the
disease. Methods Differential proteins expressed in colorectal cancer were analyzed by mass spectrometry and chroma