脂质体制备方法

脂质体制备方法
2 脂质体的制备方法
2.1 薄膜蒸发法该方法是将脂质及芯材（脂溶性药物）溶于有机溶剂，然后将此溶液置于大圆底烧瓶中，再旋转减压蒸干，磷脂在烧瓶内壁上会形成一层很薄的膜，然后加入一定量的缓冲溶液（生理盐水），充分振荡烧瓶使脂质膜水化脱落，即可制得脂质体。

尽管薄膜分散法是使用最广泛的方法，由于这种方法比较原始，所以尚存在较多缺点。

用该方法制备得到的脂质体的粒径较大且不均匀，为了使其粒径更小、更均匀，可通过超声波仪处理，在一定程度上降低脂质体的粒径，从而提高包封率。

如采用此法制备得到的细辛脑脂质体的包封率达54. 1%[5]。

2.2 超声波法
MLVs的混悬液经超声波处理，再通过 Sepharose 2B或4B柱色谱仪可去除较大的脂质体和
MLVs 。

常用的方法有探针型和水浴型。

小量脂质悬液（高浓度脂质或黏性水溶液）需要高能
量时用探针型。

水浴型更适于大量的稀释脂质。

郑宁等[6]采用薄膜 -超声分散法制备依托泊苷脂质体，按均匀设计的最优组合制备脂质体的平均包封率为（61.58±0.83）% ，粒径均小于2卩m,体外释药达到了长效缓释的作用，60Co灭菌后脂质体较稳定。

李维凤等⑺以薄膜-超声法和乙醚注入法制备硝苯地平脂质体，结果表明薄膜蒸发法和超声法综合使用，所得脂质体粒径均匀,粒度小,且多为单室。

2.3复乳法（二次乳化法）这种方法是先将脂质溶于有机溶剂,加入待包封芯材的溶液,乳化得到W/O
初乳,其
次将初乳加入到10 倍体积的水溶液中混合,进一步乳化得到W/O/W 乳液,然后在一定温度下去除有机溶剂即可得到脂质体,其包封率变化较大,一般为20%-80% 。

通过研究发现,
在第二步乳化过程和有机溶剂的去除过程中, 对脂质体的粒径有较
大影响的因素是温度, 较
低的温度有利于减小脂质体的粒径。

姚瑶等[8]采用二次乳化法制备的酪丝亮肽多囊脂质体,
不仅稳定性好，80%的粒径分布在20-30卩m，且包封率为92. 43%。

2.4反相蒸发法（逆相蒸发法）反相蒸发法最初由Szoka 和Papahadjopoulos 于 1978 年提出, 这
种方法适用于脂质成分中磷脂占有较大的比例, 且芯材中水溶性成分较多的情况。

一般的制备方法是将脂质等膜材料溶于有机溶剂中,加入芯材药物的水溶液经过短时超声振荡形成稳定的W /O 乳液后,减压蒸发除掉有机溶剂,形成所谓“反相胶团” ,在达到胶态后,滴加缓冲液,旋转蒸发使器壁上的凝胶脱落,然后在减压下继续蒸发,制得水性混悬液, 再除去未包入的芯材,即得到
单层脂质体。

因这种方法可包裹较大的水容积, 所以一般适用于包封水溶性药物、大分子生物活性物质等的情况。

李淑梅等[9]采用逆向蒸发法制备黄芪多糖脂质体,操作简单可行,包
封率为 44. 32%。

2.5 注入法将脂质和芯材溶于水中或者不相溶的有机溶剂中, 然后用微量注射器把有机相均速注射到水相（含水溶性药物）中,搅拌挥发除去有机溶剂,再超声得到脂质体。

此法根据溶剂的不同可分为乙醇注入法和乙醚注入法。

用乙醇注入法制备时若放慢注入速度可制得具有较高包封率的脂质体, 并且乙醇注入法避免了使用有机溶剂。

乙醚注入法制备的脂质体大多为单层脂质体，粒径绝大多数在2卩m以下，操作过程中温度比较低（40 — 50C），该方法适用于在乙醚中有较好溶解度和对热不稳定的芯材, 通过调节乙醚中不同磷脂的浓度, 可以得到不同粒径且粒径分布均匀的脂质体混悬液。

许洁等[10]采用乙醇注入法制备环孢素 A 脂质体, 包封率高达 87. 09%。

2.6冷冻干燥法
采用低温干燥技术，通过反复包封、冻干和重新融合来实现较高的包封率。

冻干法为提高脂质体储存期的稳定性提供了较好的解决方
法，它改变了液态脂质体不稳定和易氧化的缺点，具有工艺稳定、适合于工业化生产、质量易于控制和产品稳定性好等特点。

冻干法存在的问题是 :制备工艺
较复杂，成本相对高。

胥传来等人[11]研究了冷冻PST 脂质体的制备及其
物理稳定性，表明冻干后的PST 脂质体总体物理稳定性提高，置于室温下的保质期大大延长。

2.7 冻融法
此法是首先制备包封有芯材的脂质体，然后冷冻。

在快速冷冻过程中，由于冰晶的形成，使形成的脂质体膜破裂，冰晶的片层与破碎的膜同时存在，此状态不稳定，在缓慢融化过程中，暴露出的脂膜互相融合重新形成脂质体。

通过研究发现，冻融法制备的脂质体的包封率最高，但是粒径最大。

反复冻融可以提高脂质体的包封率。

该制备方法适于较大量的生产，尤其对不稳定的药物最适合。