常用缓冲溶液配制方法

常用缓冲溶液的配制方法1．甘氨酸–盐酸缓冲液（0.05mol/L）

2．邻苯二甲酸–盐酸缓冲液（0.05 mol/L）

3．磷酸氢二钠–柠檬酸缓冲液

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Na2HPO4·2H2O分子量= 178.05，0.2 mol/L溶液含35.01克/升。

C4H2O7·H2O分子量= 210.14，0.1 mol/L溶液为21.01克/升。4．柠檬酸–氢氧化钠-盐酸缓冲液

① 使用时可以每升中加入1克克酚，若最后pH 值有变化，再用少量50% 氢氧化钠溶

液或浓盐酸调节，冰箱保存。

5．柠檬酸–柠檬酸钠缓冲液（0.1 mol/L ）

6872柠檬酸钠Na 3 C 6H 5O 7·2H 2O ：分子量

294.12，0.1 mol/L 溶液为29.41克/毫升。 6．乙酸–乙酸钠缓冲液（0.2 mol/L ） 22

7．磷酸盐缓冲液

（1）磷酸氢二钠–磷酸二氢钠缓冲液（0.2）

242Na 2HPO 4·12H 2O 分子量 = 358.14，0.2 mol/L 溶液为71.628克/升。 NaH 2PO 4·2H 2O 分子量 = 156.01，0.2 mol/L 溶液为31.202克/升。

磷酸盐是生物化学研究中使用最广泛的一种缓冲剂，由于它们是二级解离，有二个pKa 值，所以用它们配制的缓冲液，pH 范围最宽：NaH 2PO 4： pKa1＝2.12，pKa2＝7.21； Na 2HPO 4：pKa1＝7.21，pKa2＝12.32

配酸性缓冲液：用NaH 2PO 4，pH ＝1～4，

配中性缓冲液：用混合的两种磷酸盐，pH ＝6～8， 配碱性缓冲液：用Na 2HPO 4，pH ＝10～12。

用钾盐比钠盐好，因为低温时钠盐难溶，钾盐易溶，但若配制SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳的缓冲液时，只能用磷酸钠而不能用磷酸钾，因为SDS(十二烷基硫酸钠)会与钾盐生成难溶的十二烷基硫酸钾。

磷酸盐缓冲液的优点为：①容易配制成各种浓度的缓冲液；②适用的pH 范围宽；③pH 受温度的影响小；④缓冲液稀释后pH 变化小，如稀释10倍后pH 的变化小于0.1。

其缺点为：①易与常见的钙Ca2+离子、镁Mg2+离子以及重金属离子缔合生成沉淀；②会抑制某些生物化学过程，如对某些酶的催化作用会产生某种程度的抑制作用。

Na 2HPO 4

·2H 2O 分子量 = 178.05，1/15M 溶液为11.876克/升。 KH 2PO 4分子量 = 136.09，1/15M 溶液为9.078克/升。 8．磷酸二氢钾–氢氧化钠缓冲液（0.05M ）

10．Tris–盐酸缓冲液（0.05M，25℃）

50毫升0.1M三羟甲基氨基甲烷（Tris）溶液与X毫升0.1N盐酸混匀后，加水稀释至100毫升。

C

HOCH2 NH2

分子量=121.14;

0.1M溶液为12.114克/升。Tris溶液可从空气中吸收二氧化碳，使用时注意将瓶盖严。11．硼酸–硼砂缓冲液（0.2M硼酸根）

硼砂Na2B4O7·10H2O,分子量=381.37;0.05M溶液（=0.2M硼酸根）含19.07克/升。

硼酸H3BO3,分子量=61.83,0.2M溶液为12.37克/升。

硼砂易失去结晶水，必须在带塞的瓶中保存。 12．甘氨酸–氢氧化钠缓冲液（0.05M ）

13．硼砂-氢氧化钠缓冲液（0.05M 硼酸根）

硼砂Na 2B 4O 7·10H 2O,分子量=381.43;0.05M 溶液为19.07克/升。 14．碳酸钠-碳酸氢钠缓冲液（0.1M ）

2+2+Na

2CO 2·10H 2O 分子量=286.2;0.1M 溶液为28.62克/升。 N 2HCO 3分子量=84.0;0.1M 溶液为8.40克/升。

pH标准缓冲溶液Standard pH Buffer Solutions

注：为保证pH值的准确度，上述标准缓冲溶液必须使用pH基准试剂配制。

常用pH缓冲溶液的配制和pH值

Preparation and pH Values of Common pH Buffer Solutions