还原糖的测定方法国标

还原糖得测定方法(1)
食物中还原糖得测定方法:岛镒酸钾滴定法与直接滴定法。

•一.高链酸钾滴定法1-0原理鼻样品经除去貳白质后■其中还原糖在碱性环境下将铜盐还原为氧化亚铜•加硫酸铁后•氧化亚铜被氧化为铜盐. 以岛猛酸钾溶液滴定氧化作用后生成得亚铁盐，根据岛镒酸钾消耗虽计算氧化亚同含虽，再査表得还原糖量。

儿适用范鬧
GB5009. 7 一85•木法适用于所有食品中还原糖得测定以及通过酸水解或酶水解转化成还原糖得非还原性糖类物质得测定。

3。

仪器
(1 )滴定管
(2) 25ml古氏坦竭或G 4垂融划圳-(3 )真空泵
⑷水浴锅
4•试剂
除特殊说明外•实验用水为蒸係水，试剂为分析纯。

4.1 6 mol/L盐酸:址収50ml盐酸加水稀释至100 ml。

4。

2甲基红指示剂:称取10mg甲基红，用10 0ml乙醇溶解。

4。

3 5 mo 1 /L氢氧化钠溶液:称取20g氢氧化钠加水溶解并稀祥至1 0 Om 1 o 4. 4喊性酒石酸铜甲液:称収34。

639g 硫酸铜(CuSO4・5 H20),加适虽水溶解•加0。

5ml硫酸，再加水稀释至500ml.用精制石棉过滤。

4、5碱性酒石酸铜乙液:称取173g酒石酸钾钠与5 0 g氢氧化钠•加适虽水溶解•并稀释至500讥用精制石棉过滤•贮存干橡胶塞玻璃瓶中。

4。

6精制石棉:取石棉先用3mo 1 /L盐酸浸泡2〜3天•用水洗汛再加2、5mol/L氢氧化钠溶液浸泡2~3天, 倾去溶液，再用热碱性酒石酸铜已液浸泡数小时•用水洗净。

再以3 mol/L盐酸浸泡数小时,以水洗至不呈酸性。

然后加水振摇•使成微细得浆状软县委•用水浸泡并贮存于玻璃瓶中,即可用做填充占氏珀圳用.
4.7 0、100 0 mol/L商猛酸钾标准溶液。

4、8 1 mol/L氢氧化钠溶液:称取4g氢氧化钠•加水溶解并稀释至lOOmL
4。

9硫酸诜溶液:称取50g硫酸诜，加入200ml水溶解后，慢慢加入1 0 0ml硫酸•冷却后加水稀释至1 J鼻
4、10 3mo 1 /L盐酸:虽取30ml盐酸•加水稀释至120m仁弘•操作方法
5、I样品处理：鼻5。

1、1乳类.乳制品及含蛋白质得食品:称取约Oc 5~2 g固体样品(吸取2~1 0 ml液体样品)，置于250 ml容fit瓶中，加5 0 ml水,摇匀。

加入1 0 ml碱性酒石酸铜甲液及4 milmol/L氢氧化钠溶液•加水至刻度•混匀。

静宜30min.用干燥遊纸过滤•弃去初滤液麓液备用° (注:此步骤目得就是沉淀黃白1。

2酒精性饮料:吸取100 ml样品启于蒸发1U1中，用1 mol/L氢氧化钠溶液中与至中性，在水浴上蒸发至原体积1/4后(注:如果蒸发时间过长，应注总:保持溶液pH为中性)•移入25 0 m 1容虽瓶中。

加50 m 1水,混匀。

以下按5O 1. 1自”加10m 1碱性酒石酸铜甲液”起依法操作。

» 5。

1.3含多量淀粉得食品:称取2-10 g样品•宜于250 ml容虽瓶中，加200 ml水■在4 5 t水浴中加热1 h，并时时振摇。

(注总:此步骤就是使还原糖溶于水中•切忌温度过商•因为淀粉在商温条件下可糊化、水解•影响检测结果。

) 冷却后加水至刻度，混匀，静置。

吸取200 ml上清液于另-250 ml容址瓶中，以下按父1 . 1自"加10m 1碱性酒石酸铜甲液”起依法操作。

鼻5」、4含有脂肪得食品:称取2~1 0 g样臥先用乙碰或石汕碰淋洗3次，去除醴层、加入50m 1水混匀•以下按5.1、1自咖10ml碱性酒石酸铜甲液”起依法操作。

5。

1。

5汽水等含有二氧化碳得饮料:吸取1 00 ml样品宜于蒸发皿中，在水浴上除去二氧化碳后•移入2
50 ml容虽瓶中•并用水洗涤蒸发皿•洗液并入容虽瓶中•再加水至刻度,混匀后•备用。

鼻5 ° 2样品测定：
吸取50ml处理后得样品溶液•于4 00ml烧杯中•加入2 5ml碱性酒石酸铜『卩液及2 5 ml乙液•于烧杯上盖一表面皿，加热,控制在4min内沸腾，再准确慝沸2m i n,乘热用铺好石棉得古氏坦塀或G 4垂融坦甥抽滤，并用6 0C热水洗涤烧杯及沉淀，至洗液不成碱性为止。

(注:还原椭与碱性酒石酸铜试剂得反应一定要在沸腾状态下进行,沸腾时间需严格控制。

点沸得溶液应保持蓝色•如果蓝色消失,说明还原糖含虽过岛,应将样品溶液稀禅后重做〜)将占氏堆圳或垂融圳圳放回原4 0(加1烧杯中,加2 5 ml硫酸铁溶液及25ml水•用玻棒搅拌使氧化亚铜完全溶解•以0、1 mo 1/L岛鎰酸钾标准液滴定至微红色为终点。

鼻同时吸収5 0ml水•加与测样品时相同址得碱性酒石酸镉甲、乙液•硫酸铁溶液及水•按同一方法做试剂空白实验、4 i|•算：Xl=(V-V0)xNx7 1 .54(1)鼻式中：XI••样品中还原糖质址相、”］于氧化亚铜得质虽.mg:小一测定用样品
液消耗高猛酸钾标准液得体积,ml：
v 0—试剂空白消耗高症酸钾标准液得休积.ml;鼻N—商铉酸钾标准溶液得浓度；鼻7 1、54—lml lmol/ L岛猛酸钾溶液相、"i于氧化亚铜得质量・m g。

根据(1)式中讣算所得氧化亚铜质邑查附表"氧化亚铜质虽相半于葡萄糖、果糖.乳糖、转化糖得质址表再计算样品中还原糖含量。

X2=(m 1 xV2Km2xVl)x(10 0/l 0 0 0)⑵鼻式中:X2—样品中还原糖得含ft,g/100g(g/100 ml);
ml••査表得还原糖质址.mg: -m2 —样品质虽(或体枳)，g(m 1 ):
VI——测定用样品处理液得体积1 ; -V2—样品处理后得总休积,ml。

7 •举例1称取某食物样品3。

OOg,经过处理后用水定容至250ml。

取50ml进行测定，消耗0。

1003
mol / L高忧酸钾标准液5、20mL同时测试剂空白为0、3 6mL则样品中还原糖质虽相半于氧化亚铜得质
St为:
Xl(mg) =(5・20—0、3 6)x0、1003x71.54 = S4. 73
查表得还原糖质址为相、"I于葡萄椭16、22 mg.亠样品中还原糖含虽(以葡萄糖讣)为：
X2(g/100g)=(l 6 x 2 2x250X3. 0 0x5 0 )x(10 0/10 0 0 )= 2. 70 4 注鄴:
木法用碱性酒石酸铜溶液作为氧化剂。

由于硫酸铜与氢氧化钠反应可生成氢氧化铜沉淀•氢氧化铜沉淀可被酒石酸钾钠缓慢还庶析出少虽氧化亚铜沉淀•使氧化亚铜汁虽发生误差，所以甲、乙试剂要分别配制及贮瓶用时等虽混合。

还原糖得测定方法(2)
二、直接滴定法41。

原理鼻样品经除去蛋白质后,在加热条件下，直接滴定已标定过得费林氏液•费林氏液被还原析出氧化亚铜后，过虽得还原糖立即将次甲基蓝还原,使蓝色褪色。

根据样品消耗体积，汁算还原糖址.
池、适用范鬧A GB 5 0 09. 7・85•木方法适用干所有食品中还原糖得检测。

检出限0.1 mg o
3、主婆仪器鼻滴定管人
4、试剂
除特殊说明外，实验用水为蒸镉水•试剂为分析纯。

-(1)费林甲液:称取15 g硫酸铜(CuS04・5H20)•及0.
05 g次甲基蓝•溶于水中并稀释至1 L o
⑵ 费林乙液:称取50 g酒石酸钾钠与75 g氢氣化钠•溶于水中•再加入4 g亚铁氛化钾•完全溶解后，用水稀释至500 ml,
贮存于橡胶塞玻璃瓶内。

⑶ 乙酸锌溶液:称取21、9 g乙酸锌，加3 ml冰乙酸，加水溶解并稀释至100 mb列4)亚恢鼠化钾溶液。

称取1 0 6g亚
恢鼠化钾•用水溶解并稀释至1 00m 1 °鼻(5)盐酸。

(6)葡萄糖标准溶液:精密称取K000 g经过80 °C干燥至恒虽得超萄糖(纯度在9 9 %以上)•加水溶解后加入5 ml盐酸•并以
水稀释至1 Lo此溶液相、于1 m g/m 1葡萄糖、(注:加盐酸得目得就是防腐•标准溶液也可用饱与苯甲酸溶液配制) 5。

操作方法4。

1样品处理：-5. L I乳类.乳制品及含蛋白质得食品:称取约0・5〜2 g固体样品(吸取2〜1 0 ml液休样品)•
迓于100 m 1容虽瓶中•加50 ml水,摇匀。

边摇边慢慢加入5 ml乙酸锌溶液及5 ml亚诜氢化钾溶液加水至刻度•混匀。

静宜30 min•用干燥滤纸过滤S：去初滤液•滤液备用.(注慰:乙酸锌可去除贺白质、糅质、树脂等•使它们形成沉淀•经过
滤除去.如果钙离子过多时•易与衙萄糖、果糖生成络合物，使滴定速度缓慢;从而结果偏低，可向样品中加入草酸粉，与
钙结合•形成沉淀并过滤。

)
5.1o 2酒精性饮料:吸取50 ml样品,豊于蒸发皿中，用1 mol / L氢氧化钠溶液中与至中性,在水浴上蒸发至原体积1/4后，
移入100 ml容fit瓶中.加25 ml水,混匀。

以下按4、1。

1自”加5 ml乙酸锌溶液” 起依法操作。

5。

1。

3含多量淀粉得食品:称取2〜5 g样品，置于100 ml容量瓶中，加50 ml水，在45C水浴中加热1
h.并时时振摇(注意:此步骤就是使还原糖溶干水中•切忌温度过商」大I为淀粉在岛温条件下可糊化.水轍影响检测结果。

）、冷后加水至刻度•混匀•静宜。

吸取50 ml上淸液干另一100 ml容虽瓶中•以下按4。

1」自” 5 ml乙酸锌溶液”起依法操作。

5、1.4汽水等含有二氧化碳得饮料:吸取50 ml样品置于蒸发皿中，在水浴上除去二氧化碳后•移入100 ml容址瓶中，并
用水洗涤蒸发皿，洗液并入容fit瓶中,再加水至刻度，混匀后,备用。

（注总:样品中稀释得还原糖最终浓度应接近于葡萄糖标准液得浓度。

）
5。

2标定费林氏液溶液:吸取5s 0 ml费林氏甲液及5、0 ml乙液過于1 5 0 ml锥形瓶中（注意:甲液与乙液混合可生成氧化亚铜沉淀•应将甲液加入乙液•使开始生成得氧化亚铜沉淀重溶），加水1 0 ml.加入玻璃珠2粒•从滴定管滴加约9 ml 衙萄籀标准溶液•控制在2 min内加热至沸•趁沸以每两秒1滴得速度继续滴加超萄糖标准溶液•直至溶液兰色刚好褪去并出现淡黄色为终点•记录消耗得葡萄榊标准溶液总体积•平行操作三份•取其平均值•汁算每10 ml（甲、乙液各5 ml）贼性酒石酸铜溶液相半于葡萄糖得质址（mg）.（注总:还原得次甲基蓝易被空气中得氧氧化•恢复成原來得蓝色•所以滴定过程中必须保持溶液成沸腾状态•并且避免滴定时间过长。

）
5 c 3样品溶液预测:吸取5、0 ml费林氏甲液及5» 0 ml乙液•置于1 5 0 ml锥形瓶中•加水10 ml•加入玻璃珠2粒•控制在2 mi n内加热至沸•趁沸以先快后慢得速度•从滴定管中滴加样品溶液•并保持溶液沸腾状态，待溶液颜色变浅时•以每秒1滴得速度滴定，直至溶液兰色褪去，出现亮黄色为终点。

如果样品液颜色较深•滴定终点则为兰色褪去岀现明亮颜色（如亮红），记录消耗样液得总体枳、（注总::如果滴定液得颜色变浅后复又变深,说明滴定过虽•需重新滴定。

）
5.4样品溶液测定:吸取5o 0 ml碱性酒石酸铜甲液及5.0 ml乙液，宜于150 ml锥形瓶中，加水10 m 1 ,加入玻璃珠2粒，在2 min内加热至沸•快速从滴定管中滴加比预测休枳少1 ml得样品溶液傑后趁沸继续以每两秒1滴得速度滴定直至终点。

记录消耗样液得总体枳，同法平行操作两至三份,得出平均消耗体枳。

人6 . 计算A X3=（C X v 1 x VXmx v2 xl000）xl00 式中：X_—样品中还原糖得含址（以葡萄糖计）,％； > C—一超萄椭标准溶液得浓度-mg/ml;
vl一一滴定10 ml费林氏溶液（甲、乙液幹5 ml）消耗葡萄糖标准溶液得休积.ml;小2—一测定时平均消耗样品溶液得体积・ml: 2••样品定容体积Q1:及m•—样品质址.g：A7O注意爭项
（1 ）木方法测定得就是一类具有还原性质得糖，包括衙萄糖、果糖.乳韓、麦芽糖等,只就是结果用葡萄糖或其她转化糖得方式表示•所以不能误解为还原糖=葡萄糖或其她糖。

但如果已知样品中只含有某一种糖•如乳制品中得乳糖侧可以认为还原糖=某糖°鼻⑵分别用葡萄糖、果臥乳糊、麦芽糖标准品配制标准溶液分别滴定等虽已标定得费林氏液，所消耗标准溶液得体积有所不同。

证明即便同就是还廉版在物化性质上仍有所差别，所以还原糖得结果只就是反映样品整体情况•并不完全等于各还原糖含址之与。

如果已知样品只含有某种还原糖•则应以该还原糖做标准品•结果为该还原糖得含址。

如果样品中还原糖得成分未知•或为蚩种还原糖得混合物•则以某种还原糖做标准品•结果以该还原糖汁，但不代表该糖得真实含虽。