聚维酮碘溶液微生物限度检查方法适用性考察
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胰酪大豆胨琼脂培养基（批号 1802072)，沙氏葡萄糖琼脂培养基（批号 180111）pH7.0 氯化钠 - 蛋白胨缓冲液（批号 170610），胰酪大豆胨液体培养基（批号 180129)，溴化十六烷 基三甲铵琼脂培养基（批号 180116），甘露醇氯化钠琼脂培养基（批号 171222）以上试剂及 培养基购于北京三药科技开发公司。
试验结果见表5表6表5铜绿假单胞菌检查方法适用性试验结果观察方法适用性试验供试品组试验组阴性对照3组不同体积的培养基tsb比较3组不同体积的培养基tsb比较培养基名称样品批号tsb100mltsb200mltsb300mltsb100mltsb200mltsb300mltsb100ml胰酪大豆胨液体tsb180402180403180704溴化十六烷基三甲铵琼脂180402180403180704结果未检出未检出未检出未检出检出检出未检出下转第195页医药界2019年12月第23期195综述上接第194页表6金黄色葡萄球菌检查方法适用性试验结果观察方法适用性试验供试品组试验组阴性对照3组不同体积的培养基tsb比较3组不同体积的培养基tsb比较培养基名称样品批号tsb100mltsb200mltsb300mltsb100mltsb200mltsb300mltsb100ml胰酪大豆胨液体tsb180402180403180704甘露醇氯化钠琼脂180402180403180704结果未检出未检出未检出检出检出检出未检出75结论
1、试验设备及样品：
设备：GR85DA 型立式自动压力蒸汽灭菌器（致微厦门仪器有限公司 )，DHG— 9245A 型电热鼓风干燥箱（上海一恒科学仪器有限公司），BHC － 1300IIA2 型生物安全柜（苏州 安泰空气技术有限公司），GHP － 9126 型电热恒温培养箱（惠科电子有限公司），SPX － 150 型生化培养箱（惠科电子有限公司）。样品：聚维酮碘溶液，批号：180402、180403、 180704 规格：5%，生产厂家：遵义华卫制药有限公司。
4、菌液的制备
1. 取金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌经 33℃ ,18 小时培养的胰酪大豆 胨液体培养物 , 及白色念珠菌经 23℃ ,48 小时培养的的胰酪大豆胨液体培养物，用 0.9% 无菌氯化钠溶液稀释制成小于 10000cfu/ml 的菌悬液，备用。
2. 取黑曲霉的沙氏葡萄糖琼脂新鲜斜面培养物 , 用 5ml 含 0.05% 聚山梨酯 -80 的 pH7.0 氯化钠 - 蛋白胨缓冲液将孢子洗下 , 用含 0.05% 聚山梨酯 -80 的 pH7.0 氯化钠 蛋白胨缓冲液稀释制成小于 10000cfu/ml 的菌悬液，备用。
表 1 ：平皿法需氧菌试验结果回收率计算
菌种（代）
样品 批号
供试液 稀释级
铜绿假单 胞菌（3）
180402
金黄色葡 萄球菌（3）
180402
枯草芽孢 杆菌（3）
180402
白色念珠 菌（3）
180402
黑曲霉菌 （3）
180402
供试品对 照组
180402
1 ：10 1 ：20 1 ：10 1 ：20 1 ：10 1 ：20 1 ：10 1 ：20 1 ：10 1 ：20 1 ：10 1 ：20
2、试验用菌种 金黄色葡萄球菌 [CMCC（B）26003] 第 3 代， 铜绿假单胞菌 [CMCC（B）10104] 第 3 代， 枯草芽孢杆菌 [CMCC（B）63501] 第 3 代，④白色念珠菌 [CMCC（F）98001] 第 3 代，⑤黑曲霉 [CMCC（F）98003] 第 3 代，以上菌种均购于中国食品药品检定研究院。 3、试验用培养基
综述
医药界 2019 年 12 月第 23 期
聚维酮碘溶液微生物限度检查方法适用性考察
罗远纯 张 磊
（遵义市食品药品检验所 贵州 遵义 563000）
【摘要】目的：建立 5% 聚维酮碘溶液的微生物限度检查方法。方法用 5% 聚维酮碘溶液 3 批，按《中国药典》2015 年版四部通则 1105（1106、1107）[1]【2】所载微生物限度检查方 法适用性试验项下的方法进行试验。结果稀释剂采用 PH7.0 氯化钠 - 蛋白胨缓冲液，需氧菌计数、霉菌和酵母菌计数均采用薄膜过滤法，用 PH7.0 氯化钠 - 蛋白胨缓冲液冲洗 3 次，每 次 100ml/ 膜，各试验菌回收率均可达 50% 以上，控制菌采用增加培养基体积的方法（TSB 培养基 200ml) 试验组可检出目标菌。结论本品需氧菌计数、霉菌和酵母菌计数均采用薄膜过 滤法，控制菌检验采用加大培养基体积的方法。
菌落计数（CFU）
试验组（1ml/ 皿）
菌液组（1ml/ 皿）
各菌种回 收率（%）
（1） （2） 平均 （1） （2） 平均
19 28
23 33
Байду номын сангаас
21 30.5
91
96 93.5
22.5 32.6
11 19
15 24
13 21.5
58
66 62
21.0 34.7
0 11
0 17
【关键词】5% 聚维酮碘溶液方法适用性试验薄膜过滤法回收率
【中图分类号】R92 【文献标识码】A 【文章编号】2095-4808（2019）23-194-01
聚维酮碘溶液目前已被广泛运用于临床消毒，为中国药典收载品种，与传统碘酊消毒 相比，具有高效、广谱、无毒、黄染小、易清洗等优点。为更好的控制产品质量，本文按照中 国药典 2015 年版四部通则微生物限度检查方法适用性试验项下的要求，对该品种的微生 物限度检查方法作了实验性研究，染菌计数分别采用了平皿法和薄膜过滤法，控制菌检查 分别采用了常规法和培养基稀释法，现报道如下。
5、供试液的制备
取本品 10ml，加入 90mlpH7.0 无菌氯化钠 - 蛋白胨缓冲液中，混匀，作为 1：10 的供 试液，取 1：10 的供试液 10ml 至 10mlpH7.0 无菌氯化钠 - 蛋白胨缓冲液中，制成 1：20 的 供试液。
6、需氧菌 , 霉菌和酵母菌数计数方法适用性试验
6.1 平皿法 : 6.1.1 试验组：取 1：10 供试液和 1：20 供试液各 5 份，每份 9.9ml，分别加入 5 株小于 10000cfu/ml 的备用菌悬液 0.1ml，使供试液每毫升含菌量不大于 100cfu，混匀后分别取加 入试验菌液后的供试液 1ml 注皿，倾注胰酪大豆胨琼脂培养基，5 株菌每个浓度每株分别 平行制备 2 个平皿，按规定温度和时间培养；白色念珠菌和黑曲霉每株每个浓度另平行制 备 2 个平皿，倾注沙氏葡萄糖琼脂培养基，按规定温度和时间培养，分别点计各平板上的 菌落数。 6.1.2 菌液组 : 用 pH7.0 无菌氯化钠 - 蛋白胨缓冲液代替供试液，作备用菌液稀释，注 皿，方法同试验组。 6.1.3 供试品对照组：取 1：10 供试液和 1：20 供试液，按《中国药典》2015 年版四部通 则 1105 的方法，取各浓度供试液 1ml 注皿，每个浓度分别平行制备 4 个平皿，分别倾注相 应培养基，测定供试品中的需氧菌总数、霉菌和酵母菌总数。 6.1.4 试验组菌落回收率（%）=（试验组平均菌落数－供试品对照组平均菌落数∕菌 液组平均菌落数）×100%，平皿法试验结果见表 1、表 2。
试验结果见表5表6表5铜绿假单胞菌检查方法适用性试验结果观察方法适用性试验供试品组试验组阴性对照3组不同体积的培养基tsb比较3组不同体积的培养基tsb比较培养基名称样品批号tsb100mltsb200mltsb300mltsb100mltsb200mltsb300mltsb100ml胰酪大豆胨液体tsb180402180403180704溴化十六烷基三甲铵琼脂180402180403180704结果未检出未检出未检出未检出检出检出未检出下转第195页医药界2019年12月第23期195综述上接第194页表6金黄色葡萄球菌检查方法适用性试验结果观察方法适用性试验供试品组试验组阴性对照3组不同体积的培养基tsb比较3组不同体积的培养基tsb比较培养基名称样品批号tsb100mltsb200mltsb300mltsb100mltsb200mltsb300mltsb100ml胰酪大豆胨液体tsb180402180403180704甘露醇氯化钠琼脂180402180403180704结果未检出未检出未检出检出检出检出未检出75结论
1、试验设备及样品：
设备：GR85DA 型立式自动压力蒸汽灭菌器（致微厦门仪器有限公司 )，DHG— 9245A 型电热鼓风干燥箱（上海一恒科学仪器有限公司），BHC － 1300IIA2 型生物安全柜（苏州 安泰空气技术有限公司），GHP － 9126 型电热恒温培养箱（惠科电子有限公司），SPX － 150 型生化培养箱（惠科电子有限公司）。样品：聚维酮碘溶液，批号：180402、180403、 180704 规格：5%，生产厂家：遵义华卫制药有限公司。
4、菌液的制备
1. 取金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌经 33℃ ,18 小时培养的胰酪大豆 胨液体培养物 , 及白色念珠菌经 23℃ ,48 小时培养的的胰酪大豆胨液体培养物，用 0.9% 无菌氯化钠溶液稀释制成小于 10000cfu/ml 的菌悬液，备用。
2. 取黑曲霉的沙氏葡萄糖琼脂新鲜斜面培养物 , 用 5ml 含 0.05% 聚山梨酯 -80 的 pH7.0 氯化钠 - 蛋白胨缓冲液将孢子洗下 , 用含 0.05% 聚山梨酯 -80 的 pH7.0 氯化钠 蛋白胨缓冲液稀释制成小于 10000cfu/ml 的菌悬液，备用。
表 1 ：平皿法需氧菌试验结果回收率计算
菌种（代）
样品 批号
供试液 稀释级
铜绿假单 胞菌（3）
180402
金黄色葡 萄球菌（3）
180402
枯草芽孢 杆菌（3）
180402
白色念珠 菌（3）
180402
黑曲霉菌 （3）
180402
供试品对 照组
180402
1 ：10 1 ：20 1 ：10 1 ：20 1 ：10 1 ：20 1 ：10 1 ：20 1 ：10 1 ：20 1 ：10 1 ：20
2、试验用菌种 金黄色葡萄球菌 [CMCC（B）26003] 第 3 代， 铜绿假单胞菌 [CMCC（B）10104] 第 3 代， 枯草芽孢杆菌 [CMCC（B）63501] 第 3 代，④白色念珠菌 [CMCC（F）98001] 第 3 代，⑤黑曲霉 [CMCC（F）98003] 第 3 代，以上菌种均购于中国食品药品检定研究院。 3、试验用培养基
综述
医药界 2019 年 12 月第 23 期
聚维酮碘溶液微生物限度检查方法适用性考察
罗远纯 张 磊
（遵义市食品药品检验所 贵州 遵义 563000）
【摘要】目的：建立 5% 聚维酮碘溶液的微生物限度检查方法。方法用 5% 聚维酮碘溶液 3 批，按《中国药典》2015 年版四部通则 1105（1106、1107）[1]【2】所载微生物限度检查方 法适用性试验项下的方法进行试验。结果稀释剂采用 PH7.0 氯化钠 - 蛋白胨缓冲液，需氧菌计数、霉菌和酵母菌计数均采用薄膜过滤法，用 PH7.0 氯化钠 - 蛋白胨缓冲液冲洗 3 次，每 次 100ml/ 膜，各试验菌回收率均可达 50% 以上，控制菌采用增加培养基体积的方法（TSB 培养基 200ml) 试验组可检出目标菌。结论本品需氧菌计数、霉菌和酵母菌计数均采用薄膜过 滤法，控制菌检验采用加大培养基体积的方法。
菌落计数（CFU）
试验组（1ml/ 皿）
菌液组（1ml/ 皿）
各菌种回 收率（%）
（1） （2） 平均 （1） （2） 平均
19 28
23 33
Байду номын сангаас
21 30.5
91
96 93.5
22.5 32.6
11 19
15 24
13 21.5
58
66 62
21.0 34.7
0 11
0 17
【关键词】5% 聚维酮碘溶液方法适用性试验薄膜过滤法回收率
【中图分类号】R92 【文献标识码】A 【文章编号】2095-4808（2019）23-194-01
聚维酮碘溶液目前已被广泛运用于临床消毒，为中国药典收载品种，与传统碘酊消毒 相比，具有高效、广谱、无毒、黄染小、易清洗等优点。为更好的控制产品质量，本文按照中 国药典 2015 年版四部通则微生物限度检查方法适用性试验项下的要求，对该品种的微生 物限度检查方法作了实验性研究，染菌计数分别采用了平皿法和薄膜过滤法，控制菌检查 分别采用了常规法和培养基稀释法，现报道如下。
5、供试液的制备
取本品 10ml，加入 90mlpH7.0 无菌氯化钠 - 蛋白胨缓冲液中，混匀，作为 1：10 的供 试液，取 1：10 的供试液 10ml 至 10mlpH7.0 无菌氯化钠 - 蛋白胨缓冲液中，制成 1：20 的 供试液。
6、需氧菌 , 霉菌和酵母菌数计数方法适用性试验
6.1 平皿法 : 6.1.1 试验组：取 1：10 供试液和 1：20 供试液各 5 份，每份 9.9ml，分别加入 5 株小于 10000cfu/ml 的备用菌悬液 0.1ml，使供试液每毫升含菌量不大于 100cfu，混匀后分别取加 入试验菌液后的供试液 1ml 注皿，倾注胰酪大豆胨琼脂培养基，5 株菌每个浓度每株分别 平行制备 2 个平皿，按规定温度和时间培养；白色念珠菌和黑曲霉每株每个浓度另平行制 备 2 个平皿，倾注沙氏葡萄糖琼脂培养基，按规定温度和时间培养，分别点计各平板上的 菌落数。 6.1.2 菌液组 : 用 pH7.0 无菌氯化钠 - 蛋白胨缓冲液代替供试液，作备用菌液稀释，注 皿，方法同试验组。 6.1.3 供试品对照组：取 1：10 供试液和 1：20 供试液，按《中国药典》2015 年版四部通 则 1105 的方法，取各浓度供试液 1ml 注皿，每个浓度分别平行制备 4 个平皿，分别倾注相 应培养基，测定供试品中的需氧菌总数、霉菌和酵母菌总数。 6.1.4 试验组菌落回收率（%）=（试验组平均菌落数－供试品对照组平均菌落数∕菌 液组平均菌落数）×100%，平皿法试验结果见表 1、表 2。