参芪复方对GK大鼠肾PPARγ表达的影响

参芪复方对GK大鼠肾PPARγ表达的影响
孙凤平;钞建峰;郑君;谢春光
【摘要】目的:观察参芪复方对GK大鼠过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)表达的影响及其可能的作用机制.方法:将随机血糖≥11.1 mmol/L的GK大鼠40只随机分为雷米普利组、参芪复方高剂量组、参芪复方低剂量组、模型组4组,设正常SD大鼠10只作为空白组.灌胃8周后,测定各组大鼠血糖,血脂(TG、TC)、肾脏PPARγ,平均积分光密度值的变化.结果:参芪复方高剂量组用药后GK大鼠血糖,血脂水平降低,PPARγ表达增强,和模型组比较有统计学意义(P<0.05).结论:参芪复方高剂量能够增强PPARγ活性,可能是其改善糖,脂代谢紊乱,预防糖尿病肾病(DN)的作用机制之一.%Objective:To observe the effects of Shenqi compound recipe on the express peroxisome proliferators activated receptors gamma(PPARy) in GK rats and its possible mechanisms.Method:The 40 GK rats,random glucose ≥ 1 l.lmmol/L,were randomly divided into ramipril group,the ShenQi compound recipe high dose group,the Shenqi compound recipe low dose group,and model group. 10 normal SD rats were set as the control group.After administered for 8 weeks,we determined the FBG, lipid(TXKTC) and the expression of PPAR-y from right kidney.Resul:The expression of the PPAR-y in the ShenQi compound recipe high dose group GK rats increased,and there are statistically significance compared with the model group (P<0.05).Conclusions:The ShenQi compound recipe high dose group can increase the expression of the PPAR-y activities,which may be its one of the mechanisms in preventing DN.
【期刊名称】《西部中医药》
【年(卷),期】2011(024)011
【总页数】3页(P12-14)
【关键词】参芪复方;GK大鼠;过氧化物酶体增殖物激活受体γ
【作者】孙凤平;钞建峰;郑君;谢春光
【作者单位】甘肃省中医院,甘肃,兰州,730050;甘肃省中医院,甘肃,兰州,730050;甘肃省中医院,甘肃,兰州,730050;成都中医药大学
【正文语种】中文
【中图分类】R969
Abstract Objective:To observe the effects of Shenqi compound recipe on the express peroxisome proliferatorsactivated receptors gamma(PPARγ) in GK rats and its possible mechanisms.Method:The 40 GK rats,random glucose≥11.1mmol/L,were randomly div ided into ramipril group,the ShenQi compound recipe high dose group,the Shenqi compoundrecipe low dose group,and model group.10 normal SD rats were set as the control group.After administered for 8weeks,we determined the FBG，lipid(TG、TC) and the expression of PPARγ from right kidney.Result:The expression ofthe PPARγ in the ShenQi compound recipe high dose group GK rats increased,and there are statistically significancecompared with the model group (P＜0.05).Conclusions:The ShenQi compound recipe high dose gr oup can increase theexpression of the PPARγ activities,which may
be its one of the mechanisms in preventing DN.
Keywords ShenQi compound recipe;GK rats;PPARγ
糖尿病是以胰岛素绝对或相对不足引起的血糖水平升高为主要特点的代谢综合征，常伴有脂肪代谢紊乱而出现高脂血症。

相关临床及实验研究表明［1-3］，参芪复方具有降血糖、血脂、改善胰岛素抵抗的作用。

本实验通过观察具有益气养阴生津、活血化瘀功效的参芪复方对T2D M G K大鼠血糖、血脂水平和PPARγ表达的影响，探讨其改善糖、脂代谢紊乱、预防D N的可能作用机制。

1.1 实验动物16周龄雄性无特定病原体(SPF级)的自发性糖尿病G K大鼠40只［上海斯莱克实验动物有限责任公司提供，许可证号：SCXK(沪)2007—2005］，16周龄SPF级雄性SD大鼠10只［四川省中医药研究院提供，许可证号：SCXK(川)2008-19］。

1.2 实验药品与试剂参芪复方由人参15 g、黄芪15 g，山药10 g，山茱萸10 g，丹参10 g，酒大黄6 g等组成，经成都中医药大学药学院加工成膏剂，每1 g含
原生药材10 g；雷米普利片(北京安万泰制药有限公司生产，批号：H20060766)；胆固醇、猪胆盐(成都科龙化工试剂厂生产)；免疫组化试剂盒(北京中杉金桥试剂
有限责任公司生产，批号：740415A)。

1.3 主要仪器全自动生化分析仪(日本自立公司)、切片机(德国徕卡-1015)、T S J-Q型全自动封闭式组织脱水机、BM J-Ⅲ型包埋机(常州市中威医疗仪器有限公司)、P A S8000病理摄像系统(日本尼康公司)。

2.1 分组及给药方法40只G K大鼠适应性喂养1周后，取随机血糖，将血糖
≥11.1mm o l/L者随机分为雷米普利组、参芪复方高剂量组、参芪复方低剂量组、模型组各10只。

雷米普利组按1m g/(kg·d)灌服雷米普利混悬液；参芪复方高剂量组按2.88g/(kg·d) (相当于成人剂量的20倍，即人等效剂量的4倍，成人按60 k g计)灌服参芪复方混悬液；参芪复方低剂量组按0.72g/(kg·d)(相当于成人剂量
的5倍，即人的等效剂量，成人按60 k g计)灌服参芪复方混悬液；模型组按
10m L/(kg·d)灌服无菌水；设16周龄SPF级雄性SD大鼠10只为空白组，按
10m L/(kg·d)灌服无菌水。

除空白组喂饲普通饲料，其余各组喂饲高脂饲料(普通
饲料88.2%、精炼猪油10%、胆固醇1.5%、猪胆盐0.3%)，连续喂养8周。

2.2 取材8周后处死动物，处死前12小时禁食不禁水，测各组大鼠尾静脉F B G 后，按2m L/k g(体质量)腹腔注射8%异戊巴比妥钠麻醉动物，腹主动脉取血，分离血清，-20℃保存；取部分肾皮质以10%福尔马林固定后，石蜡包埋切片。

2.3 检测指标尾静脉F B G采用葡萄糖氧化酶法；T G、T G采用酶偶联比色法；PPARγ平均积分光密度值采用免疫组织化学染色(S A B C)法。

2.4 统计学方法采用SPSS 1
3.0统计学软件，数据以均数±标准差(s)表示，组间
比较采用方差分析(A N O V A)，如果方差齐采用L s D，方差不齐采用Tamhanes′T2统计方法。

以P＜0.05为统计学有显著性意义。

3.1 各组大鼠F B G水平比较从表1可见，模型组、雷米普利组、参芪复方高剂
量组、参芪复方低剂量组F B G水平显著高于空白组(P＜0.01)。

参芪复方高剂量组、参芪复方低剂量组和模型组比较有统计学意义(P＜0.05)；参芪复方高剂量组
和雷米普利组比较有统计学意义(P＜0.05)；模型组和雷米普利组比较无统计学意
义(P＞0.05)。

参芪复方高剂量组和参芪复方低剂量组比较有统计学意义(P＜0.05)。

3.2 各组大鼠血脂水平比较从表2可见，模型组、雷米普利组、参芪复方低剂量
组T G水平显著高于空白组(P＜0.01)；参芪复方高剂量组T G水平和空白组比较
无统计学意义(P＞0.05)；参芪复方高剂量组、参芪复方低剂量组、雷米普利组T
G水平和模型组比较有显著性差异(P＜0.01)；参芪复方高剂量组、参芪复方低剂
量组T G水平和雷米普利组比较有显著性差异(P＜0.01)；参芪复方高剂量组T G
水平低于参芪复方低剂量组(P＜0.05)；模型组、雷米普利组、参芪复方高剂量组、参芪复方低剂量组TC水平显著高于空白组(P＜0.05)；参芪复方高剂量组、参芪
复方低剂量组TC水平比较无统计学意义(P＞0.05)，二者和模型组比较具有显著
性差异(P＜0.05)；雷米普利组和参芪复方高剂量组、参芪复方低剂量组、模型组
比较均无统计学意义(P＞0.05)。

3.3 各组大鼠肾PP A Rγ平均积分光密度值比较从表3可见，模型组、雷米普利组、参芪复方低剂量组PPARγ表达显著低于空白组、参芪复方高剂量组(P＜0.05)；参芪复方高剂量组PPARγ表达和空白组比较无统计学意义(P＞0.05)；雷米普利组、参芪复方低剂量组PPARγ表达和模型组比较无统计学意义(P＞0.05)。

过氧化物酶体增殖物激活受体(peroxisome proliferator-activated receptor，PPAR)是1990年Issemann等［4-5］首先发现的调节目标基因表达的核内受体
转录因子超家族成员，根据结构的不同，PPAR可分为α、β(或δ)和γ3种类型，其中PPARγ是一种配体活化的具有多种生物学效应的核转录因子，通过调控相关基因的表达发挥调节糖、脂代谢紊乱，增强受体对胰岛素的敏感性，影响细胞的增殖、凋亡，调控细胞因子的生成等作用［6］，胰岛素增敏剂噻唑烷二酮类药物(troglitazone，TZDs)能够增强PPARγ活性［7］。

迟铖等［8］研究发现，肥胖、胰岛素抵抗时PPARγ及其调控的葡萄糖转运蛋白4(GLUT-4)表达明显下降，同时伴有TNF-α等炎症介质水平升高，提示糖、脂代谢紊乱和炎症介质和抑制PPARγ表达有关。

吡格列酮能够刺激PPARγ表达，抑制C D K5基因引起的PPARγ磷
酸化，发挥降糖作用［9］。

高血糖环境下CAM-1、TGF-β、NF-κβ等表达增多，吡格列酮能够抑制以上细胞因子表达，降低尿蛋白排泄，抑制肾小球肥大［10］，这可能与其激活PPARγ表达有关。

Nencioni等［11］研究表明，PPARγ通过与N F-κβ蛋白间相互作用，阻止N F-κβ与炎症因子基因启动子区的同源顺式组件
结合；活化的PPARγ抑制单核细胞炎症因子TNF-α、IL-2［12-13］的生成，产
生抗炎作用，减轻肾小管内皮细胞损伤。

PPARγ生理性配体15d-P GJ2在许多免疫应答中起调节作用,PPARγ存在的情况下，极低浓度的15d-P GJ2就可以抑制
脂多糖诱导的经由A P-1(Active protein1)、N F-κβ等介导的转录效应。

K i m u ra等［14］研究发现，15d-P GJ2可通过影响PTK和丝裂原活化蛋白激酶(mitogenactivated protein kinase，MAPK)活化，下调人近端肾小管上皮细胞P A I-1表达，且不依赖于PPARγ表达的变化。

PP ARγ及其激动剂可抑制系膜细胞增殖，减少细胞外基质和细胞因子分泌。

有研究发现，吡格列酮通过下调p27、B c l-2表达和抑制M A P K磷酸化抑制系膜细胞增殖并减少蛋白尿的产生［15］。

亦有研究表明，D N早期肾脏巨噬细胞炎性蛋白3α(M IP-3α)和巨噬细胞标记物
M E-1表达增加，并影响着肾脏细胞形态学改变，而PPARγ激动剂能够下调M
IP-3α、M E-1表达，从而延缓肾脏病理改变［16］。

参芪复方由人参、黄芪、山药、山茱萸、生地黄、天花粉、丹参、酒大黄等组成，具有益气养阴生津，活血化瘀的功效。

长期临床观察发现，该方对D M、D N属于气阴亏虚型患者具有较为理想的疗效。

本实验研究中，采用S A B C法观察参芪复方对G K大鼠血肾PPARγ表达变化产生的影响，证实了高剂量参芪复方能显著增强G K大鼠肾PPARγ活性，其可能是其改善糖、脂代谢紊乱，防治D N的作
用机制之一。

△通讯作者：谢春光(1967—)，博士研究生导师，教授，主任医师。

研究方向：中医药防治内分泌及代谢性疾病的临床与实验研究。

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