药理学实验

药理学实验
精确操纵动物缉捕固定的方法，能够防止动物过度挣扎或受毁伤而阻碍实验不雅察后果，并可幸免实验者被咬伤，从而包管实验顺利进行。

下面介绍药理学实验课中常用的几种动物的缉捕固定方法。

1、小鼠小鼠性格温柔，一样可不能主动咬人，但抓取时动作也要轻缓。

抓取时先将小鼠放在粗拙物（如鼠笼）上面，用右手提起鼠尾，将小鼠轻轻向后拉，如许可使小鼠前肢抓住粗拙面不动，用左手拇指和食指捏住鼠头皮肤和双耳，其余三指和掌心夹住其背部皮肤及尾部，如许小鼠便可被完全固定在左手中（图1），现在右手可作打针或其它实验操作，也可将小鼠固定在特制的固定器中。

图1 小鼠的缉捕方法图2 大年夜鼠的缉捕方法
2、大年夜鼠缉捕固定的方法全然上与小鼠雷同。

因为大年夜鼠比小鼠牙尖性猛，不易用突击的方法抓取，缉捕时较难一些，为防大年夜鼠在惊骇或激愤时咬伤手指，实验者应带上棉手套或帆布手套，先用右手将鼠尾提起，放在粗拙物上，向后轻拉鼠尾，使其不动，再用左手拇、食指捏住头颈部皮肤，其余三指和手掌固定鼠体，使其头、颈、腹呈一向线（图2），这时右手可作打针，若需进行手术，则应对大年夜鼠进行麻醉后固定于手术台上。

如需尾静脉取血或打针，可将大年夜鼠放入固定盒内或用小黑布袋装大年夜鼠，使其只露尾巴。

3、豚鼠豚鼠怯弱易惊，性格平和，不咬人，抓取幼小豚鼠时，只需用双手捧起来，对体型较大年夜或怀孕的豚鼠，先用手掌灵敏扣住鼠背，抓住其肩胛上方，以拇指和食指环握颈部，另一只手托住其臀部（图3）。

图3 豚鼠的缉捕方法
4、家兔家兔比较驯服，一样可不能咬人，但脚爪较尖，应幸免抓伤。

抓取时轻轻将兔提起，另一手托其臀部，使其躯干的重量大年夜部分集中在该手上，然后按实验须要将兔固定成各类姿势（图4）。

留意抓兔时不要单提两耳，因为兔耳不克不及遭受全身重量，易造成苦楚悲伤而引起挣扎，是以单提兔耳，缉捕四肢，提抓腰部和背部差不多上不精确的抓法。

图4 家兔的缉捕与固定
图5 蟾蜍的缉捕与固定
5、青蛙和蟾蜍用左手握住动物，以食指和中指夹住一侧前肢，大年夜拇指压住另一前肢，用右手协助，将两后肢拉直，左手无名指和小指将其压住固定（图5）。

留意在抓取蟾蜍时，切勿挤压其两侧耳部崛起的毒腺，以免毒液喷出射入眼中。

二、实验动物的编号
在动物实验时，经常须要编号分组，将动物做上不合的标记加以差别。

标记的方法专门多，常用的编号标记方法有染色法、挂牌法和烙印法。

家兔等较大年夜动物可用特制的号码牌固定于耳上，而小动物则常用染色法。

染色法是药理学实验课中最常应用的方法，平日用化学试剂涂染动物背部或四肢必定部位的外相，代表必定的编号，常用染色的化学试剂有：
图6 大年夜鼠、小鼠标记法黄色：3%-5%苦味酸溶液
咖啡色：20%硝酸银溶液
红色：0.5%中性红或品红溶液
黑色：煤焦油的酒精溶液
（1）1-10号标记法：编号的原则是先左后右，早年到后，如将动物背部的肩、
腰、臀部按左、中、右分为九个区，从左到右标记1-9号，第10号不作标记（图6）。

（2）10-100号标记法：在上述编号的同一部位，用各类不合色彩的化学试剂擦上斑点，就可代表响应的十位数，例如涂上黄色的苦味酸代表1-10号，涂上红色的中性红代表11-20号，涂上咖啡色的硝酸银代表21-30号，以此类推。

三、实验动物的给药方法
1、小鼠
1.1 灌胃法以左手抓住小鼠，使其腹部朝上，右手持灌胃器（以1-2mL打针器上连接细玻璃灌胃管或把打针针头磨钝稍加曲折制成的灌胃针头），灌胃管长约4-5cm，直径约1mm。

操作时，先从小鼠吵嘴将灌胃管插进口腔内，然后用灌胃管向后上方榨取小鼠头部，使口腔与食道呈一向线，再将灌胃管沿着上颚壁轻轻推入食道（图7），当推动约2-3cm时可稍感有阻力，注解灌胃管前部已达到膈肌，现在即可推动打针器进行灌胃，若打针器推注困难，应抽出重插，若误入气管给药，可使小鼠急速逝世亡，注药后轻轻拔出灌胃管，一次灌药量为
0.1-0.3mL/10g体重。

1.2 皮下打针法平日选择背部皮下打针，操作时轻轻拉起背部皮肤，将打针针刺入皮下，把针尖向阁下摆动，易摆动说明针尖确已刺入皮下，然后打针药液，拔针时，以手捏住
针刺部位，防止药液外漏（图8），打针药量为0.1-0.3mL/10g。

图7 小鼠灌胃法图8 小鼠皮下打针法
1.3 肌肉打针法小鼠因肌肉较少，专门少采取肌肉打针，如有须要可打针于股部肌肉，多选后腿上部外侧，一处打针量不跨过0.1mL。

1.4 腹腔打针法以左手固定小鼠，腹部向上，打针部位应是腹部的左、右下外侧1/4的部位，因为此处无重要器官。

用右手将打针器针头刺入皮下，沿皮下向前推动3-5mm，接着使针头与皮肤呈45度角刺入腹肌，连续向前推动，经由过程腹肌进入腹腔后感到抗击力消掉，现在可注入药液，一次打针量为0.1-0.2mL/10g体重（图9）。

图9 小鼠腹腔打针法图10 小鼠尾静脉打针法
1.5 静脉打针法一样采取尾静脉打针，事先将小鼠置于固定的筒内或铁丝罩内，或扣于烧杯内，使尾巴露出，尾巴于45-50。

C的温水中浸泡半分钟或用75%的酒精棉球擦拭，使血管充血，选择尾巴阁下两侧静脉打针，如针头确已在血管内，推注药液应无阻力，打针时若显现隆起白色皮丘，阻力增大年夜，说明未注入血管，应拔出针头从新向尾根部移动打针。

打针完毕后，把尾巴向打针部位内侧折曲而止血。

需反复静脉打针时，应尽可能从尾端开端，按次序向尾根部移动打针。

一次打针量为0.05-0.1mL/10g体重（图10）。

2、大年夜鼠
2.1 灌胃法用左手以缉捕固定法握住大年夜鼠（若两人合作时，助手以左手抓住大年夜鼠用右手抓住后肢和尾巴），灌胃方法与小鼠相类似，仅采取安装在5-10mL打针器上的金属灌胃管（长6-8cm,直径1.2mm,尖端为球状的金属灌胃管）。

一次灌药量为1-2mL/100g体重。

2.2 皮下打针法打针部位可选择背部或大年夜腿外侧，操作时轻轻拉起打针部位皮肤，将打针针刺入打针部位皮下，一次打针药量为1mL/100g体重。

2.3 肌肉打针与腹腔打针法同小鼠。

2.4 静脉打针法清醒大年夜鼠可采取尾静脉打针，方法同小鼠，麻醉大年夜鼠可从舌下静脉给药，也可将大年夜鼠腹股沟切开，从股静脉打针药物。

3、豚鼠
3.1 灌胃法用左手拇指和食指固定豚鼠两前肢，其余手指握住鼠身（两人操作时，助手以左手从动物的背部把后腿张开，并把腰部和后腿一路固定，用左手的拇指和食指捏住两前肢固定），灌胃管与灌胃方法同大年夜鼠。

亦可采取插管灌胃法，用木或竹制开口器，把导
尿管或塑料管经由过程开口器中心的小孔插入胃内，回打针器针栓，无空气抽回时即可注入药液。

3.2 皮下打针法打针部位多选择大年夜腿内侧、背部、肩部等皮下脂肪少的部位。

平日在大年夜腿内侧打针，一样需两人合作，一人固定豚鼠，一人握住侧后肢，将打针器针头与皮肤呈45。

角偏向刺入皮下，确信针头在皮下后打针，打针完毕后以指压刺入部位少焉，以防药液外漏。

3.3 肌肉打针与腹腔打针法同小鼠。

3.4 静脉打针法打针部位可选择前肢皮下头静脉、后肢小隐静脉、耳壳静脉、或雄鼠的阴茎静脉，有时亦可居心脏穿刺给药。

一样用前肢皮下头静脉穿刺较用后肢小隐静脉成功率高，而后肢小隐静脉下部比较固定，比起明显可见但不固定的上部穿刺成功率要高。

也可在胫前部将皮肤切开一小口，裸露出胫前静脉后打针，一次打针量不跨过2mL。

4、兔
4.1 灌胃法给家兔灌胃须要两人合作，助手就坐，将家兔的躯体夹于两腿之间，左手紧握双耳固定头部，右手抓住双前肢固定前身。

术者将木或竹制的开口器横放在家兔的高低颌之间，固定于舌头之上，然后把合适的导尿管经开口器中小孔，沿上颚壁慢慢插入食道约15-18cm，现在可将导尿管外口端置于一杯清水中，若无气泡逸出，说明白已插入食道，这时可用打针器注入药液，然后用少许清水冲刷导尿管，灌胃完毕，应先捏闭导尿管外口，拔出导尿管，再掏出开口器（图11）。

图11 家兔灌胃法
4.2 皮下、肌肉、腹腔打针法全然方法与鼠类雷同，选用的针头能够大年夜一些。

给药的最大年夜容量分别为：0.5mL、1.0mL和
5.0mL/kg。

4.3 静脉打针法打针部位一样采取耳缘静脉（兔耳外缘的血管为静脉，中心的血管为动脉（图12）。

可用酒精棉球涂擦耳部边沿静脉部位的皮肤，或用电灯胆烘烤兔耳使血管扩大，以左手食指放在耳下将兔耳垫起，并以拇指按住耳缘部分，右手持打针器，针头经皮下，沿
皮下向前推动少许再刺入血管，打针时若无阻力或无产生局部皮肤发白隆起现象，说明针头在血管内即可打针药液，打针完毕压住针眼，拔去针头，连续榨取数分钟止血（图13）。

图12 兔耳缘血管分布图13 兔耳缘静脉打针法
5、青蛙和蟾蜍
淋巴囊内打针蛙及蟾蜍皮下有多个淋巴囊，对药物易接收，但皮肤无弹性，药液轻易从穿刺孔逸出。

是以，给任何一个淋巴囊注药均不克不及直截了当刺入。

如作腹淋巴囊打针时，将针头从股部上端刺入肌层，进入腹壁皮下淋巴囊再注药，作胸部淋巴囊打针时，针头由口腔底部穿下颌肌层而达胸部皮下；作股淋巴囊打针时，应从小腿皮肤刺入，经由过程膝关节而达大年夜腿部皮下。

注入药液量一样为0.25-0.5mL（图14）。

图14 蛙的皮下淋巴囊
1.颌下囊
2.胸囊
3.腹囊
4.股囊
5.胫囊
6.侧囊
7.头背囊
四、动物的麻醉和取血
1 实验动物的麻醉
在一些动物实验中，专门是手术等实验，为削减动物的挣扎和保持其安静，便于操作，常需对动物采取须要的麻醉。

因为动物属间的差别等情形，所采取的麻醉方法和所选用的麻醉剂亦有所不合。

1.1 常用的麻醉剂
动物实验中常用的麻醉剂分为三类，即挥发性麻醉剂、非挥发性麻醉剂和中药麻醉剂。

1.1.1 挥发性麻醉剂
这类麻药包含乙醚、氯仿等。

乙醚吸入麻醉适应于各类动物，其麻醉量和致逝世量差距大年夜，因此安稳度也大年夜，动物麻醉深度轻易操纵，同时麻醉后清醒较快。

其缺点是对局部刺激感化大年夜，可引起上呼吸道黏膜液体渗出增多，再经由过程神经反射可阻碍呼吸、血压和心跳活动，同时轻易引起梗塞，故在乙醚吸入麻醉时必须有人照看，以防止麻醉过深而显现上述情形。

1.1.2 非挥发性麻醉剂
这类麻醉剂种类较多，包含巴比妥钠、戊巴比妥钠、硫喷妥钠等巴比妥类的衍生物，氨基甲酸乙脂和水合氯醛。

这些麻醉剂应用便利，一次给药可保持较长的麻醉时刻，麻醉过程较均衡，动物无明显挣扎现象。

但其缺点是清醒较慢。

1.1.3 中药麻醉剂
动物实验时有时也用到像洋金花和氢溴酸冬莨菪碱等中药麻醉剂，但因为其感化不敷稳固，同时常需加佐剂麻醉后果才能幻想，故应用过程中不克不及获得普及，因而，多半实验室不选用这类麻醉剂进行麻醉。

1.2 动物的麻醉方法
1.2.1全身麻醉
吸入法：用一块圆玻璃板和一个钟罩或一个密闭的玻璃箱作为挥发性麻醉剂的容器，多选用乙醚做麻药。

麻醉时用几个棉球，将乙醚倒入个中，灵敏转入钟罩或箱内，让其挥发，然后把待麻醉动物投入，约隔4～6min即可麻醉，麻醉后应急速掏出，并预备一个蘸有乙醚的棉球小烧杯，在动物麻醉变浅时套在鼻上使其补吸麻药。

本法最适于大年夜、小鼠的短期操作性实验的麻醉，
腹腔和静脉给药麻醉法：非挥发性和中药麻醉剂均可用作腹腔和静脉打针麻醉，操作简便，是实验室最常采取的方法之一。

腹腔给药麻醉多用于大年夜鼠、小鼠和豚鼠，较大年夜的动物如兔、狗等则多用于静脉给药进行麻醉。

因为各类麻醉剂的感化长短以及毒性的差别，因此在腹腔和静脉麻醉时，必定要操纵药物的浓度和打针量（详见附录表2）。

1.2.2局部麻醉
局部麻醉一样应用0.5%～1.0%盐酸普鲁卡因打针；眼、鼻、咽喉、黏膜别处麻醉可2%盐酸可卡因溶液，滴入后数秒钟即可显现麻醉。

1.2.3麻醉留意事项
1、静脉打针必须迟缓，同时不雅察肌肉重要性、角膜反射和对皮肤夹捏的反响，当这些活动明显减弱或消掉时，急速停止打针。

配制的药液浓度要适中，弗成过高，以免麻醉过急；但也不克不及过低，以削减注入溶液的体积。

2、麻醉时需留意保温。

麻醉时代，动物的体温调剂机能往往受到克制，显现体温降低，可阻碍实验的精确性。

此经常需采取保温方法，
3、做慢性实验时，在严寒冬季，麻醉剂在打针前应加热至动物体温程度。

2、实验动物采血方法
实验研究中，经常要采集实验动物的血液进行惯例检查或某些生物化学分析，故必须操纵血液的精确采集。

不合动物采血部位与采血量的关系见附录三。

常用实验动物的最大年夜安稳采血量与最小致逝世采血量，见附录四。