博士学位论文

学校代码：10023

学号：B2014001052

博士学位论文

遗传性色素性皮肤病基因突变及相关致病机理的研究

A study on gene mutations and related pathogenic mechanism of

hereditary pigmentary skin disorders

所院：北京协和医院

姓名：刘佳玮

指导教师：马东来

学科专业：皮肤病学与性病学

研究方向：遗传及色素性皮肤病

完成日期：2016.03.15

目录

第一部分全外显子组测序技术对家族性泛发性雀斑样痣致病基因的探索 (1)

摘要 (1)

ABSTRACT (2)

1.引言 (3)

1.1.雀斑样痣的临床概况 (3)

1.2.黑素细胞的生成和调节概述 (3)

1.3.高通量测序简介 (4)

1.4.本研究的目的和意义 (7)

2.实验材料 (7)

2.1.实验仪器和实验设备 (7)

2.2.实验试剂 (8)

3.实验方法 (9)

3.1.临床资料采集 (9)

3.2.QIAamp DNA Blood Mini Kit提取基因组DNA (9)

3.3.琼脂糖凝胶电泳检测基因组DNA质量 (9)

3.4.利用NanoDrop-2000浓度测试仪测定样品 (10)

3.5.全外显子组测序 (10)

3.6.皮肤组织的HE染色 (18)

3.7.免疫组织化学染色 (19)

3.8.石蜡切片免疫荧光染色 (20)

3.9.SDS-PAGE及Western Blot (20)

4.实验结果 (22)

4.1.家系及临床特征 (22)

4.2.全外显子组测序质控结果 (23)

4.3.致病基因筛查 (27)

4.4.家系共分离验证及散发患者验证 (27)

4.5.EPHB1基因在人皮肤组织中的表达情况 (28)

5.讨论 (31)

6.结论 (33)

参考文献 (33)

第二部分基于目标区域捕获的二代测序技术在色素异常症检测中的应用 (36)

摘要 (36)