骨碎补多指标成分指纹图谱控制与药材质量

皮苷、新北美圣草苷和 Ｂ４ ． ０ － Ｄ葡萄糖酰咖啡酸 ，３种对照品为参 照物 ，建立 骨碎补 药材 的指纹 图谱。结果 初 步建 立了骨碎补 药 材的 ＨＰ Ｌ Ｃ指纹图谱 ，标 定 ８个共有峰 ，测定 １ ０批 骨碎补 正 品 中 ３种 成分 含量 ，抽 皮苷 ０ ． ５ ６ ％～Ｏ ． ９ ６ ％，新 北 美圣草 苷 ０ ． ４ １ ％～ ０ ． ６ ９ ％，Ｂ４ ＿ ｏ ＿ Ｂ ＿ Ｄ葡萄糖 酰咖啡 酸 ０ ． １ １ ％～０ ． ３ ６ ％，鉴别 了真伪骨碎补。结论
发油和萜类化合物等 。《 中国药典 原来 以其主要 的黄酮 类化合物柚皮苷 （ ｎ ａ ｒ ｉ ｎ ｇ ｉ ｎ ）作为质量控制的唯一指标 。现 代研究表 明：多指标成分分析能更全面反 映中药 （ 如骨碎 补等）整体质量信息［ ２ ］ 。笔者以抽皮苷 、新北美圣草苷及 Ｅ － ４ － ０ － ￣ － Ｄ葡萄糖酰咖啡酸多指标成分为对照品，建立多指 标成分指纹图谱鉴定市售骨碎补药材的真假优劣 。 １ 仪器与试药 Ａ ｇ ｉ ｌ ｅ ｎ ｔ １ １ ０ ０ ＨＰ Ｌ Ｃ仪 ，包 括 四元 梯度 泵 ，Ｄ Ａ Ｄ紫 外检测器及 Ｐ ｈ ｅ ｎ ｏ ｍ ｅ ｎ ｅ ｘ Ｃ １ ８（ ２ ５ ０ ｍ ｍ× ４ ． ６ ｍ ｍ，５ ｐ ｔ ｍ）色 谱柱 （ 美 国 Ａｇ ｉ ｌ ｅ ｎ ｔ 公司） 。 柚皮苷 对 照 品 （ 中国药 品生物 制 品检定所 ，批 号 ：
第１ １ 卷第 ２ ３期 ・总第 １ ７ ５期 ２ ０ １ ３年 １ ２月 ・上 半 月 刊
骨碎 补 多指标成分指纹 图谱控 制与药材 质量
高厚 明 熊 明玲 刘 凯 南 刘志承 刘 纪青
（ 广州 中医药大学附属深圳市 中医院药学部 ，深圳 ５ １ ８ ０ ３ ３ ）
摘 要 ：目 的 建 立 骨碎 补 药材 多指 标 成 分 的 ＨＰ Ｌ Ｃ指 纹 图谱 控 制 其 药 材 质 量 。方 法 采 用 ＨＰ Ｌ Ｃ － Ｄ ＡＤ 法 色谱 柱 为 ｐ ｈ ｅ ｎ ｏ ｍｅ ｎ ｅ ｘ Ｃ １ ８
柱 （ ２ ５ ０ ｍ ｍ ｘ４ ． ６ ｍ ｍ，５ ｍ） ；流 动 相 为 乙腈一 ０ ． ４ ％ 冰 醋 酸 水 溶 液 ，梯 度 洗 脱 ，柱 温 ２ ５ ℃ ，流 速 １ ． ０ ｍｌ ・ｍｉ ｎ － ，检 测 波 长 ２ ５ ４ ｎ ｍ。 以抽
补正 品 （ 详见表 １ ） ，经广州 中医药大学 中药学 院张丹雁教 授鉴定为正品，广州市药材市场购买五批骨碎补药材 。
２ 方 法与 结 果
（ Ｅ ＿ ４ ＿ ０ ＿ Ｊ ｝ Ｄ葡萄糖酰咖啡酸） ，综合考虑 出峰时间，峰 面积和分离 度等 因素 ，柚 皮苷 的含量 最高 （ 即峰 面积最 大） ，色谱峰分离度较好且纯度 高，把它作为参照物 即 Ｓ Ｉ ， 其他峰面积 、出峰时间均以 Ｓ ｌ 为１ 作参照计算。 ｚ ４ ． ３ 精密度 、重复性与稳定性试验 分别依法进行相关 试验 ，结果各共有峰相对保 留时间的 Ｒ Ｓ Ｄ，相对峰面积的 Ｒ Ｓ Ｄ均分别在 ０ ． ０ ０ ％～０ ． ５ ７ ％、０ ． ０ ２ ％～２ ． ０ １ ％ （ ｎ＝６ ） ， 各共有峰的相似度均分别在 ０ ． ９ ９ ８ ￣１（ ：６ ） 。 ２ ． ５ 各样 品中主成分含量测定 ２ ． ５ ． １ 工作 曲线 的制 定 分别精 密吸取 “ ２ ． ２ ”项 的柚 皮苷 、新北美圣草苷及 Ｂ４ － ｏ － Ｄ葡萄糖酰咖啡酸 的对照
液各 ２ ｏ ｔ ． ｄ ，注入 ＨＰ Ｌ Ｃ仪记 录 ４ ０ ａ ｒ ｉ ｎ内 的色谱 峰 ，见 图 １ ，高效液相色谱图 ，可见骨碎补供试品在对照 品 Ｓ １ 、 和 均有相应色谱峰 。

．．
：
＃
— — — — —
ｊ Ｌ ：
Ａ
—— — —— — —现 一“ ’
■ ｌ ，
品溶液适量 ，每一对 照品均用 甲醇稀释成 １ ０ ｒ ｎ ｌ ，成为 ６
２ ． １ 色 谱 条 件 色 谱 柱 ：ｐ ｈ ｅ ｎ ｏ ｍ ｅ ｎ ｅ ｘ Ｃ １ ８（ ２ ５ ０ ｍｍ × ４ ． ６ ｍｍ，５ １ ￣ ｒ ａ ） ；流动相 ：乙腈 （ Ａ ）和 ０ ． ４ ％冰醋 酸水溶 液 （ Ｂ ） ：二元 梯度洗脱 程序 ：０ ～ｌ Ｏ ｍ ｉ ｎ ，５ ％Ａ～ １ ０ ％Ａ，
—
—
—
布 —— —— —— —— 穗ｒ —— —— —— —
图 １ 高效 液 相 色 谱 图
八 对照 品混合溶液 （ ｓ Ｉ ．抽皮苷 ，Ｓ ２ ．新北美圣草苷 ，
．
Ｅ ＿ ４ － ｏ － Ｄ葡萄糖酰咖啡酸）Ｂ 骨碎补供试 品溶 液
２ ． ４ ． ２ 参照物 的确定 骨碎补药材高效液相色谱 图的三
利用多指标成 分 ＨＰ Ｌ Ｃ指纹 图谱可从定性 和定量两方
面 控 制 骨 碎 补 药 材 的 内在 质 量 ， 指 纹 图谱 的 多成 分评 价 方法 优 于常 规 的 单 一 指 标 评 价 方 法 。
骨碎补为 中药 材水 龙骨科植 物槲蕨 Ｄ ｒ ｙ ａ ｎ ｒ ｉ ａ ｆ ｏ ｒ ｔ ｕ ｎ ｅ ｉ （ Ｋ ｕ ｎ ｚ ｅ ） Ｊ Ｓ ｍ的干燥根茎 。其化学成分主要有黄酮类 、挥
个对照品中出峰依次为 Ｓ Ｉ（ 柚皮苷） 、 （ 新北美圣草苷） 、
１ １ ０ ７ ２ ２ － ２ ０ １ ０ ０ ２ ） ，新 北美圣草苷 ，Ｅ － ４ － ０ － ￣ － Ｄ葡萄糖 酰咖啡 酸 （ 沈阳药科大学 药学 院提供 ，纯 度 ９ ８ ％以上） ，甲醇、 乙腈为色谱纯，乙醇 、冰醋酸 、水等为分析纯。１ Ｏ 批骨碎
关 键 词 ：骨 碎 补 ；对 照 品 ； 高效 液 相 指 纹 图谱 ； 多指 标 成 分 ；鉴 别 ｄ ｏ ｉ ： １ ０ ． ３ ９ ６ ９ ／ ｊ ． ｉ ｓ ｓ ｎ ． １ ６ ７ ２ — ２ ７ ７ ９ ． ２ ０ １ ３ ． ２ ３ ． １ １ ６ 文章编号 ： １ ６ ７ ２ — ２ ７ ７ ９ （ ２ ０ １ ３ ） 一 ２ ３ — ０ １ ５ ８ — ０ ２