球菌

4、肠毒素 、肠毒素(enterotoxin)按抗原性和等电点不同， 按抗原性和等电点不同， 按抗原性和等电点不同
分A、B、C1、C2、C3、D、E、G和H 9个血清 、 、 、 、 、 、 、 和 个血清 均能引起急性胃肠炎即食物中毒。 型，均能引起急性胃肠炎即食物中毒。 性质： 性质：葡萄球菌肠毒素是一组热稳定的单纯蛋白 耐热100℃30min：抵抗胃肠液中蛋白酶的水 质，耐热 ℃ ： 解作用。 解作用。 5、表皮剥脱毒素 蛋白质，不耐热，对新生儿、幼 、 蛋白质，不耐热，对新生儿、 儿和免疫力低下的成人可引起烫伤样皮肤综合征， 儿和免疫力低下的成人可引起烫伤样皮肤综合征， 患者皮肤呈弥漫性红斑和水泡， 患者皮肤呈弥漫性红斑和水泡，继而表皮上层大 片脱落。 片脱落。
三、免 疫 性
四、微生物学检查法
分离培养和鉴定 致病性葡萄球菌的鉴定： 致病性葡萄球菌的鉴定： 1、产生金黄色色素， 、产生金黄色色素， 2、有溶血性。 、有溶血性。 3、产生凝固酶 、 4、耐热核酸酶 、 5、发酵甘露醇。 、发酵甘露醇。 由于凝固酶阴性株有时亦能致病， 由于凝固酶阴性株有时亦能致病，在最后判定时 应结合临床病症。 应结合临床病症。
一、生物学性状
（一）形态与染色 球形或略呈椭圆形。直径平均0.8um。排列呈葡 球形或略呈椭圆形。直径平均 。 萄串状， 无鞭毛， 胞革兰染色为阳性。 萄串状， 无鞭毛，无芽 胞革兰染色为阳性。
（二）培养特性 营养要求不高， 营养要求不高，在肉汤培养基中呈均匀混浊生 管底稍有沉淀。在普通琼脂平板上形成圆形、 长，管底稍有沉淀。在普通琼脂平板上形成圆形、 隆起、表面光滑、湿润、边缘整齐不透明的菌落。 隆起、表面光滑、湿润、边缘整齐不透明的菌落。 菌落因种不同而出现金黄色白色或柠檬色等色素。 菌落因种不同而出现金黄色白色或柠檬色等色素。 在血琼脂平板上， 在血琼脂平板上，有的菌株菌落周围形成明显的 全透明溶血环 (β溶 血)，溶血菌株大多有致病性。 溶 ，溶血菌株大多有致病性。 （三）生化反应 触酶阳性。 触酶阳性。致病株分解甘露醇
二、致 病 性
（一） 致病物质 1．凝固酶 是能使含抗凝剂的人或兔血浆发生凝 ． 固的酶类物质。凝固酶有两种： 固的酶类物质。凝固酶有两种： 一种是分泌至菌体外的称为游离凝固酶 一种是分泌至菌体外的称为游离凝固酶 。作用 类似凝血酶原物质， 类似凝血酶原物质，被人或兔血浆中的协同因子 激活为凝血酶样物质后， 激活为凝血酶样物质后，使液态的纤维蛋白原变 成固态的纤维蛋白，从而血浆凝固。 成固态的纤维蛋白，从而血浆凝固。 另一种结合于菌体表面称为结合凝固酶 另一种结合于菌体表面称为结合凝固酶 。其作 用是在该菌株的表面有纤维蛋白原受体， 用是在该菌株的表面有纤维蛋白原受体，当菌混 悬于人或兔血浆时， 悬于人或兔血浆时，纤维蛋白原与菌受体交联而 试管法检测 使细菌凝聚。游离凝固酶采用试管法检测， 使细菌凝聚。游离凝固酶采用试管法检测，结合 凝固酶则以玻片法测定。 凝固酶则以玻片法测定。 玻片法测定
药敏实验 金黄色葡萄球菌约90％的菌株产生β—内酰胺酶， 内酰胺酶， 金黄色葡萄球菌约 ％的菌株产生 内酰胺酶 成为青霉素的耐药菌株。对临床分离的菌株， 成为青霉素的耐药菌株。对临床分离的菌株，必 须做药物敏感实验，找到敏感药物。 须做药物敏感实验，找到敏感药物。 葡萄球菌肠毒素检查 取食物中毒患者的呕吐物、 取食物中毒患者的呕吐物、粪便或剩余食物作细 菌分离培养和鉴定。 菌分离培养和鉴定。 ELISA法可检测微量肠毒素，快速敏感。 法可检测微量肠毒素， 法可检测微量肠毒素 快速敏感。 特异的核酸杂交和PCR技检测葡萄球菌是否为产 特异的核酸杂交和 技检测葡萄球菌是否为产 肠毒素的菌株。 肠毒素的菌株。
（四）抗原结构 1．葡萄球菌 蛋白 ( staphylococcal protein A ．葡萄球菌A蛋白 SPA) 存在于菌细胞壁一种表面蛋白。 存在于菌细胞壁一种表面蛋白。 结构：单链多肽，以共价键形式与胞壁肽聚糖 结构：单链多肽， 结合。 结合。 特点： 可与人类和多种哺乳动物IgG的Fc 特点：SPA可与人类和多种哺乳动物 可与人类和多种哺乳动物 的 段非特异性结合； 分子的Fab段仍能同相 段非特异性结合；而IgG分子的 分子的 段仍能同相 特异性结合。 应抗原分子发 特异性结合。 采用含SPA的葡萄球菌作为载体，结合特异性 的葡萄球菌作为载体， 采用含 的葡萄球菌作为载体 抗体后，可开展简易、快速的协同凝集试验 协同凝集试验。 抗体后，可开展简易、快速的协同凝集试验。 SPA与IgG结合后的复合物具有抗吞噬、促细 结合后的复合物具有抗吞噬、 与 结合后的复合物具有抗吞噬 胞分裂、引起超敏反应、 胞分裂、引起超敏反应、损伤血小板等多种生 物学活性。 物学活性。
(2) 乙型溶血性链球菌：菌落周围形成界限分明、 乙型溶血性链球菌：菌落周围形成界限分明、 完全透明的无色溶血环，称乙型溶血或β溶血 溶血， 完全透明的无色溶血环，称乙型溶血或 溶血，β 溶血环中的红细胞完全溶解，因而称为溶血性链 溶血环中的红细胞完全溶解， 球菌。这类链球菌致病力强。 球菌。这类链球菌致病力强。 (3) 丙型链球菌：不产生溶血素，菌落周围无溶 丙型链球菌：不产生溶血素， 血环，因而称不溶血性链球菌。一般不致病。 血环，因而称不溶血性链球菌。一般不致病。
6、毒性休克综合征毒素-l (toxic shock 、毒性休克综合征毒素 syndrome toxin 1 TSST-1) 由噬菌体 群金黄色 由噬菌体I群金黄色 葡萄球菌产生的一类蛋白质。 葡萄球菌产生的一类蛋白质。TSST-l可引起机体 可引起机体 发热，增加对内毒素的敏感性。 发热，增加对内毒素的敏感性。感染产毒菌株后 可引起机体多个器官系统的功能紊乱或毒性休克 综合征 (TSS)。 。 7．耐热核酸酶：(heat stable nuclease)致病 ．耐热核酸酶： 致病 性葡萄球菌产生，耐热， 性葡萄球菌产生，耐热，100℃15min或60℃2h ℃ 或 ℃ 不被破坏，能较强降解DNA和RNA。 不被破坏，能较强降解 和 。
第二节 链球菌属
链球菌属 (Streptococcus) 细菌为链状或 个别种成双排列的革兰阳性球菌。 个别种成双排列的革兰阳性球菌。
链球菌分类 ： 1．溶血现象分类 ． (1) 甲型溶血性链球菌 ：菌落周围有草绿色溶 血环，称甲型溶血或α溶血，因而称草绿色链球 血环，称甲型溶血或 溶血， 溶血 溶血环中的红细胞并未完全溶解。 菌。α溶血环中的红细胞并未完全溶解。这类链 溶血环中的红细胞并未完全溶解 球菌多为条件致病菌。 球菌多为条件致病菌。
能获得一定的免疫力，但难以防止再次感染。 能获得一定的免疫力，但难以防止再次感染。 标本 化脓性病灶取脓汁；败血症取血液；脑膜 化脓性病灶取脓汁；败血症取血液； 炎取脑脊液；食物中毒取剩余食物、呕吐等。 炎取脑脊液；食物中毒取剩余食物、呕吐等。 标本涂片，革兰染色镜检。 直接涂片镜检 标本涂片，革兰染色镜检。一般 根据细菌形态、排列和染色性可作出初步诊断。 根据细菌形态、排列和染色性可作出初步诊断。
致病性
CNS致病机制主要是： 致病机制主要是： 致病机制主要是 细菌胞壁外黏质(ESS)， 细菌胞壁外黏质 ， 溶血素(β、 溶血素)， 溶血素 、δ—溶血素 ， 溶血素 腐生葡萄球菌能选择性地吸附在尿道上皮细胞， 腐生葡萄球菌能选择性地吸附在尿道上皮细胞， 易于定植及引起感染。 易于定植及引起感染。 CNS引起感染有以下几种： 引起感染有以下几种： 引起感染有以下几种 泌尿系统感染 细菌性心内膜炎 败血症 术后及植入医用器械引起的感染
（二）所致疾病 有侵袭性和毒素性两种类型。 有侵袭性和毒素性两种类型。 1．侵袭性疾病 主要引起化脓性炎症。 主要引起化脓性炎症。 ． 各种器官的化脓性感染：如气管炎、肺炎、等； 各种器官的化脓性感染：如气管炎、肺炎、 皮肤化脓性感染：如毛囊炎、 皮肤化脓性感染：如毛囊炎、疖、痈、等 全身感染：如败血症、脓毒血症等， 全身感染：如败血症、脓毒血症等，多由金黄色葡 萄球菌引起。 萄球菌引起。 2．毒素性疾病 由葡萄球菌产生的外毒素引起。 由葡萄球菌产生的外毒素引起。 ． 食物中毒： 食物中毒： 烫伤样皮肤综合征： 烫伤样皮肤综合征： 毒性休克综合征(TSS)： 毒性休克综合征 ：
凝固酶阴性葡萄球菌
过去认为凝固酶阴性的葡萄球菌(coagulase 过去认为凝固酶阴性的葡萄球菌 negative staphylococcus，CNS)对人不致病， 对人不致病， ， 对人不致病 但近年来临床和实验室检测证实CNS已经成为医 但近年来临床和实验室检测证实 已经成为医 源性感染的常见重要病原菌。 源性感染的常见重要病原菌。 生物学性状 革兰阳性菌，不产生血浆凝固酶、α溶血素等毒 革兰阳性菌，不产生血浆凝固酶、 溶血素等毒 性物质。最常见的CNS是表皮葡萄球菌和腐生葡 性物质。最常见的 是表皮葡萄球菌和腐生葡 萄球菌。 萄球菌。
球
菌
暨南大学医学院微生物与免疫学教研室 刘小澄
球菌（ 球菌（coccus）是细菌中的一个大类。对 ）是细菌中的一个大类。 人类有致病性的病原性球菌主要引起化脓 性炎症，故又称为化脓性球菌 化脓性球菌(pyogenic 性炎症，故又称为化脓性球菌 coccus)。 。
第一节 葡萄球菌属
金黄色壁中多糖抗原 ． 不同，可分成A、 、 、 、 、 、 、 、 不同，可分成 、B、C、D、E、F、G、HK、L 等共20群 对人致病的链球菌菌株， ％ 等共 群。对人致病的链球菌菌株，90％左右属 A群，同群链球菌间，因表面蛋白质抗原不同， 群 同群链球菌间，因表面蛋白质抗原不同， 又分若干型。例如A群根据其 抗原不同， 群根据其M抗原不同 又分若干型。例如 群根据其 抗原不同，可分成 l00个型对人类致病的A群链球菌多数呈现乙型 个型对人类致病的 约l00个型对人类致病的A群链球菌多数呈现乙型 溶血。 溶血。 3、生化反应分类 分为需氧、兼性需氧和厌氧 、 分为需氧、 性链球菌。前两类对人有致病性， 性链球菌。前两类对人有致病性，后者为正常菌 在特定条件下致病。 群，在特定条件下致病。
2．荚膜 宿主体内的大多数金黄色葡萄球菌表面 ． 存在着荚膜多糖， 存在着荚膜多糖，有利于细菌粘附到细胞或生物 合成材料表面 . 3．多糖抗原 具有群特异性，存在于细胞壁。 ． 具有群特异性，存在于细胞壁。
（五）分类 葡萄球菌可分为金黄色葡萄球菌、 葡萄球菌可分为金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌 、 和腐生葡萄球菌3种 和腐生葡萄球菌 种。其中金黄色葡萄球菌多为致 病菌，表皮葡萄球菌偶可致病， 病菌，表皮葡萄球菌偶可致病，腐生葡萄球菌一 般不致病。 般不致病。 （六）抵抗力 葡萄球菌对外界因素的抵抗力强于其他无芽胞菌。 葡萄球菌对外界因素的抵抗力强于其他无芽胞菌。 干燥脓汁、痰液中存活2～ 月 加热60℃ 或 干燥脓汁、痰液中存活 ～3月；加热 ℃1h或 80℃30min才被杀死； 才被杀死； ℃ 才被杀死
8、纤维蛋白溶酶(fibrinolysin)：亦称葡激酶 、纤维蛋白溶酶 ： (staphylokinase)，可激活血浆中的纤维蛋白酶 ， 使之成为纤维蛋白酶， 原，使之成为纤维蛋白酶，导致血浆纤维蛋白的 溶解，利于病菌的扩散。 溶解，利于病菌的扩散。 9、透明质酸酶：亦称扩散因子，能溶解细胞间 、透明质酸酶：亦称扩散因子， 质中的透明质酸，利于细菌的扩散。 ％ 质中的透明质酸，利于细菌的扩散。90％以上的 金黄色葡萄球菌能产生该酶。 金黄色葡萄球菌能产生该酶。
2．葡萄球菌溶素 (staphylolysin) 对人类 ． 有致病作用的主要是α溶素 溶素。 溶素是蛋白 有致病作用的主要是 溶素。α溶素是蛋白 不耐热， ℃ 被破坏。 质，不耐热，65℃30min被破坏。是一种 被破坏 外毒素，具有良好的抗原性； 外毒素，具有良好的抗原性；经甲醛液脱 毒后可制成类毒素。 毒后可制成类毒素。 3、杀白细胞素 杀白细胞素与细胞受体结 、 细胞膜透性增高， 合，细胞膜透性增高，胞浆内颗粒排出细 胞死亡。 胞死亡。