T细胞检测技术
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贯穿全篇,却有两个句子别出深意,不单单是在写乐,而是另有所指,表达出另外一种情绪,请你找出这两个句子,说说这种情绪是什么。明确:醉翁之意不在酒,在乎山水之间也。醉能同其乐,醒能述以文者,太守也。这种情绪是作者遭贬谪后的抑郁,作者并未在文中袒露胸怀,只含蓄地说:“醉能同其乐,醒能述以文者,太守也。”此句与醉翁亭的名称、“醉翁之
2、分子生物学检测
(1)Realtime-PCR (2)分子杂交
三、T细胞介导的细胞毒实验
特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)识别靶细 胞表面特异性抗原,通过Fas途径及颗粒酶途径, 介导靶细胞溶解。
1、51Cr释放实验
铬酸钠(Na251CrO4)中的六价铬能被活 细胞摄取,并在细胞溶解后以三价铬的形 式被释放。
化,使文章越发显得音调铿锵,形成一种骈散结合的独特风格。如“野芳发而幽香,佳木秀而繁阴”“朝而往,暮而归,四时之景不同,而乐亦无穷也”。(2)文章多用判断句,层次极其分明,抒情淋漓尽致,“也”“而”的反复运用,形成回环往复的韵律,使读者在诵读中获得美的享受。(3)文章写景优美,又多韵律,使人读来不仅能感受到绘画美,也能感受到韵律美。
1.朝而往,暮而归;2.杂然而前陈者表转折
1.而不知人之乐;2.而不知太守之乐其乐也虚词“之”的用法用法
• 方法学评价 优点:灵敏、特异,是CTL活性测定的经典方法; 缺点:操作繁琐;放射性;靶细胞51Cr自发释放;
2、IC Assay(In vivo cytotoxicity Assay)
表达特定抗原的肿瘤细胞系经CFSE标记后, 皮下注射入小鼠,被小鼠体内抗原特异性CTL作用 24小时后,取出肿瘤细胞,检测其CFSE含量。
西)人,因吉州原属庐陵郡,因此他又以“庐陵欧阳修”自居。谥号文忠,世称欧阳文忠公。北宋政治家、文学家、史学家,与韩愈、柳宗元、王安石、苏洵、苏轼、苏辙、曾巩合称“唐宋八大家”。后人又将其与韩愈、柳宗元和苏轼合称“千古文章四大家”。
关于“醉翁”与“六一居士”:初谪滁山,自号醉翁。既老而衰且病,将退休于颍水之上,则又更号六一居士。客有问曰:“六一何谓也?”居士曰:“吾家藏书一万卷,集录三代以来金石遗文一千卷,有琴一张,有棋一局,而常置酒一壶。”客曰:“是为五一尔,奈何?”居士曰:“以吾一翁,老于此五物之间,岂不为六一乎?”写作背景:宋仁宗庆历五年(1045年),
• 对于依赖于该细胞因子而增殖的细胞, 细胞增殖程度与细胞因子含量呈正相关。
• 方法学评价 优点:敏感(pg);显示细胞因子的活性; 缺点:影响因素多(同一细胞分泌多种细胞因子, 多种细胞因子呈现相同功能,细胞因子及其相应受 体同时分泌);
2、免疫学检测
(1)ELISA: 操作简单,非特异性影响大; (2)ELISPOT: 高度的敏感性,可重复性强,
T细胞检测技术
机体接受外来抗原及自身抗原刺激后, 通过细胞免疫和体液免疫及相关系统协同 作用,对抗原产生应答。
T 细胞应答: • T细胞增殖 • 分泌细胞因子 • 细胞毒效应 • 表达特定表面标志
一、淋巴细胞增殖实验
1、原理淋巴ຫໍສະໝຸດ 胞刺激物DNA合成 母细胞
分化
细胞变大 细胞浆扩大 空泡 核仁明显 核染色质疏松
寓之酒也。节奏划分思考“山行/六七里”为什么不能划分为“山/行六七里”?
会员免费下载 明确:“山行”意指“沿着山路走”,“山行”是个状中短语,不能将其割裂。“望之/蔚然而深秀者”为什么不能划分为“望之蔚然/而深秀者”?明确:“蔚然而深秀”是两个并列的词,不宜割裂,“望之”是总起词语,故应从其后断句。【教学提示】引导学生在反复朗读的过程中划分朗读节奏,在划分节奏的过程中感知文意。对于部分结构复杂的句子,教师可做适
意不在酒,在乎山水之间也”前后呼应,并与“滁人游”“太守宴”“众宾欢”“太守醉”连成一条抒情的线索,曲折地表达了作者内心复杂的思想感情。目标导学六:赏析文本,感受文本艺术特色1.在把握作者复杂感情的基础上朗读文本。2.反复朗读,请同学说说本文读来有哪些特点,为什么会有这些特点。(1)句法上大量运用骈偶句,并夹有散句,既整齐又富有变
SI
试验孔cpm(A490nm )均值 对照孔cpm(A490nm )均值
优点:3H-TdR掺入法敏感性高,客观性强,重复性好。 缺点:但需一定设备条件,同时还存在放射性核素污染问题。
(3)CFSE(PKH26等)染色法
原理:
CFSE等染料可连结到细胞内蛋白的氨基酸群 (PKH26能插入脂膜),并随细胞分裂而分配到子 代细胞中,每分裂一次,荧光强度减少一倍。
目标导学七:探索文本虚词,把握文言现象虚词“而”的用法用法
文本举例表并列
1.蔚然而深秀者;2.溪深而鱼肥;3.泉香而酒洌;4.起坐而喧哗者表递进
1.而年又最高;2.得之心而寓之酒也表承接
1.渐闻水声潺潺,而泻出于两峰之间者;2.
若夫日出而林霏开,云归而岩穴暝;3.野芳发而幽香,佳木秀而繁阴;4.水落而石出者;5.临溪而渔;6.太守归而宾客从也;7.人知从太守游而乐表修饰
股清幽的香味,好的树木枝叶繁茂,形成浓郁的绿荫。天高气爽,霜色洁白,泉水浅了,石底露出水面,这是山中四季的景色。意译法:太阳升起,山林里雾气开始消散,烟云聚拢,山谷又开始显得昏暗,清晨自暗而明,薄暮又自明而暗,如此暗明变化的,就是山中的朝暮。春天野花绽开并散发出阵阵幽香,夏日佳树繁茂并形成一片浓荫,秋天风高气爽,霜色洁白,冬 日水枯而石底上露,如此,就是山中的四季。【教学提示】翻译有直译与意译两种方式,直译锻炼学生用语的准确性,但可能会降低译文的美感;意译可加强译文的美感,培养学生的翻译兴趣,但可能会降低译文的准确性。因此,需两种翻译方式都做必要引导。全文直译内容见《我的积累本》。目标导学四:解读文段,把握文本内容1.赏析第一段,说说本文是如何引
方法学评价 优点:简便,快速,敏感 缺点:成本高,受HLA型别的限制
2、表面标志CD107a/b的检测
CD107a/b表达于T细胞内的质膜上,随着脱颗 粒作用,一过性表达于细胞表面;T细胞表面 CD107a/b的检测可反应T细胞的溶解靶细胞效应。
方法学评价 优点:简便,快速,敏感,不受HLA型别的限制 缺点:脱颗粒作用的非特异性
“山水之乐”的具体化。3.第三段同样是写“乐”,但却是写的游人之乐,作者是如何写游人之乐的?明确:“滁人游”,前呼后应,扶老携幼,自由自在,热闹非凡;“太守宴”,溪深鱼肥,泉香酒洌,美味佳肴,应有尽有;“众宾欢”,投壶下棋,觥筹交错,说说笑笑,无拘无束。如此勾画了游人之乐。4.作者为什么要在第三段写游人之乐?明确:写滁人之游,
是在此期间,欧阳修在滁州留下了不逊于《岳阳楼记》的千古名篇——《醉翁亭记》。接下来就让我们一起来学习这篇课文吧!【教学提示】结合前文教学,有利于学生把握本文写作背景,进而加深学生对作品含义的理解。二、教学新课目标导学一:认识作者,了解作品背景作者简介:欧阳修(1007—1072),字永叔,自号醉翁,晚年又号“六一居士”。吉州永丰(今属江
当的讲解引导。目标导学三:结合注释,翻译训练1.学生结合课下注释和工具书自行疏通文义,并画出不解之处。【教学提示】节奏划分与明确文意相辅相成,若能以节奏划分引导学生明确文意最好;若学生理解有限,亦可在解读文意后把握节奏划分。2.以四人小组为单位,组内互助解疑,并尝试用“直译”与“意译”两种方法译读文章。3.教师选择疑难句或值得 翻译的句子,请学生用两种翻译方法进行翻译。翻译示例:若夫日出而林霏开,云归而岩穴暝,晦明变化者,山间之朝暮也。野芳发而幽香,佳木秀而繁阴,风霜高洁,水落而石出者,山间之四时也。直译法:那太阳一出来,树林里的雾气散开,云雾聚拢,山谷就显得昏暗了,朝则自暗而明,暮则自明而暗,或暗或明,变化不一,这是山间早晚的景色。野花开放,有一
出“醉翁亭”的位置的,作者在此运用了怎样的艺术手法。
明确:首先以“环滁皆山也”五字领起,将滁州的地理环境一笔勾出,点出醉翁亭坐落在群山之中,并纵观滁州全貌,鸟瞰群山环抱之景。接着作者将“镜头”全景移向局部,先写“西南诸峰,林壑尤美”,醉翁亭坐落在有最美的林壑的西南诸峰之中,视野集中到最佳处。再写琅琊山“蔚然而深秀”,点山“秀”,照应上文的“美”。又写酿泉,其名字透出了泉与酒的 关系,好泉酿好酒,好酒叫人醉。“醉翁亭”的名字便暗中透出,然后引出“醉翁亭”来。作者利用空间变幻的手法,移步换景,由远及近,为我们描绘了一幅幅山水特写。2.第二段主要写了什么?它和第一段有什么联系?明确:第二段利用时间推移,抓住朝暮及四季特点,描绘了对比鲜明的晦明变化图及四季风光图,写出了其中的“乐亦无穷”。第二段是第一段
• 方法学评价 优点:操作简单;重复性强;安全; 缺点:CFSE可能干扰细胞增殖
二、T细胞分泌功能的检测
T细胞经各种丝裂原或特异性抗原刺激后, 分泌的各种细胞因子,可借助免疫学、细胞 生物学及分子生物学技术分别检测细胞因 子含量、生物学活性或基因表达水平,从 而间接反映T细胞功能。
1、生物活性检测
参知政事范仲淹等人遭谗离职,欧阳修上书替他们分辩,被贬到滁州做了两年知州。到任以后,他内心抑郁,但还能发挥“宽简而不扰”的作风,取得了某些政绩。《醉翁亭记》就是在这个时期写就的。目标导学二:朗读文章,通文顺字1.初读文章,结合工具书梳理文章字词。2.朗读文章,划分文章节奏,标出节奏划分有疑难的语句。节奏划分示例
抗原特异性精确; (3)ICS:可同时检测产生细胞因子的细胞表
型;需要样本量大于ELISPOT,破膜后的细 胞不能做进一步功能检测;
方法学评价
优点:简单,适用性广,应用特异的单克隆抗体, 可检测单一细胞因子的含量; 缺点:无法反应细胞因子的生物活性;不同单克 隆抗体检测的结果不同;敏感性稍差(100pg)
环滁/皆山也。其/西南诸峰,林壑/尤美,望之/蔚然而深秀者,琅琊也。山行/六七里,渐闻/水声潺潺,而泻出于/两峰之间者,酿泉也。峰回/路转,有亭/翼然临于泉上者,醉翁亭也。作亭者/谁?山之僧/曰/智仙也。名之者/谁?太守/自谓也。太守与客来饮/于此,饮少/辄醉,而/年又最高,故/自号曰/醉翁也。醉翁之意/不在酒,在乎/山水之间也。山水之乐,得之心/而
方法学评价 优点:反应体内杀伤效果; 缺点:影响因素多;
四、T细胞表面标志的检测
特异性T淋巴细胞活化需要第一信号和第二信号。 因此检测CTL表面特异性受体或相关的表面标志可 以反映CTL的活化状态。
1、Tetramer技术
模拟T细胞活化的第一信号,构建荧光标记的 MHC-肽复合物,被特异性T细胞识别。通过检测 标记的荧光,反应活化的特异性T细胞。
2、检测方法 (1)形态学检测
转化率
转化的淋巴细胞数
100%
转化和未转化的淋巴细 胞数
方法学评价
优点:形态学方法简便易行,普通光学显微镜便能 观察结果,适于基层实验室应用。 缺点:是依靠肉眼观察形态学变化,判断结果易受
主观因素影响,重复性和准确性较差。
(2)3H-TdR掺入法(MTT法) PHA 淋巴细胞(54h) 3HTdR掺入 (MTT被还原) 收集细胞,检测β射线(490nm吸光度)
谢谢
11 醉翁亭记
1.反复朗读并背诵课文,培养文言语感。
2.结合注释疏通文义,了解文本内容,掌握文本写作思路。
3.把握文章的艺术特色,理解虚词在文中的作用。
4.体会作者的思想感情,理解作者的政治理想。一、导入新课范仲淹因参与改革被贬,于庆历六年写下《岳阳楼记》,寄托自己“先天下之忧而忧,后天下之乐而乐”的政治理想。实际上,这次改革,受到贬谪的除了范仲淹和滕子京之外,还有范仲淹改革的另一位支持者——北宋大文学家、史学家欧阳修。他于庆历五年被贬谪到滁州,也就是今天的安徽省滁州市。也
描绘出一幅太平祥和的百姓游乐图。游乐场景映在太守的眼里,便多了一层政治清明的意味。太守在游人之乐中酒酣而醉,此醉是为山水之乐而醉,更是为能与百姓同乐而醉。体现太守与百姓关系融洽,“政通人和”才能有这样的乐。5.第四段主要写了什么?明确:写宴会散、众人归的情景。目标导学五:深入解读,把握作者思想感情思考探究:作者以一个“乐”字