QuEChERS-高效液相色谱法测定食品中4种氨基甲酸酯类农药残留

QuEChERS-高效液相色谱法测定食品中4种氨基甲酸酯类农药残留
连翠飞田景升$,郭孝辉-,牛瑜琦$,杨蕾C *
*收稿日期：2019-11-15
修回日期：2020-06-13
基金项目:河北省科技计划项目(16275503D)；石家庄市科学技术研究与发展计划项目(181490372A)作者简介:连翠飞(1981-),女,工程师，硕士，主要从事食品质量安全检测技术工作*通讯作者:杨 蕾(1980-),女,工程师，硕士，主要从事食品质量安全检测技术工作(1.河#女子职业技术学院，河-石家庄050000;2.河-科技大学生物科学与工程学院，河-石家庄050000;3.石家庄科技信息职业学院，河-石家庄050000)
摘要:结合QuEChERS 前处理方法,建立了采用高效液相色谱法(HPLC)测定食品中4种氨基甲酸酯类农药残留的方法。

以乙
C 作
为提取溶剂，水硫酸镁、PSA 和GCB 净化,Ci *柱为色谱分离柱，甲醇-水为流动相，检测波长范围190〜300nm 进行检测。

结果表明，
4种农药在6.5 min 内实现了基线分离,线性相关系数(R ^ !0.999 &检出限为2〜5 !g/kg ,样品加标平均回收率为82.5%〜99.3%，精密
度试验结果相对标准偏差(RSD)为1.64%〜3.30%。

该方法操作简单，灵敏度高，结果确可靠。

关键词:QuEChERS ；氨基甲酸酯类农药;残留；高效液相色谱
中图分类号：0656 文章编号-0254-5070 (2020)08-0206-04 doi:10.11882/j.issn.0254-5071.2020.08.039
引文格式:连翠飞，田景升,郭孝辉，等.QuEChERS -高效液相色谱法测定食品中4种氨基甲酸酯类农药残留［J ］.中国酿造,2020,39(8):
206-209.
Detennination of four kinds of carbamate pesticide residues in food by QuEChERS-HPLC
LIAN Cuifei 1, TIAN Jingsheng 2, GUO Xiaohui 1, NIU Yuqi 2, YANG Lei 3*
(".Hebei fOmen's Vocational College, Shijiazhuang 050000, China;
2.College of B iological Science and Engineering, Hebei University of S cience and Technology, Shijiazhuang 050000, China;
3Shijiazhuang Voc^^ion^l College of Technology and Information, Shijiazhuang 050000, China)
Abstract ： Combined with QuEChERS pretreatment methods, the method for the determination of four kinds of carbamate pesticide residues in food was
established by HPLC. Using acetonitrile as extractant, anhydrous magnesium sulfate, PSA and GCB as purification, C1* column as chromatographic sep ­
aration column, methanol-water as mobile phase, the carbamate pesticide residues were determined with detection wavelength range 190-300 nm. The
results showed that complete separation of the four kinds of carbamate pesticides was achieved within 6.5 min, the correlation coefficients R 2 were no
less than 0.999 8, the detection limits were 2-5 |xg/kg, the standard average recoveries of the spiked samples were between 82.5% and 99.3%, and the
relative standard deviation of precision fests were 1.64%-3.30%. The method was simple with high sensitivity, and the results were accurate and reliable.
Keywords ： QuEChERS; carbamate pesticides; residue; HPLC
氨基甲酸酯类农药具有广谱性、高效性。

由于具有杀 虫效果明显、残留期短、分解快、代谢迅速、能显著刺激作
物生长等特点，氨基甲酸酯类农药是农作物防治虫害的常 用农药叫但是由氨基甲酸酯类农药的杀虫机理可知，它
能够抑制昆虫进行神经传导乙酰胆碱酯酶的活性，所以它 同时又是一种抑制体内胆碱酯酶的神经毒素,具有潜在致 癌、致畸、致突的作用円X
，氨基甲酸酯类农药的
用
毒 经常生，所以 国家都
制定了其在食 残留 的限 ，
氨基甲酸酯类农药的残留 常
网。

常用的氨基甲酸酯类农药有
、
、
、 、甲
威等。

农药残留常用的
有 谱叫 谱-质谱［8］、高效 谱 网、高效 谱-质谱 w
体谱口等；常用的 理方法有 、
、
等。

传的 理
时
费力，而Q uEChERS (Quick , Easy , Cheap , Effective , Rugged ,
Safe
快速、 、
、有效、定、 的
方法［13-呵，
是 A NASTASSIADES ”等［17］于2003
明的一种用于农
农药残留分的 理 。

QuEChERS 具有 、 作 、 用
有机、分 快速等点。

本试验采用QuEChERS-高效液相色谱(high performance
liquid chromatography , HPLC) -
diode array detector ， DAD ， 用
DAD 的
可 长能，
定的4种氨基甲酸类农药
残留进行分。

旨在 食
氨基甲酸酯类农
药残留提供一种更快速、简便的检测方法和技术参考。

'材料与方法1.1材料与试剂
甲醇（色谱级）：天津市康科德科技有限公司:乙＜ （色 谱级）:天津市光复精细化工研究所:无水硫酸镁、氯化钠 （纯度三99%）:天津市永大化学试剂有限公司；灭多威标 准品（纯度三99%）、克百威标准品（纯度三98%）:北京金
宝在线科技有限公司：仲丁威（纯度三99.6%）、抗i 威（纯 度三99%）：湖南海利化工股份有限公司；N -丙基乙二胺吸
附剂（primary secondary amine , PSA ）和石墨化炭黑（graphi ­tized carbon black , GCB ）吸附剂：Agela Technologies 公司： 黄瓜、 和 ：市1.2仪器与设备
Waters 1525-2988 色谱： 科技有
限公司:SK5200LHC 超声波清洗器:上海科 超声器有 限公司:LD-52A 低
:北京
有限公司：
PHS-3C 型pH 计:上海精 器有限公司:Millipore Synergy_
超纯水机： Millipore 公司。

1.3方法
1.3.1样品处理方法10.000 g 果蔬样品（市售），磨碎或切碎，加入
0.0350.0300.0250.020 £ 0.015
0.0100.005-0.005
a 1.812
提取的
2.2流动相的选择
试 以甲醇-水作为流动相，考察
同比例 甲醇
水（体积比 70：30、75 ：25、80：20）对4氨基甲酸酯
类农药保留 影响。

如图2a 所示，
当甲醇与
水体积比70：3 0时,4种氨基甲酸酯类农药的保留时间会
5.000 g 无水硫酸镁（彳
） 多 水分，用20 mL
乙＜ , （
.）,
30 mL ,
混匀后5 000 r/min 离心5 min ,取5 mL 上清液加入1 g 无水
硫酸镁、0.5 g PSA 0.2 g GCB 化， 5 000 r/min
5 min , 1 mL 0.45 !m
,超声
[20]o
1.3.2色谱条件
色谱柱promosil® G& （5 ^m , 4.6 mm x 250 mm ）:流动相：
甲醇-水 （75：25, TT ,
: 1 mL/min ；进样量：20 ^L ；
：25 "；
波长范围：190〜300 nm 。

1.3.3标准储备液的配制
准 抗i 威、仲丁威、灭多威克百威150 mg ,
醇
100 mL ，储
2结果与分析
2.1检测波长的选择
谱 ，克百威、灭多威、抗i 威和
仲丁威的最大吸收波长分别为198 nm 、234 nm 、260 nm 和
270 nm
试 二 器，
度，二
器，
4种目标 大吸收波长，
波 在190〜
200.00 230.00 260.00 290.00 320.00 350.00 380.00
波长/nm
a.克百威;b 克百威;c.仲丁威;d.抗芽威。

图（4种氨基甲酸酯类农药扫描图
Fig. 1 Scintigram of four kinds of carbamate pesticides
300 nm
偏：如图2b 所示，当甲醇与水 比例75：25时,4氨基
甲酸酯类农药出峰比较快，而且
好;如图2c 所示,
当甲醇与水体积比80：20时，则4氨基甲酸酯类农药， 灭多威克百威能完全 所以试选择体积比为 75：25 甲醇-水
1为灭多威;2为克百威；3为抗i 威;4为仲丁威。

a.甲醇70%,
b.甲醇75%,
c.甲醇80%。

图2 4种氨基甲酸酯类农药混合标液色谱图
Fig. 2 Chromatogram of four carbamate pesticides mixed standard
solution
2.3流速的选择
试验考察了流速对被测物保留行为的影响,分别考察了流速为0.5mL/min、0.8mL/min、1mL/min和1.2mL/min时四类农药的分离情况。

当流速为0.5mL/min和0.8mL/min 时,被测物出峰时间较长，峰形较宽；当流速为1.2mL/min 时，尽管分析时间大大缩短，但这时柱压较高，分离效果欠佳，而当流速为1mL/min时,被测物出峰时间较短，分离效果好。

故最佳流速为1mL/min_
2.4线性关系和检出限
将4种氨基甲酸酯类农药分别配制成质量浓度为1〜200!g/kg的一系列不同浓度的标准溶液，在1.3的色谱条件下进行测定。

以物质的质量浓度为标，被测分的峰0为标，X和关系数，并计算检出限，果如1_
表+4种氨基甲酸酯线性关系及检出限
Table1Lin e ar relati o n s hips and detectio n limits of four kinds of carbamate
项目线性方程
关
系数R)
/
（!g・kg-1）
检岀限/
(!g・kg-1)仲丁威Y=2.13x107x+1.52X1050.999952005
抗妍威Y=2.91x107x+6.92X1050.999921002
克百威Y=2.15x107x+6.64X1050.999821002
灭多威Y=1.54x107x+7.85X1050.999852005由表1可知，克百威和抗虫牙威的线性范围为2〜100!g/kg，仲丁威和的为5-200!g/kg，关系数(6)!0.9998。

该方法的检出限在2〜5!g/kg。

由于有效了二极管列检测DAD)的，关[18-19]比较，对被分析物质检测的灵敏度明显提高。

2.5回收率试验
表2加标回收率试验结果
Table2Results of standard recovery tests
农药本底值基质量/（!g・kg-1）检测/（!g・kg-1）/%RSD/%未检岀黄瓜10,20,508.97,18.5,47.689.7，92.7，95.3 1.95，2.18，2.94仲丁威未检岀苹果10,20,508.52,17.3,44.985.2，92.7，89.7 2.99，2.08，1.95未检岀小米10,20,508.25，17.7，46.382.5，88.5，96.0 2.49，2.99，3.27
未检岀黄瓜10,20,509.23，19.9，48.892.3，99.3，97.6 2.70，2.52，2.16抗蜗威未检岀果10,20,509.55，18.7，45.895.5，93.7，91.5 2.82，2.69，2.36未检岀小米10,20,509.80，19.2，45.298.0，96.3，90.4 1.85，2.56，2.98
未检岀黄瓜10,20,508.45，17.2，44.284.5，85.8，88.5 2.50，2.43，2.05克百威未检岀果10,20,508.77，17.3，44.287.7，86.7，88.4 3.30，2.73，2.07未检岀小米10,20,508.28，17.0，44.682.8，85.2，89.3 3.05，2.65，2.12
未检岀黄瓜10,20,508.57，17.8，46.2
85.7，89.2，92.4 1.63，2.33，2.86灭多威未检岀果10,20,508.47，17.3，44.2
84.7，86.3，88.4 2.39，2.34，2.18
检岀小米10,20,508.50，17.6，45.2
85.0，88.2，90.3 2.25，1.64，1.72
向空白黄瓜、苹果、小米样品基质中分别添加10!g/kg、20!g/kg、50!g/kg的3个浓度的农药标品，每个浓度
3。

基质标准量，进行验，果2。

2，以为基质的试验果
在84.5%〜99.3%之间，以果基质的试验果
在84.7%〜95.5%之间，以基质的试验果
在82.5%〜98.0%之间，说明方法的回收率良好。

黄瓜基质、果基质、小米基质的果标准relative standard deviation，RS功分别为1.63%〜2.94%、1.95%〜3.30%、
1.64%〜3.27%，表明该方法可行。

2.6精密度试验
这四种农药的、果、
品,分别按10!g/kg和20!g/kg2个浓度的水平添加，每个水平检测6次，的度结果见表3〜表5。

由表3可知，黄瓜基质的相对标准偏差(RSD)在1.68%〜3.15%之间(n=6)，由表4可知，苹果基质的相对标准偏差(RSD)在1.64%〜3.30%之间(n=6)，由表5可知，小米基质的相对标准偏差(RS功在1.91%〜3.07%之间(n=6)。

在3种基质中测定的验结果标准偏差均＜5%，的度好。

表3以黄瓜为基质的精密度试验结果
Table3Precision test results using cucumber as substrate
农药
标量/检测/（!g・kg-1）RSD/（!g・kg-1）123456平均值%未检岀108.568.948.618.298.458.408.54 2.70仲丁威
未检岀2017.217.817.418.618.117.817.8 2.80
未检岀109.198.958.869.039.148.819.00 1.68抗妍威
未检岀2019.620.518.920.319.219.919.7 3.15
未检岀108.498.158.538.388.568.778.48 2.43克百威
未检岀2017.217.618.517.917.418.317.8 2.87
未检岀108.538.478.298.748.588.428.51 1.79灭多威
检岀2017.518.917.818.217.618.518.1 3.04
表4以苹果为基质的精密度试验结果
Table4Precision test results using apple as substrate
农药
标量/测值/(!g・kg-1)RSD/ (!g・kg-1)123456值%未检岀108.068.198.458.138.298.368.25 1.78
仲丁威
未检岀2017.717.518.218.417.417.117.7 2.80
未检岀109.629.959.899.6810.049.799.83 1.64抗V威
未岀2018.418.717.519.217.918.118.3 3.30
未岀108.378.628.448.758.518.678.56 1.69克百威
未岀2017.217.918.117.618.517.417.8 2.69
未岀108.638.868.798.718.578.988.76 1.73灭多威
未岀2017.617.316.516.917.217.917.2 2.88
表5以小米为基质的精密度试验结果
Table5Precision test results using millet as substrate
农药OP值标量/测值/(!g・kg-1)RSD/
(!g・kg-1)123456值%未岀108.258.478.638.398.688.958.56 2.88仲丁威
未岀2018.317.917.318.518.118.318.1 2.37
未岀109.258.969.049.378.929.139.11 1.91抗V威
未岀2019.218.719.518.918.519.419.0 2.09
未岀108.578.968.619.048.858.728.79 2.16克百威
未岀2016.917.217.217.516.517.117.1 1.98
未岀108.648.968.358.998.748.428.68 3.07灭多威
未岀2017.618.118.517.918.118.918.2 2.52 2.6样品测定
样品按照131中样品处理方法处理，在132色谱条件下进行测定。

结果表明,在黄瓜、苹果和小米中未检出此4种农药。

3结论
该研究建立了同时测定4种氨基甲酸脂类农药的高效液相色谱-二极管阵列检测方法。

依据保留时间定性,外标法定量。

通过对该方法的回收率、精密度等方法学技术指标的研究,表明该方法具的精密度性，样品加标平均回收率在82.5%〜99.3%之间，精密度试验结果RSD在1.64%〜3.30%之间。

且方法的前处理,为定性定量分析样品中氨基甲酸脂类农药残留提供一种
有效的检测方法。

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