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动物细胞融合资料
动物细胞融合也称细胞杂交(cell hybridization),是指在一定的条件下将两个或多个动物细胞融合为一个细胞的过程,融合后形成的具有原来两个或多个细胞遗传信息的单核细胞,称为杂交细胞(hybrid cell)
1957年,日本学者冈田善雄在培养动物细胞时加入失去活性的仙台病毒,发现能使两个动物细胞融合,产生具有两个核的细胞。
研究表明,很多不同种的动物细胞都能进行融合,形成杂交细胞。
如人-猴、人-鼠、人-兔、人-鸡、人-蛙、鼠-鸡、鼠-兔、鼠-猴等等。
细胞融合的具体步骤包括:
(1)细胞准备,分贴壁和悬浮细胞两种。
前者可直接将两亲本细胞混合培养,后者需制成一定浓度的细胞悬浮液。
(2)细胞融合,加促融因子于将行融合的细胞之中,诱导融合。
(3)杂种细胞选择。
利用选择性培养基等,使亲本细胞死亡,而让杂种细胞存活。
(4)杂种细胞克隆。
对选出的杂种细胞进行克隆(选择与纯化),经过培养,就能获得所需要的无性繁殖系。
19世纪30年代,科学家们相继在肺结核、天花、水痘、麻疹等疾病患者的病理组织中观察到多核细胞。
19世纪70年代,科学家们在蛙的血细胞中也看到了多核细胞的现象,但是由于受当时科学技术发展水平的限制,人们对这一现象并没有给予足够的重视;1958年,日本科学家岗田用灭活的仙台病毒诱导人的腹水癌细胞融合成功。
后来科学家们又成功地诱导了不同种动物的体细胞融合,并且能将杂种细胞培养成活。
随着细胞融合技术的不断改进,21世纪以来这项技术已经广泛应用于细胞学、遗传学、免疫学、病毒学等多种学科的研究工作中。
通过培养和诱导,两个或多个细胞合并成一个双核或多核细胞的过程称为细胞融合(cell fusion)或细胞杂交(cell hybridization)。
基因型相同的细胞融合成的杂交细胞称为同核体(homokaryon);来自不同基因型的杂交细胞则称为异核体(heterokaryon)。
同种细胞在培养时2个靠在一起的细胞自发合并,称自发融合;异种间的细胞必须经诱导剂处理才能融合,称诱发融合。
动物细胞融合突破了有性杂交方法的局限,克服了远缘杂交的不亲和性,使远缘杂交成为可能,为制造单克隆抗体提供了条件。
成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物新品种培育的重要手段。