骨髓间充质干细胞调节心脏移植大鼠的免疫功能模板

中国组织工程研究 第20卷 第50期 2016–12–02出版
Chinese Journal of Tissue Engineering Research December 2, 2016 Vol.20, No.50
·研究原著·
www.CRTER .org
赵敏，女，1983年生，河南省郑州市人，汉族，硕士，讲师，主要从事微生物免疫学方面的研究。

中图分类号:R394.2 文献标识码:B 文章编号:2095-4344 (2016)50-07494-06 稿件接受：2016-10-31
骨髓间充质干细胞调节心脏移植大鼠的免疫功能
赵 敏，李秀芬(郑州澍青医学高等专科学校基础医学部，河南省郑州市 450000)
引用本文：赵敏，李秀芬. 骨髓间充质干细胞调节心脏移植大鼠的免疫功能[J].中国组织工程研究，2016，20(50):7494-7499. DOI: 10.3969/j.issn.2095-4344.2016.50.007 ORCID: 0000-0003-0075-9845(赵敏)
文章快速阅读：
文题释义：
白细胞介素10：是一种多细胞源、多功能的细胞因子，调节细胞的生长与分化，参与炎性反应和免疫反应，是目前公认的炎症与免疫抑制因子。

白细胞介素10来源于Th2和部分调节性T 细胞，能抑制Th1细胞应答，抑制巨噬细胞的抗原提呈功能及合成细胞因子，促进B 细胞增殖、分化及抗体产生。

Foxp3：是控制Treg 细胞发育和功能的关键转录因子之一，它的发现是Treg 免疫生物学重要的进步。

虽然人们也发现Treg 发育和功能也需要其他转录因子如AhR 和STAT5的参与，但是Foxp3仍旧是Treg 细胞系的主要调节因子。

实验表明，在体外或体内诱导初始T 细胞表达Foxp3后可以出现Treg 样的免疫抑制作用，可见Foxp3是控制免疫抑制分子表达的关键因素。

摘要
背景：心脏移植是治疗终末期心力衰竭等疾病的有效手段，但移植后容易出现免疫排斥反应，严重影响到移植效果。

目的：探讨骨髓间充质干细胞对心脏移植大鼠免疫功能的调节作用。

方法：Lewis 大鼠20只作为供体，Wistar 大鼠20只作为受体，采用套管法建立大鼠颈部心脏移植模型。

模型制备后，20只Wistar 大鼠随机分为细胞移植组与空白对照组，每组10只。

心脏移植后48 h ，细胞移
植组经尾静脉注射骨髓间充质干细胞悬液1 mL(细胞浓度为2×108 L -1
)，空白对照组经尾静脉注射等量的生理盐水注射液。

细胞移植后7 d ，ELISA 法检测血清白细胞介素2、白细胞介素10水平，流式细胞术检
测大鼠静脉血中CD4+、CD8+、CD4+/CD8+、CD4+CD25high 、CD4+CD25high Foxp3+
T 细胞百分含量，获取心肌组织进行病理学观察。

结果与结论：①细胞移植组心脏存活时间显著长于空白对照组(P < 0.05)；②两组血清白细胞介素2水平差异无显著性意义(P > 0.05)，细胞移植组血清白细胞介素10水平显著高于空白对照组(P < 0.05)；③细
胞移植组CD4+、CD4+/CD8+、CD4+CD25high 、CD4+CD25high Foxp3+
T 细胞占总淋巴细胞的比例均显著高于空白对照组(P < 0.05)，CD8+
T 细胞占总淋巴细胞的比例显著低于空白对照组(P < 0.05)；④细胞移植组心肌组织中有少量淋巴细胞浸润，心肌间质可观察到轻微出血和水肿，较空白对照组炎性反应程度较轻；⑤结果表明，对心脏移植大鼠实施骨髓间充质干细胞治疗可以有效减轻排斥反应。

关键词：
干细胞；骨髓间充质干细胞；心脏移植；器官移植；免疫功能；动物实验
主题词：
心脏移植；骨髓；间质干细胞移植；免疫调节；组织工程
Zhao Min, Master, Lecturer, School of Basic Medicine, Shuqing Medical College, Zhengzhou 450000, Henan Province, China
Immune function regulation by bone marrow mesenchymal stem cells in rats undergoing heart transplantation
Zhao Min, Li Xiu-fen (School of Basic Medicine, Shuqing Medical College, Zhengzhou 450000, Henan Province, China)
Abstract
BACKGROUND: Heart transplantation is an effective method for treatment of end-stage heart failure, but immune rejection that seriously impact therapeutic effacicy is easy to occur after transplantation.
OBJECTIVE: To investigate the regulatory effect of bone marrow mesenchymal stem cells on the immune function of rats undergoiong heart transplantation.
METHODS: Twenty Lewis rats were enrolled as donors, and 20 Wistar rats as recipients. Heart
transplantation models were established in the Wistar rats. These 20 model rats were randomized into cell transplantation and control group with 10 rats in each group. Forty-eight hours after heart transplantation, rats in the cell transplantation group were given bone marrow mesenchymal stem cell suspension
(1 mL, 2×108 cells/L) via the tail vein, while rats in the control group were given normal saline in the same dose. Then, the expression levels of serum interleukin-2, interleukin-10 and percentage of CD4+, CD8+, CD4+/CD8+, CD4+CD25high , CD4+CD25high Foxp3+ T cells in the venous blood were detected in the two groups at 7 days after cell transplantation. Additionally, rat myocardial tissues were taken and observed pathologically.
RESULTS AND CONCLUSION: The survival time of the cell transplantation group was significantly longer than that of the control group (P < 0.05). The expression level of interleukin-2 showed no significant difference between the two groups (P > 0.05), but the level of interleukin-10 in the cell transplantation group was significantly higher than that in the control group (P < 0.05). Compared with the control group, the percentage of CD4+/CD8+, CD4+CD25high , CD4+CD25high Foxp3+ and CD4+ T cells was significantly higher, and the percentage of CD8+ T cells was significantly lower in the cell transplantation group (P < 0.05). Histopathological findings showed that there were a small amount of infiltrated lymphocytes in the cell transplantation group with the presence of slight bleeding and edema, and these inflammatory reactions were milder than those in the control group. These findings indicate that bone marrow mesenchymal stem cell transplantation can effectively reduce the rejection in rats undergoing heart transplantation.
Subject headings: Heart Transplantation; Bone Marrow; Mesenchymal Stem Cell Transplantation; Immunomodulation; Tissue Engineering
Cite this article: Zhao M, Li XF. Immune function regulation by bone marrow mesenchymal stem cells in rats undergoing heart transplantation. Zhongguo Zuzhi Gongcheng Yanjiu. 2016;20(50):7494-7499.
0 引言 Introduction
心脏移植是临床治疗各种心脏病终末期患者的有效方法[1]。

为避免出现免疫排斥现象，心脏移植后需要长期服用各种免疫抑制药物，容易发生高血压等药物相关并发症
[2-4]。

为此，需要采取有效的措施来调节移植后
的免疫功能，以获得更好的移植效果。

骨髓间充质干细胞具有一定的免疫调控作用，通过骨髓间充质干细胞移植方式，提高心脏移植后机体免疫耐受程度，具有十分重要的临床意义[5-6]。

实验即探讨骨髓间充质干细胞对心
脏移植大鼠免疫功能的调节情况。

1 材料和方法 Materials and methods
1.1 设计 随机对照动物实验。

1.2 时间及地点 实验于2016年3至6月在郑州澍青医学高等专科学校基础医学部实验室完成。

1.3 材料
1.3.1 实验动物 ①心脏移植供体：健康雄性Lewis 大鼠20只，体质量250 g 左右，8周龄，由北京维通利华实验动物有限公司提供，许可证号SCXK(京)2002-0003；②心脏移植受体：健康雄性Wistar 大鼠20只，体质量240 g 左右，8周龄，由上海斯莱克实验动物有限公司提供，许可证号：SCXK(沪)2003-0003；③骨髓间充质干细胞供体：健康雄性Wistar 大鼠10只，体质量240 g 左右，8周龄，由上海斯莱克实验动物有限公司提供，许可证号：SCXK(沪)2003-0003。

所有动物饲养于郑州澍青医学高等专科学校实验动物中心SPF 环境中，常规喂养。

研究相关方案均提交医学伦理部门审核，符合相关伦理学要求。

1.3.2 主要试剂与仪器 速眠新注射液(上海育播宠物用品有限公司)；DMEM 培养基(Gibco 公司)；胎牛血清(上
海博升生物科技有限公司)；抗大鼠CD4、CD8、CD25、Foxp3单克隆抗体(武汉博士德生物工程有限公司)；大鼠白细胞介素2、白细胞介素10 ELISA试剂盒(上海弘顺生物科技有限公司)；光学显微镜(上海哈灵生物科技有限公司)；石蜡切片机(北京科誉兴业科技发展有限公司)。

1.4 实验方法
1.4.1 骨髓间充质干细胞的体外分离、培养取Wistar 大鼠10只，无菌分离股骨和胫骨，剪断骨干骺端，暴露骨髓腔，用含体积分数为15%胎牛血清的DMEM培养液反复冲洗骨髓腔，收集骨髓冲洗液并反复抽吸吹打，获得单细胞悬液。

用注射器接4.5号针头回收细胞悬液于10 mL离心管中，离心后去上清，将沉淀用体积分数为15%胎牛血清的DMEM培养液重新悬浮，加入密度为1.085 g/mL的Percoll淋巴细胞分离液，2 000 r/min离心20 min，吸取中间的乳白色细胞层，用含体积分数为15%胎牛血清的DMEM培养液重悬，接种于25 cm2塑料培养瓶中，置于37 ℃，体积分数为5%CO2饱和湿度培养箱中培养，3 d后第1次换液，以后每周换液2次，倒置显微镜下观察细胞约80%融合时传代培养，收集第4-6代细胞备用。

1.4.2 实验方案Lewis大鼠20只作为供体，Wistar大鼠20只作为受体，参照文献[7-10]，采用套管法建立大鼠颈部心脏移植模型。

供受体动物肌肉注射速眠新注射液麻醉，注射剂量2 mg/kg。

动物保持仰卧位，四肢固定保持伸展状态。

受体颈部及供体胸腹部剃毛，体积分数为75%乙醇消毒后切取供体心脏，于10倍镜下用10-0无损伤血管缝线将供心主动脉与受体右颈总动脉行端侧吻合，用9-0无损伤血管缝线将供心主肺动脉与受体右颈外静脉行端端吻合，移植心脏位于右侧颈部皮下，每日观察大鼠心跳、精神状态，如果移植心跳动48 h 以上，即可视为模型建立成功。

1.4.3 实验分组及干预[11-12]颈部心脏移植模型制备完毕后，20只Wistar大鼠随机分为细胞移植组与空白对照组，每组10只。

术后48 h，两组动物肌肉注射速眠新麻醉，细胞移植组经尾静脉注射骨髓间充质干细胞悬液，每只1 mL，细胞浓度为2×108 L-1，空白对照组经尾静脉注射等量的生理盐水注射液，无其他特殊干预。

1.4.4 ELISA法检测白细胞介素2、白细胞介素10水平[13-15]移植后7 d，麻醉状态下尾静脉取血，分离血清，利用双抗体夹心ELISA法检测白细胞介素2、白细胞介素10水平，严格按照说明书进行操作。

重复检测3次，取平均值。

1.4.5 流式细胞术检测大鼠血液中CD4+、CD8+、CD4+/ CD8+、CD4+CD25high、CD4+CD25high Foxp3+ T细胞百分含量移植后7 d，麻醉状态下抽取下腔静脉血1 mL 置于EDTA抗凝管中，采用流式细胞术检测大鼠血液中CD4+、CD8+、CD4+CD25high、CD4+CD25high Foxp3+ T 细胞百分含量，计算CD4+/CD8+比值。

1.4.6 病理学观察移植后7 d，两组各取5只大鼠，麻醉处死后获得心脏标本进行病理学观察，剩余大鼠继续观察存活天数。

每日观察大鼠精神状态，按时触诊移植心脏，观察移植物搏动幅度、节律及速度，停跳者移植物存活时间视为到停跳的前一天。

1.5 主要观察指标①心脏的存活时间；②白细胞介素2、白细胞介素10水平；③T细胞占总淋巴细胞的比例；
④病理学观察结果。

1.6 统计学分析实验数据利用SPSS 18.0软件处理，计量资料行单因素方差分析，P < 0.05为差异有显著性意义。

2结果Results
2.1 实验动物数量分析20只Wistar大鼠进入最终的结果分析。

2.2 两组移植心脏的存活时间细胞移植组心脏存活时间为(14.25±2.15) d，空白对照组心脏存活时间为(7.15±1.35) d，细胞移植组显著长于空白对照组(P< 0.05)。

2.3 两组大鼠血清白细胞介素2、白细胞介素10水平两组血清白细胞介素2水平差异无显著性意义(P> 0.05)。

细胞移植组血清白细胞介素10水平显著高于空白对照组(P < 0.05)，见表1，图1。

2.4 两组静脉血中T细胞占总淋巴细胞的比例移植后7 d，细胞移植组CD4+、CD4+/CD8+、CD4+ CD25high、CD4+CD25high Foxp3+ T细胞占总淋巴细胞的比例均显著高于空白对照组(P < 0.05)，CD8+ T细胞占总淋巴细胞的比例显著低于空白对照组(P < 0.05)，见表2。

2.5 两组心肌组织病理学观察结果移植后7 d，空白对照组心肌组织有淋巴细胞以及单核细胞大量浸润现象，有末梢小血管内血栓形成这一超急性排斥反应的特征病变，存在明显的心肌间质水肿、出血，存在不同程度的心肌黏液性坏死和心肌细胞变性坏死；细胞移植组心肌组织中存在少量的淋巴细胞浸润，出现灶性心肌细胞损害，心肌间质可观察到轻微出血和水肿，较空白对照组炎性反应程度较轻(图2)。

3 讨论 Discussion
心脏移植是治疗终末期脏器功能衰竭唯一有效的治疗手段，移植后会出现不同程度的免疫排斥现 象
[16-18]。

临床可通过服用各种免疫抑制药物来抑制免疫排斥，但容易导致各种并发症的出现，不利于提高预后效果
[19-22]。

间充质干细胞具有多向分化的能力，并具有很强的免疫调节作用
[23-25]。

间充质干细胞进入机体之后，可以
结合不同的环境特点来发挥调节作用，对机体产生不同的免疫反应。

间充质干细胞可以发挥出诱导免疫耐受作用，有效抑制移植物抗宿主病的出现，从而提高器官移植成功率，改善预后
[26-30]。

王海涛
[31]
对同种异体心脏移植大鼠进行骨髓间充质干细胞移植治疗，观察发现细胞移植可以有效减轻心脏的免疫排斥反应，促进移植心脏存活时间的延长，其机制可能与骨髓间充质干细胞调节T 细胞转化进而发挥免疫抑制作用有关。

实验制备心脏移植动物模型，观察尾静脉注射受体同系骨髓间充质干细胞对大鼠心脏移植免疫反应的影响。

器官移植后急性排斥反应的发生主要与T 淋巴细胞相关，是T 细胞介导的免疫损伤导致迟发型变态反应，病理学特征表现为以单个核细胞浸润和细胞变性、坏死为特征的局部超敏反应性炎症。

研究表明，CD4+
CD25
+
Foxp3+
调节性T 细胞可特异性下调大鼠T 细胞对异体大鼠抗原刺激的反应性。

所以，Foxp3是目前公认的
CD4+
CD25+
Treg 细胞的特异性表面标志
[32]。

实验结果显示两组血清白细胞介素2水平差异无显著性意义(P > 0.05)，细胞移植组血清白细胞介素10水平显著高于空白对照组(P < 0.05)。

白细胞介素2属于促炎因子，白细胞介素10 属于抗炎因子，骨髓间充质干细胞移植治疗可以有效提高大鼠白细胞介素10水平，说明骨髓间充质干细胞可以发挥出很好的抗炎作用，产生免疫抑制和诱导免疫耐受，提高移植的耐受程度
[33-37]。

通
过实验还发现，细胞移植组CD4+
、CD4+
/CD8+
、CD4+
CD25
high
、CD4+CD25
high
Foxp3+
T 细胞占总淋巴细胞
的比例均显著高于空白对照组(P < 0.05)，CD8+
T 细胞占总淋巴细胞的比例显著低于空白对照组(P < 0.05)，说明骨髓间充质干细胞移植治疗后，免疫平衡发生了变化，逐渐向免疫抑制方向偏移，进而有效降低急性排斥反应程度，促进移植物的存活
[38-40]。

实验中，细胞移植
组心脏存活时间显著长于空白对照组，提示骨髓间充质干细胞移植治疗发挥出很好的促进移植物存活的效果。

病理学观察也发现，细胞移植组心肌组织中存在少量的淋巴细胞浸润，心肌间质可观察到轻微出血和水肿，较空白对照组炎性反应程度较轻，提示对心脏移植大鼠实
表1 移植后7 d 两组大鼠血清白细胞介素2、白细胞介素
10
水平 (x _
±s ，n =10，ng/L) Table 1 The expression levels of serum interleukin-2 and interleukin-10 in the two groups 7 days after cell transplantation
表注：与空白对照组比较，a P < 0.05。

组别
白细胞介素2 白细胞介素10 细胞移植组 空白对照组
248.15±25.23 230.25±20.35
160.23±18.75a 80.25±12.26
图1 两组大鼠血清白细胞介素2、白细胞介素10水平 Figure 1 The expression levels of serum interleukin-2 and interleukin-10 in the two groups
细胞因子水平(n g /L )
白细胞介素2 白细胞介素10
表2 移植后7 d 两组静脉血中T 细胞在淋巴细胞中所占比
例 (x _
±s ，n =10，%) Table 2 Proportion of T cells accounting for lymphocytes in the venous blood at 7 days after cell transplantation
表注：与空白对照组比较，a
P < 0.05。

指标
细胞移植组 空白对照组 CD4+
48.85±5.12a 30.23±2.75 CD8+
40.59±3.85a
60.23±2.89 CD4+/CD8+
1.15±0.08a
0.50±0.06 CD4+CD25high
2.58±0.55a 0.95±0.15 CD4+CD25high Foxp3+ 2.10±0.65a
0.85±0.05
图2 两组心肌组织病理学观察结果(苏木精-伊红染色，×200) Figure 2 Pathological changes of the myocardial tissues in the two groups (hematoxylin-eosin staining, ×200)
图注：图中A 为细胞移植组，B 为空白对照组。

细胞移植组较空白对照组炎性反应程度较轻。

A
B
施骨髓间充质干细胞治疗可以有效减轻排斥反应。

综上所述，骨髓间充质干细胞移植可以发挥出良好的免疫调节作用，关于其在临床器官移植后免疫调节方面的应用，值得在今后予以进一步分析。

作者贡献：实验设计、实施、评估为全部作者。

利益冲突：所有作者共同认可文章无相关利益冲突。

伦理问题：实验过程中对动物的处置符合2009 年《Ethical issues in animal experimentation 》相关动物伦理学标准的条例。

文章查重：文章出版前已经过CNKI 反剽窃文献检测系统进行3次查重。

文章外审：文章经国内小同行外审专家双盲外审，符合本刊发稿宗旨。

作者声明：第一作者对研究和撰写的论文中出现的不端行为承担责任。

论文中涉及的原始图片、数据(包括计算机数据库)记录及样本已按照有关规定保存、分享和销毁，可接受核查。

文章版权：文章出版前杂志已与全体作者授权人签署了版权相关协议。

4 参考文献 References
[1] 沈兴,余更生,田杰,等.兔骨髓间充质干细胞心脏移植治疗
扩张型心肌病的实验研究[J].第三军医大学学报,2008, 30(12):1159-1162.
[2] 赵桂峰,范英昌,姜希娟,等.丹酚酸B 对内皮祖细胞与骨髓
间充质干细胞联合心脏移植后增殖状况的影响[J].中国中西医结合杂志,2012,32(5):671-675.
[3] 刘德忠,刘奎利,金建刚,等.受者同系骨髓间充质干细胞对
大鼠心脏移植急性排斥反应的影响[J].中华老年多器官疾病杂志,2011,10(6):536-540.
[4] Barrett AJ, Savani BN. Stem cell transplantation with
reduced-intensity conditioning regimens: a review of ten years experience with new transplant concepts and new therapeutic agents. Leukemia. 2006;20(10):1661-1672. [5] Rezvani K, Yong AS, Mielke S, et al. Lymphodepletion
is permissive to the development of spontaneous T-cell responses to the self-antigen PR1 early after
allogeneic stem cell transplantation and in patients with acute myeloid leukemia undergoing WT1 peptide vaccination following chemotherapy. Cancer Immunol Immunother. 2012;61(7):1125-1136.
[6] 章传凯.骨髓间充质干细胞联合IL-6单克隆抗体诱导心脏
移植免疫耐受的研究[D].苏州:苏州大学,2012.
[7] 刘德忠,刘奎利,金建刚,等.套管法建立同系与异系大鼠颈
部心移植模型的比较[J].解剖学杂志,2010,33(1):107- 110. [8] 魏长江.骨髓间充质干细胞外周中枢联合预处理诱导异
种心脏移植免疫耐受的研究[D].苏州:苏州大学,2009. [9] 刘奎利,刘德忠,金建刚,等.异体脐带间充质干细胞对大鼠
心脏移植的免疫调节[J].中国组织工程研究与临床康复, 2010,14(6):1048-1052.
[10] Loh Y , Oyama Y , Statkute L, et al. Autologous
hematopoietic stem cell transplantation in systemic lupus erythematosus patients with cardiac dysfunction: feasibility and reversibility of ventricular and valvular dysfunction with transplant-induced remission. Bone Marrow Transplant. 2007;40(1):47-53.
[11] Nakane T, Nakamae H, Koh H, et al. Heart rate
variability during and after peripheral blood stem cell leukapheresis in autologous transplant patients and allogeneic transplant donors. Int J Hematol. 2010;91(3): 478-484.
[12] Yerebakan C, Kaminski A, Westphal B, et al. Impact of
preoperative left ventricular function and time from infarction on the long-term benefits after
intramyocardial CD133(+) bone marrow stem cell transplant. J Thorac Cardiovasc Surg. 2011;142(6): 1530-1539.
[13] 朱震,沈振亚,陈海军,等.MSCs 修饰受体胸腺对异种心脏
移植免疫排斥反应的作用研究[J].中国医药科学,2012, 2(21):35-38.
[14] Ruf S, Behnke-Hall K, Gruhn B, et al. Comparison of
six different specimen types for Epstein-Barr viral load quantification in peripheral blood of pediatric patients after heart transplantation or after allogeneic hematopoietic stem cell transplantation. J Clin Virol. 2012;53(3):186-194.
[15] Nakane T, Nakamae H, Muro T, et al. Cardiac and
autonomic nerve function after reduced-intensity stem cell transplantation for hematologic malignancy in patients with pre-transplant cardiac dysfunction. Ann Hematol. 2009;88(9):871-879.
[16] 刘德忠,石炳毅,刘奎利,等.受者同系骨髓间充质干细胞对
心脏移植大鼠的免疫调节作用[J].解放军医学杂志,2012, 37(3):185-189.
[17] 刘俊东,唐滔,吴晓明,等.SHH 转染骨髓间充质干细胞心
肌移植后成活与分化[J].中国医师杂志,2014,16(2):203- 206,210.
[18] Paul A, Chen G, Khan A, et al. Genipin-cross-linked
microencapsulated human adipose stem cells augment transplant retention resulting in attenuation of chronically infarcted rat heart fibrosis and cardiac dysfunction. Cell Transplant. 2012;21(12):2735-2751. [19] Melenhorst JJ, Tian X, Xu D, et al. Cytopenia and
leukocyte recovery shape cytokine fluctuations after myeloablative allogeneic hematopoietic stem cell transplantation. Haematologica. 2012;97(6):867-873.
[20] Jimenez-Zepeda VH, Franke N, Reece DE, et al.
Autologous stem cell transplant is an effective therapy for carefully selected patients with AL amyloidosis: experience of a single institution. Br J Haematol. 2014; 164(5):722-728.
[21] 张长海.雷公藤甲素对HCN4基因修饰大鼠MSCs 同种异
体心脏移植后细胞存活影响的研究[D].重庆:第三军医大学,2013.
[22] Majhail NS, Ness KK, Burns LJ, et al. Late effects in
survivors of Hodgkin and non-Hodgkin lymphoma treated with autologous hematopoietic cell transplantation: a report from the bone marrow transplant survivor study. Biol Blood Marrow Transplant. 2007;13(10):1153-1159.
[23] 余鹏程.供者骨髓间充质干细胞对大鼠肾移植慢性排斥
的作用及其免疫调节机制的初步研究[D].广州:南方医科大学,2011.
[24] 徐长宪.鼠干细胞(胚胎、间充质)体外定向分化为心肌细
胞及心脏移植的动物试验研究[D].济南:山东大学,2004. [25] Yanik GA, Horowitz MM, Weisdorf DJ, et al.
Randomized, double-blind, placebo-controlled trial of soluble tumor necrosis factor receptor: enbrel (etanercept) for the treatment of idiopathic pneumonia syndrome after allogeneic stem cell transplantation: blood and marrow transplant clinical trials network protocol. Biol Blood Marrow Transplant. 2014;20(6): 858-864.
[26] 胡江文.TGF-β1基因转染联合BMC/MSCs 诱导嵌合体
在异种心脏移植免疫耐受中作用的实验研究[D]. 苏州:苏州大学,2006.
[27] Brunvand MW, Bitter M. Amyloidosis relapsing after
autologous stem cell transplantation treated with bortezomib: normalization of detectable serum-free light chains and reversal of tissue damage with improved suitability for transplant. Haematologica. 2010;95(3):519-521.
[28] 杨超.骨髓间充质干细胞对心脏移植免疫调节作用的实
验研究[D].武汉:华中科技大学,2008.
[29] 翟光地.在异种心脏移植免疫耐受的诱导中MSCs 修饰胸
腺的可行性实验研究[D]. 苏州:苏州大学,2006. [30] 朱震,陈海军,沈振亚.MSCs 修饰受体胸腺的异种心脏移
植中Th2细胞的表达研究[J].中国医药科学,2012,2(20): 24-26,34.
[31] 王海涛.大鼠骨髓间充质干细胞诱导同种异体心脏移植
免疫耐受[D].上海:复旦大学,2007.
[32] 杨超,肖诗亮,刘成珪,等.间充质干细胞对大鼠心脏移植免
疫的调节作用[J].临床心血管病杂志,2008,24(4): 307-310.
[33] Martin-Rendon E, Sweeney D, Lu F, et al.
5-Azacytidine-treated human mesenchymal
stem/progenitor cells derived from umbilical cord, cord blood and bone marrow do not generate
cardiomyocytes in vitro at high frequencies.Vox Sang. 2008;95(2):137-148.
[34] Mazo M, Gavira JJ, Abizanda G, et al. Transplantation
of mesenchymal stem cells exerts a greater long-term effect than bone marrow mononuclear cells in a chronic myocardial infarction model in rat. Cell Transplant. 2010;19(3):313-328.
[35] 杨华.混合嵌合体在异种心脏移植产生免疫耐受作用中
的实验研究[D]. 苏州:苏州大学,2006.
[36] 汤天生.同基因骨髓间充质干细胞诱导大鼠心脏移植免
疫耐受[D].福州:福建医科大学,2012. [37] Jui HY , Lin CH, Hsu WT , et al. Autologous
mesenchymal stem cells prevent transplant arteriosclerosis by enhancing local expression of interleukin-10, interferon-γ, and indoleamine
2,3-dioxygenase. Cell Transplant. 2012;21(5):971-984. [38] McIver Z, Melenhorst JJ, Wu C, et al. Donor
lymphocyte count and thymic activity predict lymphocyte recovery and outcomes after
matched-sibling hematopoietic stem cell transplant. Haematologica. 2013;98(3):346-352.
[39] 刘奎利.大鼠脐带来源间充质干细胞生物学特性及其对
移植免疫耐受作用的研究[D].北京:军医进修学院, 2009. [40] 黄小进,王效民.骨髓间充质干细胞在移植免疫方面的研
究进展[J].现代生物医学进展,2008,8(9):1771-1773.。