采用有效TaqMan探针和抽提病毒DNA进行实时PCR快速定量HBV DNA
合集下载
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
维普资讯
于 Ｒ Ａ不稳定性或滴度低以及尚未确定的病毒会导致检测某些病毒时的失败。 Ｎ 研究者称 ，对住院儿童的进一步研究和健康控制能更好的了解这些感染导致的疾病所占 比例以及临床和流行病学特征。在儿童中鼻病毒监测率提示它可能是一个不容易被察觉到的 引起 Ａ Ｉ Ｒ 住院治疗的原因。 另外一个作者 Ｒ ｎ ｌ ＢＴ ｒｅ 提到 ， ｏ ａ ．ｕｎ ｒ ｄ 鼻病毒感染是非常重要的 ， 因为这个病毒引起 ５ ％ ０ 的感冒。 儿童鼻病毒感染往往会与三分之一的急性耳炎相伴随 ， 而且是 学龄期儿童哮喘恶化的最主要原因。这个报道可以激发更多的研究来确定鼻病毒感染在这些 疾病中的作用。 （ 编译 曹振环）
的 Ｂ ｕｅ Ｌ Ｉｎｓ博士及其同事指出，除 了活性疫苗组注射部位疼痛较重以外 ，各组不良反 ｒｃ ．ｎ ｉ 应相当。６ ９例受试者发生 了戊型肝炎 ，但是除 ３例外都发生在安慰剂组。当分析扩展至首剂 疫苗后发生戊型肝炎的所有 ８ 例受试者时 ，有效率从 ９． 降至 ８ ． ７ ５％ ５ ８ ％。 ５ 美国疾病控制和预防中心的 Ｋ ｚ ｓｔｆ ｒｗ ｚｎｋ 博士说，在重组 Ｈ Ｖ疫苗需要回答。 这项研究显示的重组 ＨＥ Ｖ疫苗有效预防临床戊型肝炎的结果来 自几乎全部
．
６．
因此 ，基于优化的引物和 Ｔ ｑ ｎ探针 Ｓ区域的实时 Ｐ Ｒ联合 Ｎａ Ｈ裂解法是简单快 ａ Ｍａ Ｃ Ｏ 速和精确的量化 ＨＢ Ｖ血清 Ｄ Ａ的方法。 Ｎ
爿 美研究表明戊型肝炎疫苗对高风险人群有效 ｃ 据医业网 ２月 ２ 报道 （ ８日 原载 Ｎ Ｅ ｇ Ｍｅ ０ ７ ５ ： ５ ９３ ４ － ５ ） ｎ ｌ ｄ２０ ； ６ ９ — ０ ， ９ ９ １ ，在对尼泊尔 Ｊ ３ ８ ９
爿 采用有效 Ｔｑ ａ 探针和抽提病毒 ＤＡ进行实时 ＰＲ ｃ ａＭ ｎ Ｎ Ｃ 快速定量 Ｈ ＶＤ Ａ Ｂ Ｎ 据医学空间网 ２月 ７日报道 （ 原载 Ｗｏｌ Ｇ ｓ ｏｎｅｏ ０６Ｄ ｃ７ ２ ５： ６— ０ ， ｒ Ｊ ａｔ ｅｔｒｌ ０ ｅ ； （ ） ３５ ７ ） ｄ ｒ ２ １４ ７ 为快速定量 Ｈ Ｖ Ｄ Ａ，采用有效 Ｔ ｑ ｎ探针和抽提病毒 Ｄ Ａ进行实时 Ｐ Ｒ检测。 Ｂ Ｎ ａ Ｍａ Ｎ Ｃ 研究人员将分别靶向 ｐ Ｅ Ｔ 载体的 Ｈ Ｖ染色体 ＳＣ和 Ｘ 区域克隆 Ｐ Ｒ产物制备三 Ｇ Ｍ－ Ｂ ， Ｃ 个标准体 ，比较源于三种不 同标准曲线血清样本 Ｈ Ｖ的拷贝数和 Ｃ 值以选择一系列引物和 Ｂ ｔ
军队健康受试者的一项研究中，使用重组戊型肝炎病毒（ Ｖ 疫苗预防戊型肝炎的有效率达 ＨＥ ）
９ ．％。 ５５
ＨＥ Ｖ感染是发展 中国家死亡的一种主要因素，占总病死率的 １ 至 ３ 。在一项早期研究 ％ ％
中， 基因 ｌ ＨＥ 型 Ｖ重组蛋白疫苗被显示对非人灵长类有效。这项令人鼓舞的结果促成 了现在
的随机化临床试验。 在被招募到这项研究中的 ２０ 例受试者中，１９ 例受试者接受所有 ３ ００ ７４ 剂 疫苗， 包括 ８８ ９ 例给予活性疫苗， ９ 例给予安慰剂。疫苗在基线以及 ｌ ６ ８６ 和 个月时使用。主
要结果测量是接 受全疫苗方案后戊型肝炎的发生。位于美国宾 夕法尼亚州的葛兰素史克公司
匹配的 Ｔ ｑ ｎ探针 ，采用实时 Ｐ Ｒ分析样本 Ａ、Ｂ和 Ｃ中六种 ＨＢ Ｎ ａ Ｍａ Ｃ Ｖ Ｄ Ａ抽提方法的效 率，包括异硫氰酸胍 、蛋白酶 Ｋ、Ｎ Ｉ ａ Ｈ裂解法 、 ａ、Ｎ Ｏ 碱裂解法以及简单煮沸法。同时，量
化８ 个临床 Ｈ Ｖ血清样本 。结果可见，源于 Ｓ Ｂ 、Ｃ和 Ｘ标准 曲线的 ＨＢ Ｖ血清样本的拷贝数 分别为 ５ ×ｌ‘ｍ 、６ ×ｌ ｍＬ和 １ ×ｌ ／ ，Ｃ 相对值分别为 ２ ． ｌ 和 ２．。 ． ０ Ｌ ． ０ ７ ／ ３ ／ ． ０ ｍＬ ｔ ６ ６ 、３ ， ６ ８ ９ ５ 因此，选择引物和 匹配的探针 Ｓ区域以进一步优化六种抽提方法 。Ｎ Ｏ ａ Ｈ裂解法 中，Ｈ Ｖ血 Ｂ 清样本 Ａ、Ｂ 和 Ｃ的拷 贝数分别为 ３ ９ ０ ｍ 、２ ８ ０ ｍＬ 和 ４ ０ ０ ｍ ． ×ｌ ／ Ｌ ． ×ｌ。 ４ ０ ／ ． ×ｌ Ｌ，Ｃ 相 ４ ／ ｔ
对值分别为 １． ０和 ２．， ９ 、３ ９ ６ 这种方法在六种中效率最高。 ２ 简单煮沸法显示效率稍低于 Ｎ Ｏ ａＨ
裂解法。 异硫氰酸胍 、 蛋白酶 Ｋ和 Ｎ Ｉ ａ 显示 Ｈ Ｖ血清样本 Ａ、 和 Ｃ的拷 贝数约为 ｌ ／ Ｌ， Ｂ Ｂ ０ｍ 同时 Ｃ 值约为 ３ 。碱裂解法不能定量三个 Ｈ Ｖ血清样本的拷 贝数 ，８ ｔ ０ Ｂ 个临床 ＨＢ Ｖ血清样 本标准差（Ｄ 和变异 系数（ Ｖ 较低 ，提示三份量化的 ＨＢ Ｎ Ｓ） Ｃ） Ｖ Ｄ Ａ比较可靠和精确。
于 Ｒ Ａ不稳定性或滴度低以及尚未确定的病毒会导致检测某些病毒时的失败。 Ｎ 研究者称 ，对住院儿童的进一步研究和健康控制能更好的了解这些感染导致的疾病所占 比例以及临床和流行病学特征。在儿童中鼻病毒监测率提示它可能是一个不容易被察觉到的 引起 Ａ Ｉ Ｒ 住院治疗的原因。 另外一个作者 Ｒ ｎ ｌ ＢＴ ｒｅ 提到 ， ｏ ａ ．ｕｎ ｒ ｄ 鼻病毒感染是非常重要的 ， 因为这个病毒引起 ５ ％ ０ 的感冒。 儿童鼻病毒感染往往会与三分之一的急性耳炎相伴随 ， 而且是 学龄期儿童哮喘恶化的最主要原因。这个报道可以激发更多的研究来确定鼻病毒感染在这些 疾病中的作用。 （ 编译 曹振环）
的 Ｂ ｕｅ Ｌ Ｉｎｓ博士及其同事指出，除 了活性疫苗组注射部位疼痛较重以外 ，各组不良反 ｒｃ ．ｎ ｉ 应相当。６ ９例受试者发生 了戊型肝炎 ，但是除 ３例外都发生在安慰剂组。当分析扩展至首剂 疫苗后发生戊型肝炎的所有 ８ 例受试者时 ，有效率从 ９． 降至 ８ ． ７ ５％ ５ ８ ％。 ５ 美国疾病控制和预防中心的 Ｋ ｚ ｓｔｆ ｒｗ ｚｎｋ 博士说，在重组 Ｈ Ｖ疫苗需要回答。 这项研究显示的重组 ＨＥ Ｖ疫苗有效预防临床戊型肝炎的结果来 自几乎全部
．
６．
因此 ，基于优化的引物和 Ｔ ｑ ｎ探针 Ｓ区域的实时 Ｐ Ｒ联合 Ｎａ Ｈ裂解法是简单快 ａ Ｍａ Ｃ Ｏ 速和精确的量化 ＨＢ Ｖ血清 Ｄ Ａ的方法。 Ｎ
爿 美研究表明戊型肝炎疫苗对高风险人群有效 ｃ 据医业网 ２月 ２ 报道 （ ８日 原载 Ｎ Ｅ ｇ Ｍｅ ０ ７ ５ ： ５ ９３ ４ － ５ ） ｎ ｌ ｄ２０ ； ６ ９ — ０ ， ９ ９ １ ，在对尼泊尔 Ｊ ３ ８ ９
爿 采用有效 Ｔｑ ａ 探针和抽提病毒 ＤＡ进行实时 ＰＲ ｃ ａＭ ｎ Ｎ Ｃ 快速定量 Ｈ ＶＤ Ａ Ｂ Ｎ 据医学空间网 ２月 ７日报道 （ 原载 Ｗｏｌ Ｇ ｓ ｏｎｅｏ ０６Ｄ ｃ７ ２ ５： ６— ０ ， ｒ Ｊ ａｔ ｅｔｒｌ ０ ｅ ； （ ） ３５ ７ ） ｄ ｒ ２ １４ ７ 为快速定量 Ｈ Ｖ Ｄ Ａ，采用有效 Ｔ ｑ ｎ探针和抽提病毒 Ｄ Ａ进行实时 Ｐ Ｒ检测。 Ｂ Ｎ ａ Ｍａ Ｎ Ｃ 研究人员将分别靶向 ｐ Ｅ Ｔ 载体的 Ｈ Ｖ染色体 ＳＣ和 Ｘ 区域克隆 Ｐ Ｒ产物制备三 Ｇ Ｍ－ Ｂ ， Ｃ 个标准体 ，比较源于三种不 同标准曲线血清样本 Ｈ Ｖ的拷贝数和 Ｃ 值以选择一系列引物和 Ｂ ｔ
军队健康受试者的一项研究中，使用重组戊型肝炎病毒（ Ｖ 疫苗预防戊型肝炎的有效率达 ＨＥ ）
９ ．％。 ５５
ＨＥ Ｖ感染是发展 中国家死亡的一种主要因素，占总病死率的 １ 至 ３ 。在一项早期研究 ％ ％
中， 基因 ｌ ＨＥ 型 Ｖ重组蛋白疫苗被显示对非人灵长类有效。这项令人鼓舞的结果促成 了现在
的随机化临床试验。 在被招募到这项研究中的 ２０ 例受试者中，１９ 例受试者接受所有 ３ ００ ７４ 剂 疫苗， 包括 ８８ ９ 例给予活性疫苗， ９ 例给予安慰剂。疫苗在基线以及 ｌ ６ ８６ 和 个月时使用。主
要结果测量是接 受全疫苗方案后戊型肝炎的发生。位于美国宾 夕法尼亚州的葛兰素史克公司
匹配的 Ｔ ｑ ｎ探针 ，采用实时 Ｐ Ｒ分析样本 Ａ、Ｂ和 Ｃ中六种 ＨＢ Ｎ ａ Ｍａ Ｃ Ｖ Ｄ Ａ抽提方法的效 率，包括异硫氰酸胍 、蛋白酶 Ｋ、Ｎ Ｉ ａ Ｈ裂解法 、 ａ、Ｎ Ｏ 碱裂解法以及简单煮沸法。同时，量
化８ 个临床 Ｈ Ｖ血清样本 。结果可见，源于 Ｓ Ｂ 、Ｃ和 Ｘ标准 曲线的 ＨＢ Ｖ血清样本的拷贝数 分别为 ５ ×ｌ‘ｍ 、６ ×ｌ ｍＬ和 １ ×ｌ ／ ，Ｃ 相对值分别为 ２ ． ｌ 和 ２．。 ． ０ Ｌ ． ０ ７ ／ ３ ／ ． ０ ｍＬ ｔ ６ ６ 、３ ， ６ ８ ９ ５ 因此，选择引物和 匹配的探针 Ｓ区域以进一步优化六种抽提方法 。Ｎ Ｏ ａ Ｈ裂解法 中，Ｈ Ｖ血 Ｂ 清样本 Ａ、Ｂ 和 Ｃ的拷 贝数分别为 ３ ９ ０ ｍ 、２ ８ ０ ｍＬ 和 ４ ０ ０ ｍ ． ×ｌ ／ Ｌ ． ×ｌ。 ４ ０ ／ ． ×ｌ Ｌ，Ｃ 相 ４ ／ ｔ
对值分别为 １． ０和 ２．， ９ 、３ ９ ６ 这种方法在六种中效率最高。 ２ 简单煮沸法显示效率稍低于 Ｎ Ｏ ａＨ
裂解法。 异硫氰酸胍 、 蛋白酶 Ｋ和 Ｎ Ｉ ａ 显示 Ｈ Ｖ血清样本 Ａ、 和 Ｃ的拷 贝数约为 ｌ ／ Ｌ， Ｂ Ｂ ０ｍ 同时 Ｃ 值约为 ３ 。碱裂解法不能定量三个 Ｈ Ｖ血清样本的拷 贝数 ，８ ｔ ０ Ｂ 个临床 ＨＢ Ｖ血清样 本标准差（Ｄ 和变异 系数（ Ｖ 较低 ，提示三份量化的 ＨＢ Ｎ Ｓ） Ｃ） Ｖ Ｄ Ａ比较可靠和精确。