双荧光素酶报告基因和单荧光素酶报告基因
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双荧光素酶报告基因和单荧光素酶报告基因
双荧光素酶报告基因是一种利用荧光技术对两种不同样本进行同
时检测的技术。
这种技术通常用于检测基因表达水平差异或者鉴定基
因变异。
双荧光素酶报告基因由两个不同的荧光报告基因组成,一个
称为“参考荧光基因”,另一个称为“检测荧光基因”。
这两个基因
都被置于同一个位点,通过一条多外显子基因互补的RNA链来实现对
同一片DNA的双重检测。
参考荧光基因包括一个模板序列和一个感兴
趣的序列,模板序列由参考荧光基因敲入DNA中,能够准确地定位感
兴趣序列,这就是所谓的“特征序列”。
如果特征序列存在与基因片
段中,那么参考荧光报告基因就会被激活,产生一定数量的荧光蛋白质,从而将荧光信号传递到另一端,即检测荧光基因。
检测荧光基因
同样具有特征序列,以及一组检测序列,检测序列中包含与参考荧光
基因“特征序列”配对的特征序列。
如果参考荧光基因产生的荧光信
号与检测荧光基因的检测序列匹配,那么检测荧光基因也会被激活,
产生荧光信号传递到检测荧光信号探测器。
这时,两个荧光报告基因
产生的信号就会被比较,从而实现双荧光素酶报告基因的功能。
单荧光素酶报告基因是一种利用荧光技术监测基因活性的技术。
其基本原理是,在一个多外显子基因的载体上,编码一个荧光报告基因,将其茧入指定的基因片段,使其发挥不同的功能,例如检测基因
表达水平、检测基因变异等。
单荧光素酶报告基因由一个荧光报告基因组成,其中包括一个特定的
模板序列和一个感兴趣序列。
模板序列由单荧光素酶报告基因敲入DNA 中,能够准确地定位感兴趣序列,使其与检测序列特征相匹配,从而
实现特定的功能。
当荧光报告基因成功敲入到DNA序列中时,它将引
发激活,从而产生荧光蛋白质,从而向检测器传递荧光信号,从而实
现单荧光素酶报告基因的功能。
此外,双荧光素酶报告基因和单荧光素酶报告基因都有其自身的
优点和缺点。
双荧光素酶报告基因可以同时监测两个样本的变化情况,它的灵敏度更高,而且可以检测更广泛的基因表达情况,但是它也受
受到一些偏差的影响,如果参考荧光基因和检测荧光基因的敏感度不同,就可能产生误差。
单荧光素酶报告基因的优点是它只需要检测一个样本,另外,它的灵敏度很高,检测范围也很广,而且对受检者的影响很小,但是它也受偏差影响,如果检测序列中有基因突变,就可能产生误差。
因此,在应用双荧光素酶报告基因和单荧光素酶报告基因时,应该。