淋病奈瑟菌表面蛋白A克隆、表达和免疫原性鉴定
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淋病奈瑟菌表面蛋白A克隆、表达和免疫原性鉴定
杜蓬;吴森林;钟雅文;孙爱华
【期刊名称】《中国现代医生》
【年(卷),期】2012(050)003
【摘要】目的克隆并构建淋病奈瑟菌表面蛋白A(nspA)基因原核表达系统,并对重组产物rNspA进行免疫原性鉴定.方法采用PCR扩增nspA基因,构建nspA基因原核表达系统.SDS-PAGE检测目的重组蛋白rNspA表达情况,Ni-NTA亲和层析法提纯rNspA,免疫双扩散试验及Western Blot鉴定rNspA的免疫原性.结果克隆的nspA基因与GenBank中相关序列相似性为100%,rNspA表达量为细菌总蛋白的40.1%,提纯的rNspA在SDS-PAGE后显示为单一的蛋白条带.rNspA抗血清免疫双扩散效价为1:4,rNspA抗血清能有效识别rNspA.结论所构建的nspA基因原核表达系统能高效表达rNspA,表达的产物有良好的免疫原性,为淋病奈瑟菌免疫疫苗的研制奠定基础.
【总页数】3页(P9-10,15)
【作者】杜蓬;吴森林;钟雅文;孙爱华
【作者单位】浙江医学高等专科学校,浙江杭州 310053;浙江医学高等专科学校,浙江杭州 310053;浙江医学高等专科学校,浙江杭州 310053;浙江医学高等专科学校,浙江杭州 310053
【正文语种】中文
【中图分类】R759.2
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