苦参中黄酮类成分的高效液相指纹图谱及5种成分的含量测定

苦参中黄酮类成分的高效液相指纹图谱及5种成分的含量测定
采用高效液相色谱法建立苦参中黄酮类成分的指纹图谱，并同时测定3种异戊烯基黃酮(苦参醇I、苦参酮、槐属二氢黄酮G)和2种紫檀素(三叶豆紫檀甘和高丽槐素)的含量。

色谱条件采用ULTIMATE XB-C18色谱柱(4.6 mmx 250 mm, 5 pm),乙月青■水溶液为流动相进行梯度洗脱，以295 nm为检测波长。

共收集了12批苦参和4批同属近缘种山豆根进行测定，运用中国药典委员会“中药色谱指纹图谱相似度评价软件2004AB-进行评价,对黃酮类成分进行主成分分析，并对主要5种成分进行含量测定。

建立了苦参黄酮类成分HPLC指纹图谱，标定了13个共有色谱峰，并采用对照品指认了5个主要色谱峰，4批同属近缘种山豆根与苦参黃酮对照图谱明显不同。

主成分分析的结果表明，苦参酮、槐属二氢黄酮G等对其质量影响显著。

含量测定条件通过方法学验证，平均加样回收率在96.3%〜102.3%。

该法所建立的苦参黃酮类成分指纹图谱特征性强、方法简便，结合主要成分含量测定可更好地控制其质量，对苦参的鉴定及质量控制具有指导意义和参考价值。

标签：苦参；黃酮；高效液相色谱；指纹图谱；主成分分析
1材料
Waters e2695型高效液相色谱仪，配备四元梯度泵、在线真空脱气机、自动进样器、柱温箱、二极管阵列检测器。

KQ-250DB数控超声波清洗仪(昆山市超声仪器有限公司)，BP211D型分析天平(Satorius Co.Ltd.,德国)。

乙睛(色谱纯，Merck 公司)，纯净水(Watsons),屮醇为分析纯(上海国药集团试剂有限公司)。

对照品苦参酮(Kuarinone)、槐属二氢黄酮G (Sophoraflavanone G)＞苦参醇I (Kushenol I)、三叶豆紫檀昔(Trifolirhizin)、高丽槐素(Maackiain)对照品自制，经HPLC峰面积归一化法计算，纯度均大于98%。

供含量测定用乙睛为色谱纯，其余试剂均为分析纯。

12批苦参药材和4批山豆根药材于2011-2012 年各地采集原植物，晒干其根备用，均由广东药学院姬生国教授鉴定，见表1。

表1苦参和山豆根样品来源
Table 1 Origins of Sophora flavescens and S・ tonkinensis samples
2方法与结果
2」色谱条件
ULTIMATE XB-C18 色谱柱(4.6 mmx 250 mm, 5 pm)；流动相乙Bf (A)- 水(B),梯度洗脱，0〜25 min, 40%〜50% A； 25〜30 min, 50%〜70% A； 30〜40 min, 70% A；40〜50 min, 70%〜40% A；柱温35 °C：流速1 mL min-1；检测波长295 nm：进样量10 pL,色谱图见图1。