中药化学-第13章 中药复方药效物质基础研究-1学时--中资

如：茵陈蒿汤的动物实验研究发现，把茵陈、栀子、大黄三药分开，单独给药都没有明 显的利胆作用，只有把三药合起来煎煮后使用时，才见到胆汁排泄大量增加。 又如：正柴胡饮以小鼠流感病毒性肺炎为指标，全方有效，单味药仅芍药有作用。又于 全方中轮流减去一味药，即使这一味药单独并无作用，却能明显削弱全方的效应 由这些 结果推测复方中化学成分不等于单昧药化学成分的简单相加，可能有新成分的产生或可 能发生其他动态变化。
第十三章
中药复方药效物质基础研究
广西中医学院 药学院 中药化学教研室 潘为高
前言
I. 金人成无己的《伤寒明理论· 序》中始有复方之 名，原意---两个或两个以上的单方组成的方剂；
II. 现代中药复方-----由两味或两味以上的中药组成。
前言
中药复方包含中医学医理、思辨和配伍规律，是一个复杂 体系，不是简单的物物堆砌； 复方的整体功效不等于方内各药功效的简单相加，复方的 化学成分也不是单味药化学成分的简单相加。 在继承中医药理论合理内涵的前提下，应用现代科学理论 和方法对中药复方复杂体系的药效物质基础进行研究，具 有重要意义。
c)
d)
第二节 中药复方药效物质基础研究的进展
二、中药复方化学成分的分离鉴定
三．复方起药效的成分，除有机成分外，尚有无机成分、有机成 分和无机成分的配合物。对复方中有机成分的研究，对探明 中药复方物质基础有重要意义。
除对单味中药进行无机原素研究外，对复方已有200余首复方 无机成分研究的报道------起初孤立地对复方无机成分的测定， 套用无机成分的生物活性来分析复方的功效和作用；现涉及 到复方中无机成分存存状态以及无机成分与有机成分配位化 学的研究。
第二节 复方药效物质基础研究的进展
第二节 中药复方药效物质基础研究的进展
一、中药复方配伍理论的物质基础研究
一． 用化学方法对经典配伍理论的研究是复方物质基础研究的一 个重要方面。 a) 在上世纪90年代初，对《伤寒论》中回阳救逆代表方四逆汤的 配伍关系采用完全随机设计，从化学成分方面进行研究，首次 将该方中君药附子与臣药干姜、佐使药甘草的配伍关系用数学 回归方程表示出来，为中药复方的现代化学研究提供了借鉴。
d) 对治疗热痢的白头翁汤的研究则表明，方中黄连、黄柏所含小檗碱 和秦皮中所含秦皮乙素在合方煎煮后含量均较原药材含量有所下降， 但此下降并不符合各单味药作用的加和，因此，这种结果从另一个 侧面说明了白头翁汤配伍必然还有其他自身的规律存在。
e)
四物汤最早为《太平惠民和剂局方》收载，是补血调血代表方。有 人考察该方配伍对白芍所含有害成分苯甲酸煎出量的影响，不同配 伍合煎后苯甲酸煎出量显著降低，为中药复方配伍后能佐制药物的 偏性、毒性和峻烈之性提供了实验依据。
第二节中药复方药效物质基础研究的进展四中药复方定性定量研究薄层色谱法定性薄层色谱法由于本身同时是一个分离手段而且极其直观中药中相同类型的化学成分直接或经过适当处理显色紫外光照射等跃然板上经过与对照品比较可以显示出复方中某味中药或某些成分的有无而且斑点的大小颜色的深浅又可给出半定量的信息可同时解决复方组成药味的真伪或有无和优劣或剂量两个问题
b)
从治疗高血脂症的山丹芍药汤-----分离获得15个化合物，并证明均属 各单味药所含化学成分。
对补气基本方四君子汤中白术主要成分的考察结果表明，四君子汤 煎剂中白术主要成分与单味白术相比没有发生变化，为进一步研究 四君子汤提供了实验依据。 对辛凉解表方银翘散---抗流感病毒有效部位群中黄酮类化合物的分 离鉴定，并对分得的成分与各单味药相比较，归属丁各成分的来源， 推断黄酮类成分可能是银翘散抗流感病毒作用的物质基础。
第二节 中药复方药效物质基础研究的进展
三、中药复方有效部位的提取分离
复方总提取物的制备多数承袭中药汤剂的水煎煮法，需 高温加热，会破坏有些成分，得到的水煎液进一步处理又 有诸多困难。超声波提取、超临界流体萃取技术、大孔树 脂分段富集法、半仿生法。
根据复方药效成分的性质，选择新的技术，使中药复方 成分的提取和分离更为便捷外，在研究具体复方时以新思 路指导，使得复方成分提取工艺更趋合理。
中药复方按中医药理论以中药配伍而成---包含中医学 独特的医理和思辨，其药物选择蕴涵着配伍规律。
中药复方能体现这些医理、规律的内涵是物质基础， 因此复方物质基础的研究成为关键问题。
第一节 中药复方药效物质基础研究的意义及必要性
二、复方药效物质基础研究利于阐释中医药理论 大量复方的药效在长期的临床实践中得到了验证，这证 明中医药理论的科学性；现代实验研究结果，也对中医药 理论的科学性给予了证明。
第二节 中药复方药效物质基础研究的进展
四、中药复方定性、定量研究
2. 薄层色谱法定性
薄层色谱法由于本身同时是一个分离手段，而且极其直观，中药中相 同类型的化学成分直接或经过适当处理(显色、紫外光照射等)跃然板 上，经过与对照品比较，可以显示出复方中某味中药或某些成分的有 无，而且斑点的大小、颜色的深浅又可给出半定量的信息，可同时解 决复方组成药味的真伪(或有无)和优劣(或剂量)两个问题。薄层鉴别 不仅可用化学对照品，还可用对照药材进行比较，给出更多信息，解 决了单靠一种化学对照品难以准确定性的问题。譬如只靠人参皂苷 Rb1、Re或Rg1不能区别人参、西洋参、三七以及它们的根或茎叶； 小檗碱解决小了黄连、黄柏和三颗针之间的区别。但是各自的对照药 材给出的薄层色谱图却各具特征，依此对照，足资鉴别真伪。
第二节 中药复方药效物质基础研究的进展
二、中药复方化学成分的分离鉴定
二． 对复方化学成分的分离鉴定，以其方法科学、技术先进的优 势在中药及天然药物研究领域占有重要位置。
a) 补气活血方补阳还五汤----临床用于治疗缺血性中风后遗症。为阐明 其活性成分，从该方水煎液的乙酸乙醋萃取部位分离得到4个异黄酮 化合物和l个紫檀烷类化合物。
第一节 中药复方药效物质基础研究的意义及必要性
五、促进中药制剂等相关学科的发展
中药制剂学在复方药效物质基础研究的支撑下，更能够从剂型选择、 制剂工艺、辅料选择和质量控制等诸方面开展深层次的考察探究，研 制出符合国际标准和现代生活需要的现代中药制剂。 中药复方各组成药味所含主要成分的不可或缺性，使中药制剂定性 鉴别项目尽可能增加； 有效成分或指标性成分的明确要求中药制剂必须有含量测定内容； 多成分整合作用的假说导致中药制剂逐步建立指纹图谱检在； 中药药效成分提取分离新技术的应用和新思路的拓展推动了中药制 备工艺研究的深入； 新的检测方法和手段的采用使中药制剂质量可控性大大提高。
中药现代化： 将传统中药的特色优势与现代科学技术相结合；
按照下列等国际的标准规范对中药进行研究、开发、生产 和管理，并适应当今社会发展的需求。
《药品非临床安全性研究质量管理规范》(GLP) 《药品临床研究质量管理规范》(GCP) 《药品生产质量管理规范》(GMP)
第一节 中药复方药效物质基础研究的意义及必要性
第二节 中药复方药效物质基础研究的进展
一、中药复方配伍理论的物质基础研究
c) 对半夏泻心汤配伍的研究是将该复方按药物性味分组，采用毛细管 气相色谱法测定各种组合中干姜挥发性成分桉叶素煎出量，结果表 明各组桉叶素含量均高于干姜单煎，辛温组(半夏、干姜)加甘补组 (党参、甘草、大枣)桉叶索煎出量最为明显。如此以中医药理论为 指导以化学成分为指标的研究方法是对复方配伍关系研究很有意义 的尝试。
四、复方药效物质基础研究是中药现代化的必经途径
复方是中医药防治疾病的主要手段，复方药效物质是中药 现代化的关键；
阐明复方药效物质基础，揭示中药复方作用机理及组方配 伍关系，可为中药现代化提供技术支撑。
例如：现代中药复方丹参滴丸的研制---根据中医的传统理论基础与现代药学新 技术对复方丹参片的药效物质基础进行系统全面的研究，最后以明确的药效物 质成分丹酚酸、三七皂苷、冰片组方，采用固体分散原理制成滴丸剂．极大地 提高了生物利用度，对主要成分丹参素、三七皂苷、冰片定性、定量分析，准 确地控制质量，使复方丹参滴丸的化学研究进入较高层次。
复方药效物质基础研究，可从更深层面阐释中医药理论， 认识中医药理论的科学性、说明中药复方的不同化学层次 的配伍规律、药效和作用机理------这既能解决中药复方的 复杂性和整体性难点，又可继承中医药理论的合理内涵。
第一节 中药复方药效物质基础研究的意义及必要性
三、中药复方药效物质基础研究可搭建中西医结合的纽带和桥梁 中医和西医是两个不同的医学体系，其理论存在着极大 的差异，但两个学科服务的对象都是人，中医和西医就有 结合的必要和可能。 随着现代医学理论和技术的发展，过去被认为是中医特色 的辨证论治、整体观念等已不再是中医独有，西医对许多 疾病也体现整体和综合的治疗。可见中医和西医的结合在 不断地进行着。 中药复方药效物质基础研究是中西医结合的纽带和桥梁。
例如：在确定提取分离工艺中，先对影响提取分离的若干因素进行考察，选 择最佳工艺路线，以保证最大限度地使有效成分提取和分离，减少损失，杂 质则尽可能地被除去或不被提取。
第二节 中药复方药效物质基础研究的进展
四、中药复方定性、定量研究
1. 依据化学反应定性
单味中药多含有各自的特征成分，当将单味药配伍组成复方时，某些 特征成分虽然可能在煎煮或其他处理过程中发生了变化，此变化以量 的增损为多见。只要这些成分还在检测限内，就可能应用特征的化学 反应，加入一定的试剂，根据反应结果(产生沉淀、颜色变化或放出 气体)对复方中的药味进行定性。2000年版《中国药典》收成方制剂 中有78首采用了化学反应对复方中的药味进行定性分析。需要注意的 是复方成分比单味药更复杂，干扰更大。应视情况确定供试样品的前 处理程序。十全大补丸与千柏鼻炎片处方中均有川芎，两方均规 定了川芎中生物碱类的沉淀反应鉴别，但在制备供试品溶液时，前者 为排除干扰，将酸水提取液碱化，氯仿萃取，萃取液蒸干，残渣用酸 水溶解再加沉淀试剂使其发生沉淀，而后者则用酸水液直接加沉淀试 剂即可。
第一节 复方药效物质基础研究 的意义及必要性
第一节 中药复方药效物质基础研究的意义及必要性
一、中药复方药效物质基础研究是中药复方研究的关键问题
数千年来，中药防治疾病主要采用复方的形式。在漫 长的医疗实践中，前人总结出了大量的中药复方。
明代朱棣编著的《普济方》就载方6l739首，2000年南京中医药大学完成的“中医 方剂编码及文献数据库检索系统”收方101000首。
在正视中药复杂性和整体性的基础上，通过深入细致而又提纲挈领的 办法对其药效物质基础进行全面系统的研究，既不要让复杂性、整体性 搞得昏头昏脑，又不要过分追求简明清晰而顾此失彼。 当将中药复方药效物质基础研究得较为透彻时，中西医学就可结合。
第一节 中药复方药效物质基础研究的意义及必要性
四、复方药效物质基础研究是中药现代化的必经途径
b) 生脉散复方化学动态变化的研究是将生脉散合煎剂作为一个整 体进行复方化学研究，发现方中五味子所含少量5-羟甲基-2-糠 醛(5-HMF)在复力合煎剂中含量显著增加，且随方中麦冬的剂 量增大而增加方中人参所含人参皂苷也发生了变化。5-HMF与 人参皂苷均为生脉散复方的药效成分，结合药效学实验确证丁 人参、麦冬、五味子(1:3:l:5)合理的药量配伍比例。
第一节 中药复方药效物质基础研究的意义及必要性
三、中药复方药效物质基础研究可搭建中西医结合的纽带和桥梁
西医用西药治疗疾病，对药物的成分组成、性质、体内过程、不良反 应等都比较清楚。临床充分权衡利弊，针对用药，必然取效。
中医用中药通过审证求因，辨证立法，依法组方，施予病家亦可每获佳 效。 根本区别：中药复方多药味、成百上千的复杂成分，以模糊的面目出现。
第一节 中药复方药效物质基础研究的意义及必要性
五、促进中药制剂等相关学科的发展
中药学各分支学科----中药化学、中药炮制、中药鉴定、中药制剂、 中药药理和中药制剂分析等相互联系，相互渗透。
中药复力药效物质基础研究的进展必然促进各相关学科的发展。
随着复方药效物质愈益清晰，必将有中药炮制、鉴定、药理等问题 被揭示，对这些相关学科提出更明确的指标和要求，必然引起这些相 关学科的学术进步和整个学科的发展。
例如：对当归补血汤中无机成分存在状态与生物活性关系的 研究、麻杏石甘汤中无机成分与有机成分间络合作用的研究 等都对阐释中药复方药效作用的物质基础给以启示。
第二节 中药复方药效物质基础研究的进展
三、中药复方有效部位的提取分离
组成复方的中药主要来源于天然界的植物、动物、矿物， 所含成分异常复杂，一首复方的成分可有上百种甚至上千 种，而中药复方作用的特点是多种成分通过多种途径，作 用于机体多个靶点，发挥整合作用。 尽可能保留复方的多种有效成分是复方提取分离首先要 考虑的问题，但临床应用的复方制剂在保证疗效的基础上 又要求剂量小，服用方便，这就出现了矛盾。 为解决此矛盾，近年来有不少新的提取分离技术被采用。