全自动凝胶染色仪和传统脱色摇床的操作对比

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脱色摇床操作规程

脱色摇床操作规程

脱色摇床操作规程脱色摇床是一种常见的化工设备,用于对颜料、染料等物料进行脱色处理。

为了保证操作安全和工作效率,以下是脱色摇床的操作规程。

一、安全注意事项1.操作前应先了解脱色摇床的结构、性能和使用方法,熟悉相关操作规程。

2.操作人员必须穿戴符合要求的劳动防护用品,包括安全帽、工作服、防护眼镜、耳塞等。

3.操作前应检查设备是否处于正常状态,如有发生故障需要维修后方可使用。

4.严禁操作人员携带易燃、易爆物品进入操作现场。

5.操作人员必须接受相关安全培训,熟悉应急预案,并能熟练使用灭火器材。

二、操作程序1.接通电源:将摇床与电源连接,确认电源与设备匹配,并确保插头接触正常。

2.启动设备:按下启动按钮,等待摇床启动,确认转动方向正确。

3.准备物料:将待脱色的物料按照规定的比例放置在摇床中,并确保物料均匀分布。

4.设置时间和速度:根据实际需要,设置脱色时间和速度。

通常情况下,脱色时间为30-60分钟,速度为60-120转/分钟。

5.开始脱色:按下开始按钮,摇床开始运转。

在运转过程中,操作人员应时刻观察设备运行状态,确保其正常工作。

6.结束脱色:脱色时间到达后,按下停止按钮,摇床停止运转。

待摇床完全停止后,打开设备门,取出脱色后的物料。

7.清洁设备:脱色后需要对设备进行清洗,清除残余物料。

先关闭设备电源,然后用清水清洗摇床内部和外部,并擦干。

8.记录相关参数:记录脱色时间、速度、物料种类和数量等参数,以备后续参考。

三、故障排除1.摇床无法启动:检查电源是否接通、插头是否松动,确认电源线是否损坏。

若以上问题均不存在,可能是设备内部故障,需要联系维修人员进行维修。

2.设备运转异常或停止:检查设备内部是否发生异常噪声或异味,排除可能的故障源,如轴承损坏、驱动系统故障等。

3.脱色效果不佳:检查物料是否均匀分布,脱色时间和速度是否合适,如有问题需要进行调整。

四、设备维护1.定期检查设备的零部件和连接件是否松动或磨损,如有问题及时更换或修复。

新型考马斯亮蓝快速染色液使用说明书

新型考马斯亮蓝快速染色液使用说明书

新型考马斯亮蓝快速染色液使用说明书产品编号:SL1291储存条件:2-8保存,保质期1年。

产品内容:产品内容SL1291-500ml新型考马斯亮蓝快速染色液500ml说明书1份产品说明:考马斯亮蓝快速染色液(Coomassie brilliant blue Protein Stain Reagent)是以考马斯亮蓝为染色剂,主要用于SDS-PAGE和非变性PAGE凝胶电泳中蛋白的染色,也可检测WB后PAGE凝胶的残留蛋白。

本产品采用全新配方,不含甲醇、乙醇和乙酸等有机溶剂,全程无挥发、清洁、安全,且用水即可脱色。

用快染法数分钟即可完成染色。

灵敏度高,可检测到10ng蛋白条带。

使用说明:常规染色脱色方法:1、电泳结束后,将凝胶置于容器中,加入100ml双蒸水或去离子水,微波加热至沸腾后停止。

也可以选择在摇床上摇动3-5min,弃去水溶液。

重复一次。

此过程主要目的是洗掉page胶上的SDS。

染色液,确保覆盖凝胶。

2、加入足量的染液(按盛胶容器的大小而定,以浸没胶面为准),微波加热10sec,停止加热后继续摇床上摇动染色,大约1min后能观察到蛋白条带,10min左右大多数情况下染的足够强。

3、倒出染色液,加入50-100ml的双蒸水或者去离子水,微波加热至沸腾,停止加热后继续在脱色摇床上摇动5-10min,换水即可完成脱色,观察结果。

注意事项:1、洗胶的步骤非常关键。

减少洗胶的次数或者减少用水的体积可能导致胶变得灰白,这有可能是由于胶中残留的SDS导致的。

2、常规方法耗时较长,但检测灵敏度更高,染色效果更加稳定。

快速方法染色脱色速度快,通常检测灵敏度略低,微波炉加热时会出现溶液暴沸导致凝胶碎裂的情况,需特别小心。

3、染色时间取决于凝胶厚度和染色时温度。

凝胶厚,温度低,染色时间长;凝胶薄,温度高,染色时间短。

凝胶和染色液的颜色一致,在染色液中看不清凝胶时,即为充分染色。

染色时间延长效果也更好。

4、脱色期间可以在脱色液中加入一片吸水纸,部分染料会吸附在吸水纸上,会加快脱色。

HE徕卡全自动染色机和手工染色的对比分析

HE徕卡全自动染色机和手工染色的对比分析

与手工染 色相 比, H E徕卡全 自动染 色机 的石蜡 切片
染色均匀 , 色彩鲜 明 , 细胞质 、 细胞核结构对 比清 晰 , 未发生气泡 、 溢胶现象 。结论
工作效率高 , 值得推广应用 。
【 关键 词】 全 自动染色机 ; 手工染色 ; H E 染色 【 中图分类号】 R 3 6 1 . 2 【 文献标识码】 A 【 文章编号 】 1 6 7 4 — 3 2 9 6 ( 2 0 1 4 ) 0 1 A一 0 1 3 8 — 0 2
组发生非计划性拔 管 3例 ( 3 . 3 %) 。2组 非计划性 拔管率差 异
有统计学意义( P< 0 . 0 5 ) 。
总之 , 临床采用导尿管气囊 内固定外加 H型 外固定法 , 取
观察 组 7 d 、 1 4 d时尿道 黏膜损 伤
2 . 2 尿道损伤及感染情 况
0 . 5 ) 。见 表 1 。
( 1 o ) : 7 5 5 .
3 讨

3 王蕾. 妇科老年患者卵巢癌术后尿 路感染 的I 临床分析[ J ] . 中华医院
感染学杂志, 2 0 1 3 , 2 3 ( 7 ) : 1 5 9 5—1 5 9 7 . ( 收 稿 日期 : 2 0 1 3— 0 6—2 4 )
双腔气囊 导尿管 因导尿管前端有一气囊 , 注入适 量生理盐 水后 , 可起到固定导尿管 的作 用 , 多数 医务人 员在使 用气囊导
材方便 , 操作 简单 , 固定牢 固, 能有效减少患者导尿时非计划性 拔管的发生 , 同时也降低 了尿道损伤和尿路 感染 的发生率 , 尤 其适用于 昏迷患者 , 且3 M胶 布黏性好 , 抗过 敏 , 值得临床推 广
应用 。

考染方法一种

考染方法一种

推荐郭尧君老师使用一种考染的方法⑴ 电泳后的凝胶立即浸泡在固定液(500 ml 乙醇,100 ml 冰醋酸,400 ml 蒸馏水)中至少30 min,如有必要可在固定液中浸泡过夜;⑵ 将固定后的凝胶在热的染色液(0.29 g 考马斯亮蓝溶解在250 ml 脱色液中,在使用前边搅拌边加热至60℃)中浸泡10min,然后用蒸馏水将凝胶淋洗一次;⑶ 多次变换脱色液(250 ml 乙醇,80 ml冰醋酸,加蒸馏水至1 L),直至凝胶背景脱净为止,为加快脱色,可略加温度;以上各步最好用振荡器(摇床)震荡染色皿。

⑷ 为了防止凝胶干燥后的龟裂,脱去背景色的凝胶在保存液(25 ml 87% 甘油加225 ml 脱色液)中浸泡30min。

然后将凝胶放在玻璃板上,再用保存液浸湿玻璃纸包住凝胶在室温下晾干。

R250属于慢染,脱色脱的完全,G250属于快染,脱色脱的不彻底。

R250(Coomassie brilliant blue R250).C45H44O7H3S2Na,MW=824,λmax=5 60―590nm.染色灵敏度比氨基黑高5倍.尤其适用于SDS电泳微量蛋白质染色.但蛋白质浓度超出一定范围时,对高浓度蛋白的染色不符合Beer定律,用作定量分析时要注意这点.G250, 又名Xylene brilliant cyaninG.比考马斯亮蓝R250多二个甲基.M W=854;λmax=590―610nm.染色灵敏度不如R250,但比氨基黑高3倍.优点在于它在三氯乙酸中不溶而成胶体,能选择地染色蛋白而几乎无本底色.所以常用于需要重复性好和稳定的染色,适于作定量分析.G250中的G就是Green,偏绿,R250中的R代表Red,偏红,在进行小分子量蛋白的Tricine电泳是常用G250染色,至于加热,染和脱色都可以加热,但都是在急需知道结果的情况下采用,加热后染的背景色很重脱色时间就长而且很难将背景色脱干净,脱色液经常加热会导致固定剂的会发,很快脱色剂就没用了,脱色效果很差,而且加热挥发出来的甲醛对呼吸道有刺激作用因此尽量不要加热!Neuhoff等介绍了一种高灵敏度的染色方法(30 ng/带),无背景色,但需要过夜。

全自动免疫组织化学染色仪的使用体会

全自动免疫组织化学染色仪的使用体会

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具有 相似的体积颗粒及染色质疏 松程度 , 器对其难 以鉴别 仪 有关 。
数和分类等方面存在着一定 的问题 , 以为 了防止对 临床某 所 些疾病的漏诊 、 诊, 误 对全 自动血细胞分析仪某些异常参数的
运 行 ( 意 D B配置 提示 时 间 ,到 配 置 时 间配 置 D B)显 注 A A ,
色一 运行结束 , 将试剂架放 回冰箱 , 出切 片, 取 苏木素复染 、
封片。 2 结 果
色仪是一部 由计算机驱 动的 自动化液相操作 系统 , 以兼容 可 目前免疫组织化学使用的所有试剂。系统通过模拟手 工实验 方法 , 以达到 高度一致的 自动化免 疫染 色结果 。全 自动免疫
有核红细胞报警有 4 3例, 人新生儿 、 消化道 出血 、 骨折及急性腹泻的患者。假 阳性率
的增 高可 能与红 细胞 碎片 、低血红蛋 白或 血小板聚集有关 , 其机制有待进一步探 讨。 总 之 , T 10 i 自动 血 细胞分 析仪 具有 所需 标本 量 X 一80 全
11 仪 器 :a io 司提供 的 A t tie 2 . LbVs n公 i uo a s 0全 自动 免 sn 7
疫组织化学染色仪 , 附电脑 1 、 台 二维码打印机 1台。全 自动
扫描功 能, 通过条码激光扫描 , 滴加抗体准确无误【 标 准化 、 J j ,
自动化程度高 ;每 张载玻片单独冲洗 ,防止交叉反应造成污 染, 冲洗彻底 , 力量 均匀 , 背景清 晰 ; 每张切 片孵 育时间一致 , 反应程序灵活可变 ; A D B的废液单独排放 , 有利于环保。自动

全自动凝胶净化作业指导书

全自动凝胶净化作业指导书

全自动凝胶净化-浓缩-固相萃取系统的操作流程1 主要用途用于复杂基质中分子量差别较大的物质的分离、净化,以提高分析的灵敏度与准确性,同时延长色谱柱使用寿命的样品前处理系统。

可进行预浓缩-GPC净化-浓缩在线联机,各部分也可单独使用。

2 操作规程准备检查各个部位连接是否正常,凝胶净化柱安装是否正确,样品管支架摆放位置是否正确、平稳。

开机:将仪器及电脑各部分的电源打开(原则上先开启GPC的电源),待检测器自检通过(大约6分钟)后再打开仪器的工作站,工作站显示联机通讯成功。

(检查工作站中样品瓶的支架位置设置是否与仪器摆放支架统一)。

排气泡:如发现试剂瓶或连接管路中存在气泡,可将输液泵的放空阀打开后,使用洗耳球将气泡赶出,必要情况下可以运行输液泵,帮助将气泡快速流出。

待气泡排出后,请务必将放空阀拧紧关闭。

设定方法:点击工作站左上角的【功能导航】选择【方法管理】后点【go】;2.4.1 GPC方法:在左上方【方法配置】项的下方分别设置【方法名称】,然后在【Method Type】中选择【GPC】后点击【确定】按钮,然后点击弹出框中的【是(Yes)】按钮,然后单击左侧弹出的【GPC】图标,依次设置运行时间、检测波长、进样模式、进样体积、清洗体积、清洗次数、输液泵参数中的“Speed”项和收集模式,然后点击左侧中间位置的【保存当前】按钮后,再点击右上方的【保存】按钮。

2.4.2 浓缩方法:在左上方【方法配置】项的下方分别设置【方法名称】,然后在【Method Type】中选择【Concentration】后点击【确定】按钮,然后点击弹出框中的【是(Yes)】按钮,然后单击左侧的【Con.】图标,依次设置相关的浓缩方式、定容方式和浓缩参数等,然后点击左侧中间位置的【保存当前】按钮后,再点击右上方的【保存】按钮。

2.4.3 固相萃取方法:在左上方【方法配置】项的下方分别设置【方法名称】和“Method Type”中选择“SPE”然后点击“确定”按钮,然后点击弹出框的“是(Yes)”按钮,然后单击左侧的“SPE”项,然后根据实验需求分别选择左侧中间位置的【润洗“Condition”】、【样品“Sample Loading”】、【淋洗“Flow Path Rinsing”】、【洗脱“Elution”】、【清洗“Washing”】和【氮吹“N2 Purging”】项,选中其中一项后点击右侧的【→】选中后分别设置“收集次数”、“溶剂类型”、“体积”、“流速”和“时间”(其中除氮吹外其他几项可不设置时间)。

BIORAD电泳仪及SDS-PAGE凝胶电泳操作规范

BIORAD电泳仪及SDS-PAGE凝胶电泳操作规范

使用BIO-RAD电泳仪进行SDS-PAGE凝胶电泳的操作规范实验原理根据蛋白分子量亚基的不同而分离蛋白,在样品介质和丙烯酰胺凝胶中加入离子去污剂和强还原剂后,蛋白质亚基的电泳迁移速率主要取决于亚基分子量的大小。

实验所用仪器FR-200A全自动紫外与可见分析装置上海复日科技有限公司电泳仪 BIO-RAD公司TS-1型脱色摇床江苏海门市其林贝尔仪器制造有限公司实验用试剂低分子量蛋白Maker TAKARA4*上样缓冲 TAKARAPagn Blue protein staining solution Fermentas试剂的配制1.贮液的配制(1)凝胶储液取30g丙烯酰胺+0.8g甲叉双丙烯酰胺0.8g ,先用35ml双蒸水溶解,搅拌,直到溶液变成透明,再用双蒸水稀释至100ml,过滤。

棕色瓶4℃保存一个月。

(2)1 mol/l Tris-HCL (PH 8.8)12.1g Tris(三羟甲基氨基甲烷)溶解在80ml双蒸水中,用4mol/l盐酸调PH至8.8。

再用双蒸水稀释至100ml,保存在4℃冰箱。

(3)1.0 mol/l Tris-HCL (PH 6.8)6.06g Tris溶解在40ml双蒸水中,用用4mol/l盐酸调PH至6.8。

再用双蒸水稀释至50ml,保存在4℃冰箱。

(4)10%过硫酸铵(APS)0.1g过硫酸铵+1ml双蒸水。

使用前新鲜配制(5)Tris–甘氨酸电泳缓冲液的配制(25mmol/L Tris;250mmol/L甘氨酸(pH8.3))30.3gTris+ 144.2g甘氨酸+ 10gSDS,双蒸水定容至1L。

每次使用时10倍稀释。

(6)样品缓冲液使用4*SDS-PAGE loading buffer(Takara公司),上样缓冲与样品比例1:3混匀,之后煮沸5min。

2.凝胶的配制注:上表所标体积为配制两块胶的用量。

若配制一块或多块,可按比例减半或加倍。

具体步骤如下:1、样品制备:40 µL蛋白+5*上样缓冲液10 µL,煮沸5 min,冷却后放冰箱下层保存,备用2、制胶1)用专用的医用棉口罩将胶板擦拭干净,电泳槽清洗干净,组装模具。

脱色摇床的相关使用介绍

脱色摇床的相关使用介绍

脱色摇床的相关使用介绍
脱色摇床是一种实验室用的设备,主要用于生物化学实验中样本的染色和脱色。

摇床的震动能够帮助溶液中的试剂均匀地分散到样本中,从而实现均匀染色和脱色的效果。

设备结构和用途
脱色摇床主要由摇床主体、摇床架、电机以及操控面板等部分组成。

其主要用
途为:
1.溶液的均匀分散和混合
2.样本的染色和脱色
摇床的摇动频率和振幅可以通过操控面板进行设定。

摇床的摇动方式分为水平
摇床和垂直摇床两种。

水平摇床可用于样本的均匀混合,而垂直摇床主要用于样本的染色和脱色。

使用步骤
使用脱色摇床的步骤如下:
1.将需要处理的样本置于摇床架上,将架子放到摇床主体上。

2.根据实验需要选择摇动频率和振幅。

3.打开摇床,将其设置为所需的工作时间。

4.操作完成后关闭摇床。

注意事项
在使用脱色摇床时需要注意以下几点:
1.操作时需穿戴手套和护目镜等防护设备。

2.在操作过程中应注意不要让操作液滴到地面或其他地方。

3.严格遵守实验操作规程,不得私自改变实验方案。

4.操作结束后应将摇床及时清洗并关闭电源。

总结
脱色摇床是一种重要的实验室设备,其主要用途为样本的染色和脱色。

通过摇
动震动将溶液中的试剂混合均匀分散到样本中,以实现样本的均匀染色和脱色的效果。

在操作时应注意安全、科学严谨。

脱色摇床跟普通摇床有什么区别

脱色摇床跟普通摇床有什么区别

脱色摇床跟普通摇床有什么区别
脱色摇床主要是指跑电泳时染色、脱色,还有细胞培养等需要的,其主要就是较小,而且上面的台面一般是平的,做水平回旋(现在也有一些可以上下摇动,整体做旋转晃动,这样摇晃的均匀度和一致性比较好);脱色摇床是指台式小型,用于蛋白电泳的脱色过程,一般只有很低的转速,是开发性的,体积相对较小。

一般来说,摇床分室温摇床和恒温摇床,室温摇床就是样品是裸露在空气中的,温度就是环境温度,主要用来做样品的摇匀,混匀等等,还有就是恒温摇床,分5~50度和室温+5度~50度,可以设定需要的温度在进行摇摆,大多用来培养细胞(多为细菌)用的,有一定的转速(如200rpm)与温度控制的(如37度),有密闭敞开两种,相对较大些,基本上是用来发酵用的。

脱色摇床的操作方法

脱色摇床的操作方法

脱色摇床的操作方法
脱色摇床是既实用又方便的一种家具,受到很多人的喜爱。

在使用脱色摇床之前,需要了解其使用方法,下面就介绍一下脱色摇床的操作方法,供大家参考。

第一步:调整脱色摇床的贴脚板,首先将脱色摇床的贴脚板放置在地面上,然
后根据脱色摇床的调整按钮进行调节,调节后可以保证贴脚板和地面衔接良好,以免在使用过程中造成不安全因素。

第二步:装上摇床下方的支架,将支架安装在摇床的正下方,然后利用螺丝固
定支架,牢固就可以了,以免在使用过程中造成支架滑动。

第三步:安装上摇臂,此步骤需要一定的强度,将摇臂固定到床底,尤其要控
制固定的强度,以免使用的时候无法有效支撑床面,影响使用效果。

第四步:安装睡枕头。

将睡枕头安装在床头,需要注意的是,睡枕的安装要牢固,以免在使用的过程中发生意外。

第五步:拆卸脱色摇床时要分步完成,首先将枕头拆卸,然后关掉床头的摇臂,拆卸支架,最后拆卸脱色摇床的贴脚板。

以上就是关于脱色摇床的操作方法,虽然看上去比较简单,但是在实际操作时
得非常注意安全,在贴脚板和摇臂固定过程中一定要注意把握力度,以保证家具的安定性。

最后,在进行拆卸操作时一定要分步进行,确保安全稳定。

希望这篇文章可以帮助到大家。

四种全自动免疫组化仪染色结果的比较分析

四种全自动免疫组化仪染色结果的比较分析

临床与实验病理学杂志 J Clio Exp Pathni 2426 Nov ;36( 1))-269 -网络出版时间:2422 - 2 - 73 13:43 网络出版地址:htt p s ://7ks. c/di. 4eOVcms/Ve/W/34. 1473. R. 22221123. 0947.027. ht/i四种全自动免疫组化仪染色结果的比较分析高丽丽-,脱颖* 2 3,周建文2,张芬芬2,梁英杰2,朱长乐接受日期:2027 -09 -08基金项目上海市浦东新区人民医院重点学科建设(PDRYZDXK2712-61 -、浦东新区重要薄弱学科(Pwzbr2017X2)作者单位/上海市浦东新区人民医院病理科,上海202992中山大学附属第一医院病理科,广州3120803南京中医药大学附属医院病理科,南京42002作者简介:高丽丽,女,主管技师。

E-mail : ****************朱长乐,男,主任技师,通讯作者° E-mail : zhuchatle2008@关键词:全自动免疫组化仪;Ki-67; CWponU ; CKpaw ; CD5 ;BCLA中图分类号:R 365 文献标志码:B文章编号 202) -7309(2424)1 - -1360 -47dol :14.1 3 3 - 5/j. c/dk /cep. 2424. 1 - . 029免疫组化技术已成为临床病理诊断中常规检测手段之一,特别是在判断肿瘤组织的起源、分类以及良、恶性肿瘤的 鉴别诊断等方面发挥重要作用。

但在实际工作中,因工作环境、检测方法及个人操作差异等因素影响染色结果的准确性 和稳定性。

全自动免疫组化仪的应用对免疫组化标准化染 色起到了推动作用,可以有效解决人为因素对染色结果的影响4-「4°本实验对四种全自动免疫组化仪检测五种抗体染色的结果进行比较,优化染色流程,最终达到一致性高的检 测结果。

最优考马斯亮蓝染色Protocol

最优考马斯亮蓝染色Protocol

考马斯亮蓝染色推荐选用前三种染色方法,另有传统考马斯亮蓝染色法和网上经验,染色效果不好,不推荐使用,仅供参考;见后页比对照片操作步骤:1、取出SDS-PAGE凝胶,经超纯水漂洗;以下每步操作皆在摇床上进行;2、固定:将凝胶放入相应的固定液中,固定1小时;3、染色:取出凝胶,放入相应的染色液中,过夜染色;也可依实际情况缩短时间4、脱色胶体法&改良法:凝胶放入纯水中洗脱,换液数次;脱色Neuhoff法:取出凝胶,用M Tris-H3PO4缓冲液漂洗2分钟;再用25%乙醇淋洗<1 min;然后再用10%乙酸中在室温脱色2小时即可;试剂的配制:1、胶体考马斯亮蓝染色法colloidal Coomassie brilliant blue,cCBB:固定液:40%甲醇、10%乙酸染色液:%磷酸、8%硫酸铵、% CBB-G250、20%乙醇脱色液:H2O2、改良考马斯亮蓝染色法modified Coomassie brilliant blue,mCBB:固定液:40%甲醇、10%乙酸染色液:10%磷酸、10%硫酸铵、% CBBG250、20%乙醇着色1小时即可;脱色液:H2O3、Neuhoff染色法:固定液:12%三氯醋酸染色液:2%磷酸、10%硫酸铵、% CBB-G250、使用前振摇;染色时,取一定体积的染色液,加入1/4体积的甲醇;脱色所需:M Tris-磷酸缓冲液、25%乙醇、10%醋酸4、传统考马斯亮蓝染色法:固定液:%甲醇、%乙酸染色液:%甲醇、%乙酸、% CBB-G250脱色液:5%甲醇、%乙酸5、网上方法:固定液:40%甲醇、10%乙酸染色液:30%甲醇、10%乙酸、% CBB-G250脱色液:30%甲醇,10%乙酸比对照片:每块胶左道是Marker质量原因,未跑开ˇˇ 上样量5μl,右道是BSA分子量68kDa,上样量为3μg.-Neuhoff法传统法胶体法改良法网上法。

考马斯亮蓝染色详细步骤

考马斯亮蓝染色详细步骤

考马斯亮蓝染色详细实验步骤考马斯亮蓝染色液R250配方(100ml):考马斯亮蓝R250 0.25g甲醇45ml冰醋酸10mlddH2O 45ml考马斯亮蓝脱色液配方:甲醇250ml冰醋酸80mlddH2O定容至1000ml。

具体操作步骤:1电泳结束后,切取少量含有MARK蛋白以及少许样品的小部分凝胶进行染色,其余部分用保鲜膜包好,放在4℃冰箱保存。

取凝胶放入适量考马斯亮蓝染色液中,确保染色液可以充分覆盖凝胶。

置于水平摇床或侧摆摇床上缓慢摇动,室温染色1小时或更长时间。

注:具体的染色时间取决于凝胶的厚度和染色时的温度。

凝胶较厚,温度较低,则染色时间宜适当延长。

凝胶较薄,温度较高,则染色时间可以适当缩短。

通常染色至凝胶的颜色和染色液的颜色非常接近,在染色液中几乎看不清凝胶时,可以认为已染色充分。

染色2-4个小时或更长时间不会对最终的染色效果产生负面影响。

2 倒出染色液。

染色液可以回收重复使用至少2-3次。

3 加入适量考马斯亮蓝染色脱色液,确保脱色液可以充分覆盖凝胶。

置于水平摇床或侧摆摇床上缓慢摇动,室温脱色4-24小时。

期间更换脱色液2-4次,直至蓝色背景基本上全部被脱去,并且蛋白条带染色效果达到预期。

通常蛋白条带在脱色1-2小时后即可出现。

注:脱色期间可以在脱色液中加入一片吸水纸,可以使部分染料吸附在吸水纸上,加快脱色。

脱色时间过长也会导致蛋白条带的颜色变浅。

4 完成脱色后,用ddH2O浸泡,至于未染色凝胶长度相等时,参照MARK蛋白,与未染色凝胶对比,切下所需蛋白成分的凝胶,收集起来。

然后把所要提纯的蛋白从凝胶中分离出来。

常用染色设备及染色方法

常用染色设备及染色方法

常用染色设备及染色方法1. 染色设备染色是一种常见的加工工艺,用于为织物、纺织品和其他材料添加颜色。

在染色过程中,染色设备起着关键作用。

以下是几种常用的染色设备。

1.1 染色机染色机是一种用于批量染色的设备。

它可以容纳大量织物,并通过水流、蒸汽或压力将染料渗透到织物中。

染色机的操作简单,可以自动调整温度、时间和染料投入量,以确保染色效果的一致性和可重复性。

1.2 染缸染缸是一种用于小批量或手工染色的设备。

它通常由不锈钢制成,并具有温控系统和染料投放系统。

染缸可通过加热水和染料来实现染色过程,并提供搅拌功能以确保染料均匀分布。

1.3 染色搅拌机染色搅拌机是一种通过搅拌织物和染料来实现染色的设备。

它通常由不锈钢制成,并配有电动搅拌器。

染色搅拌机可以在短时间内均匀地将染料渗透到织物中,适用于小型生产和实验室规模的染色。

2. 染色方法染色方法可分为多种类型,根据染色的目的和所使用的染料,选择适当的染色方法非常重要。

以下是几种常用的染色方法。

2.1 水洗染色水洗染色是最基本的染色方法之一。

它涉及将织物浸泡在染料溶液中,然后通过搅拌或搓揉使染料渗透到织物中。

水洗染色通常用于棉织物和其他吸水性较强的纤维材料。

2.2 高温染色高温染色是在高温条件下进行的染色方法。

高温可以加速染料与织物之间的反应,并提高染色的均匀性和效果。

高温染色通常适用于合成纤维和某些特殊纤维材料。

2.3 冷染色冷染色是在常温条件下进行的染色方法。

它适用于对温度敏感的织物和染料。

冷染色通常需要较长的染色时间,但可以减少能源消耗和染色过程中的材料损耗。

2.4 半浸染色半浸染色是一种部分染色的方法,染料只能渗透到织物的一部分。

这种染色方法通常用于设计师服装和纺织品中,以创建独特的图案和效果。

半浸染色要求隔离染色区域以防止染料扩散。

2.5 手工染色手工染色是一种传统的染色方法,常用于艺术和手工艺品制作。

它可以使用各种染料和技巧,如结扎、绑扎和涂抹,创建独特的染色效果。

2021聚丙烯酰胺凝胶电泳快速染色与脱色方法范文3

2021聚丙烯酰胺凝胶电泳快速染色与脱色方法范文3

2021聚丙烯酰胺凝胶电泳快速染色与脱色方法范文 聚丙烯酰胺凝胶电泳是分离、分析蛋白质常用的方法。

在蛋白质组学试验中,蛋白质经聚丙烯酰胺凝胶电泳后的染色是十分重要的环节。

电泳后的常规染色方法已有很多,目前一般采用的染色、脱色方法是用甲醇-醋酸〔1〕.但在学生的实验中,脱色液用量相当大,且脱色时间长〔2〕,不但试剂成本耗费比较高、实验时间长,而且甲醇的毒性有害健康〔3〕.为此,本文用乙醇代替甲醛,用10% 的三氯醋酸代替高浓度的醋酸配制染色、脱色液,并用微波炉加热染色、脱色的方法〔4,5〕,建立了一种成本低、无毒性的快速染色、脱色方法。

1材料与方法 1. 1 材料 1.1. 1 主要试剂和仪器丙烯酰铵、N,N'-甲叉双丙烯酰铵、过硫酸铵、三羟甲基氨基甲烷(Tris)、三羟甲基甘氨酸(Tricine)、盐酸、氢氧化钠、四甲基乙二胺(TEMED)、核黄素、甘氨酸、蔗糖、溴酚蓝、三氯乙酸(TCA)、考马斯亮蓝G250、95% 乙醇(均为上海生工生物工程有限责任公司) .电泳采用MV-Ⅱ型双垂直板微型电泳系统。

1.1. 2 染色液、脱色液的配制见表 1.1.2 实验方法1.2. 1 制胶取小烧杯,根据预定胶浓度,吸取定量的凝胶应用液,依次加入分离胶应用液、水、TEMED,慢速搅拌,并在真空干燥器中抽气 3 min.加入过硫酸铵轻轻搅拌后,立即将胶液沿玻壁注入倾斜一定角度的垂直板型凝胶玻璃板模具中,至距上沿约 3 cm 处。

然后用滴管沿玻璃板内壁缓缓注入一层蒸馏水隔离空气,室温垂直放置,使凝胶液聚合。

30 ~40 min 后分离胶完全聚合,倾出分离胶上的覆盖层液体,用滤纸条吸干残留水分。

注入浓缩胶(小心不要产生气泡) ,将胶液加到距玻璃顶端 1 cm 处插入样品模具梳子,放在紫外灯下,使凝胶聚合。

胶凝后,去掉硅胶条。

将凝胶板安装在微型电泳槽上。

在内外缓冲液槽中均加入电极缓冲液,小心拔出样品槽模具,加样。

TY-80S脱色摇床概述

TY-80S脱色摇床概述

TY-80S脱色摇床概述主要用于电泳凝胶分离谱带的固定,考马斯蓝染色和脱色时的振荡晃动,硝酸银染色时的固定,染色显影等,放射自显影实验中X光底片的显影、定影,电泳转移后纤维素膜的进一步处理,抗原—抗体的反应和染色,分子杂交,细胞培养等.凡样品需要在溶液中晃动的实验均可选用该仪器。

仪器采用高精度减速电机驱动,振荡平稳,噪音低,振荡速度可任意调节(无级变速),连续使用.TY-80S脱色摇床技术参数。

1 振幅: 10mm(以水平面为零度上下各8度,摇摆式)2 功率; 20W3.振荡速度: 0~120次/分(无级调速)4.工作台面积:280×220mm5. 工作时间:连续或0-120分钟任意调节6.电源:220V ±10V 50HZTY-80S脱色摇床使用安全须知使用本产品切记遵守下列安全预防措施:1.读全部使用说明书。

2.用户提供的插座的电气额定参数应不小于本机的电气额定参数并有良好的接地措施。

3.更换保险丝时,应将插头从插座中拔出。

4.电机或电气设备故障后,应有专业人士修理,使用生产厂家未推荐的附件会造成一定的质量问题。

5.在有儿童的环境中使用,应严密注意。

6.使用过程中,严禁将手指伸入运动的间隙中。

7.仪器在运动过程中严禁移动。

8.仪器的工作平台不能过于平滑(譬如瓷砖等)。

9.仪器在高处使用中,应有人看管。

10.擦洗机器时,应先拔掉电源。

TY-80S脱色摇床使用说明1.转速范围捏中速使用,可延长仪器的使用寿命。

2.仪器应放置在平稳的地面上,环境应清洁整齐,温度适中通风良好。

3.仪器使用前,先将调速旋钮置于最小位置。

4. 选择定时,将定时旋钮调至“定时”或“常开”位置。

5.通外电源,将电源开关至于“开”的位置,指示灯亮。

缓慢调节调速旋钮,升至所需转速。

6.次停机前,必须将调速旋钮置于最小位置,关电源开关,切断电源。

TY-80S脱色摇床维护保养1.正确地使用和注意仪器的保养,使其处于良好的工作状态,可延长仪器的使用寿命。

SG-3021系列脱色摇床

SG-3021系列脱色摇床

SG-3021系列脱色摇床
产品介绍
该产品是我公司与中科院有关科研单位联合研制的最新摇床,该仪器广泛应用于各种凝胶的染色、脱色、凝胶的固定,考乌斯蓝染色和脱色时的晃动,硝酸银染色时的固定、染色、显影。

放射自显影实验中X光底片的显影、定影。

电泳转移后纤维素滤膜的进一步处理。

抗原-抗体的反应和染色、分子杂交。

细胞培养等以及其它需要在溶液中晃动的实验均可选用该仪器。

是同类产品中技术先进和质量可靠的产品,运行平稳,噪音小,振荡速度可无级调节,调节范围宽,可配多种烧瓶,满足不同客户需要,是生化、生物工程、教学、微生物及医学等行业研究和生产中的优选设备。

无级调速,质量可靠、性能稳定、无噪音、不锈钢工作台,外型美观且可放入低温及恒温箱中使用。

一、脱色摇床使用方法:
将脱色摇床放在平稳的工作界面上,轻轻向下压迫,仪器底部有四只吸盘会自动吸住台面。

若移动仪器工作位置,须逐个拔起吸盘,方可移动。

直接电源220V 50Hz,将电源开关置于"NO"位置,指示灯亮。

调节"速度调节"旋扭,选定合适的晃动频率即可工作。

工作平面可承担两公斤左右重量进行正常实验。

实验结束后拔下插头,以保证安全。

二、脱色摇床应存放于干燥、通风、无腐蚀气体的地方。

工作台面上面不要堆放重物。

实验溶液溢出后立即擦干。

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订货信息:。

M5新型快速蛋白染色试剂盒使用说明书

M5新型快速蛋白染色试剂盒使用说明书

101422-186M5新型快速蛋白染色试剂盒使用说明书产品名称单位货号M5新型快速蛋白染色试剂盒20T MF281-01M5新型快速蛋白染色试剂盒60T MF281-03【储存条件】室温密封保存。

【产品简介】新型快速蛋白染色试剂是一种本公司开发的最新蛋白染色试剂,它是基于一种最新的偶离子染色技术研制而成。

它的独特染色成份可以迅速的渗入蛋白凝胶,并选择性的结合蛋白条带,因此不需要脱色就可以直接观察,缩短整个蛋白染色时间至1-1.5个小时。

同时由于染料和蛋白的亲和度大大提高,因此它的敏感度可以比传统考马斯亮兰染色高5-10倍。

由于它的敏感度和快速的特点,该产品正逐渐的替代了传统考马斯染色的方法。

【产品特点】1.敏感度高,比传统考马斯染色高5-10倍。

2.速度快,整个过程大约需要1-1.5个小时。

3.肉眼可以直接观察染色过程而且不需要脱色,灵活方便。

4.条带更加锐利和清晰。

5.在5-1500ng 范围内有良好的线性关系,大大优于传统染色。

【产品组分】MF281-01MF281-03染色液A(100x)5ml 15ml 染色液B(100x)5ml 15ml【注意事项】1.染色液含有甲醇,为保护您的健康,请戴手套操作,如溅入眼睛应该用大量清水清洗。

2.染料有时会在容器壁上析出形成沉淀,因此染色液每次使用前充分混匀,将壁上可能析出的沉淀重新溶解,取用后,应该立即旋紧瓶盖,避免长时间暴露于空气中造成挥发,变质,pH 改变等不良影响。

3.需要用户自备甲醇和醋酸。

101422-186************【使用方法】0.75毫米厚4-20%的mini -PAGE 胶提示:各操作步骤都要保证足够量的液体盖过胶,并且在摇床上中速振摇进行。

准确配制30%甲醇/7%醋酸溶液备用,浓度误差越小越好,最大不应该大于0.5%,否则可能影响染色效果。

1.电泳后用清水冲洗胶30-60秒钟,然后将PAGE 胶放置于一个适当大小容器中,根据胶大小倒入50ml 的30%甲醇/7%醋酸溶液摇床上漂洗固定30分钟。

sds-page实验

sds-page实验

实验一SDS-PAGE凝胶电泳一、实验目的通过SDS-PAGE凝胶电泳,将待测蛋白质与标准Marker对比,粗略得到未知蛋白相对分子质量。

二、实验药品主要试剂药品凝胶储液 5.002ml 丙烯酰胺30g甲叉双丙烯酰胺0.8gtris 272.3gHClAP 3g甘氨酸144.2gSDS 15gdHO2TEMED 21.67ul乙醇750ml (分析纯)冰醋酸180ml (分析纯)考马斯亮蓝0.29gR-250Marker 6ml6xLoading20ulbuffer注:冰醋酸应该可用正丙酸代替效果未知O可用玩哈哈纯净水代替dH2电极缓冲液(pH8.3)、凝胶储液、pH6.8和pH8.8的Tris-HCl缓冲液若有配好的最好上面的配方原料是按全部自己配置算的三、实验仪器主要仪器装置DYY-III-4型常压电泳仪DYCZ-24E电泳槽DYCZ-24E制胶装置电炉小型摇床塑料盒取样器Eppendorf管PHS-3C型pH计其他器材:100ml小烧杯500ml烧杯1L大烧杯钥匙洗瓶泡沫架四、实验步骤1、准备工作按配方配置:凝胶储液:30g丙烯酰胺,0.8g甲叉双丙烯酰胺,溶于100mldH2O中,过滤,4o C保存1MpH8.8Tris-HCl缓冲液:Tris121g溶于dH2O,用HCl调pH至8.8,定容1000ml1MpH6.8Tris-HCl缓冲液:Tris121g溶于dH2O,用HCl调pH至6.8,定容1000ml10%AP:3gAP溶于30ml dH2O10%SDS:3gSDS溶于30ml dH2O电极缓冲液(pH8.3):Tris30.3g,甘氨酸144.2g,SDS10g,定容至1000ml,使用时10倍稀释固定液:500ml乙醇+100ml冰醋酸dH2O定容至1000ml染色液:0.29g考马斯亮蓝R-250 溶解于250ml脱色液脱色液:250ml乙醇+80ml冰醋酸dH2O定容至1000ml2、制胶分离胶按以下配方制备:浓缩胶按以下配方制备:凝胶储液 4.167ml 凝胶储液0.835mldH2O 2.067ml dH2O 3.515ml1MpH8.8Tris-HCl 3.733ml 1MpH6.8Tris-HCl0.625ml10%SDS 100ul 10%SDS50ul10%AP 100ul 10%AP60ulTEMED 16.67ul TEMED5ul先向制胶板中加约2/3高度的分离胶,加水液封,静置约1h,之后倒去上层水,加入浓缩胶至顶,插入加样疏,静置40min3、样品预处理取待测蛋白液0.1ml加入Eppendorf管,20ul标准Marker加入另一只Eppendorf管,再向1管中加入24ul 6xLoading buffer,2管中加入6ul 6xLoading buffer,插入泡沫架,放入沸水浴中加热5min失活(计时),取出后放冰槽中冷却,再离心取上清液,等待点样。

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全自动凝胶染色仪和传统脱色摇床的操作对比
鼎昊源凝胶全自动凝胶染色仪在2012年中推出以来,受到了来自大学院校,科研机构和生物科技公司的广泛关注。

在全国各地的高校和科研机构的试用和购买中都取得了良好的结果,包括:
中国农科院、辽宁省农科院、江苏省农科院、天津农科院、中科院油料所、中国农业大学、华中农业大学、华南农业大学等多家单位。

DHS全自动凝胶染色仪的设计初衷是自动化完成SDS-PAGE电泳后的硝酸银染色流程,替代在传统脱色摇床上的实验操作。

通过微电脑控制的程序,DHS全自动凝胶染色仪实现了银染过程中无人值守,免除了人工加液、换液、漂洗的时间,大大提高实验室的日常工作效率,同时通过程序化操作提高实验的可重复性。

同时明显地降低了和毒性试剂的接触时间,减少对实验人员的身体伤害。

试剂在相对封闭的环境中循环,用户也不必担心实验室环境的污染。

弥补使用脱色摇床可能带来的潜在担忧。

从硬件上来看,染色仪采用了独立的共11路进液/排液管路,可靠的避免了试剂的交叉污染,达到了实验后的试剂回收。

染色仪的染色池振荡方式同摇床,并配有盖子防止显色液挥发。

软件方面,简明清晰的操作界面可以让用户自由设定进液管路、排液管路,进液量、摇动时间。

当然用户根据正常实验流程设定染色仪的程序可以达到实验的预期,但在硝酸银凝胶染色的过程中,显色过程有时不好掌握时间,那么用自动化程序是否如何实现人工干预呢?DHS 全自动凝胶染色仪的染色池采用深色透明材料制成,用户可以在显色过程中直接观察条带,可以在任何步骤中选择终止或跳过进行下一步,避免凝胶染色过度。

另外深色的染色槽排除了日光对硝酸银溶液的影响。

在我们和用户的实际使用过程中,DHS染色工作站可以轻松胜任各种常见的实验要求。

染色效果如下图,与传统脱色摇床染色等效:
此外,全自动凝胶染色仪的效果在SDS-PAGE上如考染等其他染色方法中也发挥出色。

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