超声波法提取香菇多糖实验报告

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篇一：超声波提取香菇多糖汇报

项目名称：

超声波提取香菇多糖

【工作汇报】

超声波提取香菇多糖

操作者姓名：王岚

班级技术102

专业生物技术

前言

1、实训的背景、目的和意义：

实训背景：

香菇(Lentinulaedodes)是侧耳科的

担子菌,味道鲜美,药食两用,具有较好的保健作用。香菇多糖是香菇中的重要营

养成分和有效药用组分,具有抗病毒、抗

肿瘤、调节免疫功能和刺激干扰素形成等功能,香菇还原糖对于人体糖分的补充也起着重要作用

测定蛋白质的方法可分为两大类：一类是利用蛋白质的物理化学性质来推算，如密度、折射率、紫外吸收、荧光性等；另一类是利用化学方法来计算，如定氮、双缩脲反应、染料结合反应、酚试剂反应等

主要测定方法有：双缩脲法、染料结合法、酚试剂法、紫外分光光度法、水扬酸比色法、折光法、旋光法、近红外光谱法.

目前蛋白质测定最常用的方法是凯氏定氮法，是通过测总氮量来确定蛋白质含量的方法。

实训目的及意义：

1、

2、

2、实训要解决的问题：

掌握微量凯氏定氮仪测定蛋白质含量的原理。熟练掌握微量凯氏定氮仪测定蛋白质含量的操作技术。

1、微量凯氏定氮法与常量法的同点？

2、根据08年国标，样品消化完全一小时之后，需要冷却后加20ml水，为什么会有晶体析出，成分是什么，为什么会析出？

3、香菇多糖的主要成分是什么？如何脱蛋白？

3、实训操作关键技能

1．在蒸馏过程中，切勿关闭电炉，否则会引起硼酸液的倒吸。

2．环境中氨气的含量要低。

3．定氮仪各连接处绝对不能漏气。

4．所用橡皮塞、管用前均需处理。其方法是：浸在10％氢氧化钠溶液中煮沸约10min，再经水洗和水煮10min，最后冲洗数次。

材料及方法

1、实训材料及配制、预处理技术

干香菇，蒸馏水；

电热恒温鼓风干燥箱

组织粉碎机

圆底烧瓶，铁架台，温度计

超声波发生器（带加热功能）

真空泵，漏斗，滤纸，滤布，烧杯，量筒，玻璃棒等

微量凯氏定氮蒸馏装置一套、三角烧瓶、酸式滴定管、容量瓶溶液的配制

1．浓硫酸：分析纯，95.5%

2．80%苯酚：80克苯酚（分析纯重蒸馏试剂）加20克水使之溶解，可置冰箱中避光长期储存。

3．6%苯酚：临用前以80%苯酚配制。（每次测定均需现配）

4．6mol/L氢氧化钠：120克分析纯氢氧化钠溶于500ml 水。

5．6mol/L盐酸

6.40%naoh

7.2%硼酸溶液：取100：1的体积比加入混合指示剂，摇匀后溶液呈紫红色即可

8.混合指示剂：取200ml0.2%溴甲酚绿酒精溶液与1份0.2%甲基红酒精溶液混合，贮于棕色瓶中。9.0.010mol/L的标准盐酸溶液10.蛋白质消化液：待测硫酸氨溶液2、实验技术流程路线：1.香菇预先烘干粉碎200ml热水700c超声波发生器（水预热在600c提取45min(中间停顿2次，每次过滤700c滤渣等滤液体积提取30min（中间超声波停2次，每次5min）滤合并滤液滤液量体积标识贮藏备用

将多糖浓缩液的ph值调至8～9，加热至85℃，加入氯化钙使浓度达5%(w/v)，搅拌，冷却，过滤，得脱蛋白多糖液。

1.取去完蛋白的样液5ml，然后加入6%苯酚1.0ml及浓硫酸5.0ml,

摇匀冷却，室温放置20分钟以后于490nm测光密度。请将吸光度控制在0.2-0.8制作标准曲线：准确吸取1mg/ml

葡萄糖标准溶液1.0、2.0、3.0、4.0、5.0ml置于50ml容量瓶定容，准确吸取该系列溶液各2ml，然后加入6%苯酚1.0ml及浓硫酸5.0ml,摇匀冷却，室温放置20分钟以后于490nm测光密度，以2.0ml水按同样显色操作为空白，横坐标为多糖微克数，纵坐标为光密度值，得标准曲线。

结果与分析

标准曲线：y=0.035x+0.2767

R2=0.9735

测得：

篇二：香菇多糖提取实验汇报

超声波法提取香菇多糖

研究背景：

香菇多糖的性质：香菇多糖以β~1，3葡聚糖为主，含有少量的木糖和甘露糖，具有抗病毒、抗肿瘤、调节免疫功能和刺激干扰素形成等功能

用途：抗肿瘤药。为化、放疗辅助药。主要用于胃癌、肺癌、乳腺癌。

生产技术状况：因为香菇多糖的用途广泛，提取比较方便，越来越多的人投身于这方面的研究，是的提取技术方面的大幅度提升。状况良好。

操作过程：

方案设计：香菇多糖的提取

香菇预先烘干→称取干香菇15克→粉碎→圆底烧瓶→200ml热水70℃→超声波发生器（水预热在60℃左右）→提取45min（中间停顿2次，每次5min）→过滤→滤渣→等滤液体积热水70℃→提取30min（中间超声波停2次，每次5min）→过滤→合并滤液→抽滤→滤液→量体积标识贮藏备用香菇多糖的测定：1.首先去掉香菇多糖溶液中的的蛋白质：采用氯化钙法：将溶液ph调节至8---9，加热到85℃，加入氯化钙使浓度达5%(w/v)，搅拌，冷却至室温，过滤，

得脱蛋白多糖液。

2.制作标准曲线：准确吸取1mg/ml葡萄糖标准溶液1.0、2.0、

3.0、

4.0、

5.0ml置于50ml容量瓶定容，准确吸取该

系列溶液各2ml，然后加入6%苯酚1.0ml及浓硫酸5.0ml,

摇匀冷却，室温放置20分钟以后于490nm测光密度，以2.0ml 水按同样显色操作为空白，横坐标为多糖微克数，纵坐标为光密度值，得标准曲线。

3.样品的测定：取去完蛋白的样液2ml，然后加入6%苯酚1.0ml及浓硫酸5.0ml,摇匀冷却，室温放置20分钟以后

于490nm测光密度。将吸光度控制在0.2-0.8人员分工：我们分成两组来完成实验，因为有两组待测夜要进行测定。然后标准溶液是由第一大组完成。由于操作比较简单，我们就一起完成。1人对溶液进行去蛋白，2人制作待测液，1人对待测液进行测定，并记录数据。