高考生物专题基因工程汇编
高考生物真题按知识点分类汇编92-生物技术与工程-基因工程的操作程序综合题(含解析)
五年2018-2022高考生物真题按知识点分类汇编92-生物技术与工程-基因工程的操作程序综合题（含解析）一、单选题1．（2020·浙江·高考真题）下列关于基因工程的叙述，正确的是（）A．若受体大肠杆菌含有构建重组质粒时用到的限制性核酸内切酶，则一定有利于该重组质粒进入受体并保持结构稳定B．抗除草剂基因转入某抗盐植物获得2个稳定遗传转基因品系，抗性鉴定为抗除草剂抗盐和抗除草剂不抗盐。
表明一定是抗盐性的改变与抗除草剂基因的转入无关C．抗除草剂基因转入某植物获得转基因植株，其DNA检测均含目的基因，抗性鉴定为抗除草剂和不抗除草剂。
表明一定是前者表达了抗性蛋白而后者只表达抗性基因RNAD．已知不同分子量DNA可分开成不同条带，相同分子量的为一条带。
用某种限制性核酸内切酶完全酶切环状质粒后，出现3条带。
表明该质粒上一定至少有3个被该酶切开的位置2．（2020·北京·统考高考真题）人体感染新冠病毒后，机体会产生多种特异性抗体。
我国科学家从康复者的浆细胞中克隆出针对病毒表面抗原的抗体基因相关序列，构建表达载体并在相应系统中表达，可制备出全人源单克隆抗体。
以下表述错误的是（）A．该单抗可直接用于新冠病毒的核酸检测B．在该单抗制备过程中利用了基因工程技术C．该单抗可与新冠病毒相应蛋白特异性结合D．可用抗原-抗体反应检测抗体基因表达产物二、综合题3．（2022·全国·统考高考真题）新冠疫情出现后，病毒核酸检测和疫苗接种在疫情防控中发挥了重要作用。
回答下列问题。
(1)新冠病毒是一种RNA病毒，检测新冠病毒RNA（核酸检测）可以采取RT-PCR法。
这种方法的基本原理是先以病毒RNA为模板合成cDNA，这一过程需要的酶是______，再通过PCR技术扩增相应的DNA片段。
根据检测结果判断被检测者是否感染新冠病毒。
(2)为了确保新冠病毒核酸检测的准确性，在设计PCR引物时必须依据新冠病毒RNA中的______来进行。
高三生物高考专题复习一基因工程
专题一基因工程本专题包括基因工程的发展过程；DNA重组技术的基本工具；基因工程的基本操作程序；基因工程的应用；蛋白质工程的崛起等部分。
基因工程是一门20世纪70年代以来新兴的生物科学与工程技术相结合的科学。
也叫DNA 重组技术。
它是按照人类的意愿，将某种基因有计划地转移到另一种生物中去的新技术。
现已成为生命科学中发展最快、最前沿的学科，有关生物工程的内容，己成为近几年生物高考的热点内容。
其中基因工程的操作工具和基因工程操作的基本步骤以及基因工程的成果及应用前景将是近年命题的新热点基因工程操作的三种基本工具，四项基本操作程序等内容将成为考查学生分析综合问题能力的材料；另外，针对生物工程在医药、食品、农林等高新技术产业中的应用，运用有关的生物知识指导生产和实践，对有关的生产方案、生产过程进行分析、综合评价，这也是高考的另一热点。
有关基因工程的备考，今后高考中可能涉及到本考题的热点问题，有如下几个方面：1.基因工程的基本步骤：目的基因的获取、基因表达运载体的构建、将目的基因导入受体细胞、目的基因表达的检测与鉴定几个步骤。
2.转基因技术的应用：(1)转基因动植物，如抗虫、抗病、抗逆、抗除草剂，抗倒伏的植物；产肉、产蛋量高、生长快、耐粗饲料的动物；此外，转基因动物为人类异体器官移植提供了可能。
(2)基因药物：如人造胰岛素、人造生长激素、溶血栓的尿激酶原等。
(3)基因治疗：美国对复合型免疫缺陷症的治疗；糖尿病的治疗：许多科学家希望利用基因工程手段将正常的合成胰岛素基因导入患者体内，并准确表达，以此来修复或替代失去正常功能的胰岛B 细胞，从而维持机体血糖平衡。
（4）利用遗传工程培养转基因固氮绿色植物的展望。
地球上的固氮途径有三条：生物固氮、工业固氮、高能固氮。
其中，生物固氮是植物可利用氮的主要来源。
固氮生物在农业生产及氮循环中的作用。
在氮循环中有特殊作用的几种微生物，要总结其作用。
在学习生物固氮在自然界中的意义时，要明确生物固氮是植物可利用氮的重要来源，对氮循环与碳循环加以比较，认识这两种物质循环的差异；同时，应具体分析氮循环中几种微生物的特殊作用及其在生态系统中的地位。
专题13 基因工程-2024年高考生物一模试题分类汇编(广东专用)(原卷版)
专题13 基因工程（基础题+提升题+创新题三位一体）1.（2024届·广东深圳·一模）基因工程的发展离不开理论的突破和技术的创新。
下列科学研究体现了基因工程正式问世的是（）A．艾弗里等人通过肺炎链球菌的体外转化实验证明DNA可以转移B．沃森和克里克建立了DNA双螺旋结构模型并提出自我复制假说C．科学家利用质粒构建重组DNA载体并导入受体细胞中成功表达D．科学家发现了多种限制性内切核酸酶、DNA连接酶和逆转录酶2.（2024届·广东汕头·一模）下列选项中相关“反应”与“反应条件”不一致的是（）A．A B．3.（2024届·广东江门·一模）在构建基因表达载体时，传统方法常受限于限制酶识别序列。
科研人员研发了新的DNA重组方法: In-Fusion技术。
该技术关键是要在目的基因两端构建与线性化质粒末端相同的DNA序列（即同源序列），然后用In-Fusion酶处理，使同源序列形成黏性末端，最终形成的重组质粒会在受体细胞内形成完整的重组序列。
主要操作过程如图示。
下列叙述错误的是（）A．推测In-Fusion酶的作用是识别同源序列、形成黏性末端、连接磷酸二酯键B．载体A端和B端的序列不同，可防止目的基因与质粒反向连接及自身环化C．形成重组质粒时，如果温度远高于50℃，黏性末端的碱基不容易互补配对D．该技术无需识别特定切割位点，需识别目的基因与线性质粒任意同源序列4.（2024届·广东汕头·一模）镉（Cd）是重金属污染物，具有极强毒性。
烟草作为重要的经济作物，在生长过程中容易富集Cd，Cd通过烟气进入人体，长期积累可能会引发疾病。
N1NRAMP3是定位于液泡膜参与Cd转运的蛋白，研究人员以普通烟草为材料，通过转基因技术研究NINRAMP基因的功能，为研究烟草在Cd胁迫中的适应机制提供理论基础。
回答下列问题：(1)从数据库获得NtNRAMP基因的序列，设计引物F和R后利用技术扩增得到NtNRAMP基因的cDNA 片段，测序鉴定。
高中生物基因工程考点精选全文完整版
可编辑修改精选全文完整版高中生物基因工程考点基因工程专题在高中生物中处于重要的地位，我们在生物考试时会遇到哪些相关考点?下面店铺给大家带来高中生物基因工程考点，希望对你有帮助。
高中生物基因工程考点1. 作为运载体必须具备的特点是：能够在宿主细胞中复制并稳定地保存;具有多个限制酶切点，以便与外源基因连接;具有某些标记基因，便于进行筛选.质粒是基因工程最常用的运载体，它存在于许多细菌以及酵母菌等生物中，是能够自主复制的很小的环状DNA分子.2.基因工程的一般步骤包括：①提取目的基因②目的基因与运载体结合③将目的基因导入受体细胞④目的基因的检测和表达.3.重组DNA分子进入受体细胞后，受体细胞必须表现出特定的性状，才能说明目的基因完成了表达过程.4.区别和理解常用的运载体和常用的受体细胞，目前常用的运载体有：质粒、噬菌体、动植物病毒等，目前常用的受体细胞有大肠杆菌、枯草杆菌、土壤农杆菌、酵母菌和动植物细胞等.5.基因诊断是用放射性同位素、荧光分子等标记的DNA分子做探针，利用DNA分子杂交原理，鉴定被检测标本的遗传信息，达到检测疾病的目的.6.基因治疗是把健康的外源基因导入有基因缺陷的细胞中，达到治疗疾病的目的.高中生物基因工程知识点(1)基因工程的概念标准概念：在生物体外，通过对DNA分子进行人工“剪切”和“拼接”，对生物的基因进行改造和重新组合，然后导入受体细胞内进行无性繁殖，使重组细胞在受体细胞内表达，产生出人类所需要的基因产物.通俗概念：按照人们的意愿，把一种生物的个别基因复制出来，加以修饰改造，然后放到另一种生物的细胞里，定向地改造生物的遗传性状.(2)基因操作的工具A.基因的剪刀——限制性内切酶(简称限制酶).①分布：主要在微生物中.②作用特点：特异性，即识别特定核苷酸序列，切割特定切点.③结果：产生黏性未端(碱基互补配对).B.基因的针线——DNA连接酶.①连接的部位：磷酸二酯键，不是氢键.②结果：两个相同的黏性未端的连接.C.基困的运输工具——运载体①作用：将外源基因送入受体细胞.②具备的条件：a、能在宿主细胞内复制并稳定地保存.b、具有多个限制酶切点.c、有某些标记基因.③种类：质粒、噬菌体和动植物病毒.④质粒的特点：质粒是基因工程中最常用的运载体.(3)基因操作的基本步骤A.提取目的基因目的基因概念：人们所需要的特定基因，如人的胰岛素基因、抗虫基因、抗病基因、干扰素基因等.提取途径：B.目的基因与运载体结合用同一种限制酶分别切割目的基因和质粒DNA(运载体)，使其产生相同的黏性末端，将切割下的目的基因与切割后的质粒混合，并加入适量的DNA连接酶，使之形成重组DNA分子(重组质粒)C.将目的基因导入受体细胞常用的受体细胞：大肠杆菌、枯草杆菌、土壤农杆菌、酵母菌、动植物细胞D.目的基因检测与表达检测方法如：质粒中有抗菌素抗性基因的大肠杆菌细胞放入到相应的抗菌素中，如果正常生长，说明细胞中含有重组质粒.表达：受体细胞表现出特定性状，说明目的基因完成了表达过程.如：抗虫棉基因导入棉细胞后，棉铃虫食用棉的叶片时被杀死;胰岛素基因导入大肠杆菌后能合成出胰岛素等.(4)基因工程的成果和发展前景A.基因工程与医药卫生B.基因工程与农牧业、食品工业C.基因工程与环境保护高中生物基因工程核心知识点1.“分子手术刀”——限制性核酸内切酶(限制酶)(1)来源：主要是从原核生物中分离纯化出来的。
高中生物选修三专题一基因工程知识点
高中生物选修三专题一基因工程知识点专题一基因工程基因工程的概念基因工程就是指按照人们的心愿，展开严苛的设计，通过体外dna重组和转基因技术，剥夺生物以代莱遗传特性，缔造出以合乎人们须要的代莱生物类型和生物产品。
基因工程就是在dna分子水平上展开设计和施工的，又叫作dna重组技术。
（一）基因工程的基本工具1.“分子手术刀”——限制性核酸内乌酶（管制酶）（1）来源：主要是从原核生物中分离纯化出来的。
（2）功能：能辨识双链dna分子的某种特定的核苷酸序列，并且并使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，因此具有专一性。
（3）结果：经管制酶研磨产生的dna片段末端通常存有两种形式：黏性末端和平末端。
黏性末端：当限制酶从识别序列的中心轴线两侧切开时，被限制酶切开的dna两条单链的切口，带有几个伸出的核苷酸，他们之间正好互补配对，这样的切口叫黏性末端。
平末端：当管制酶从辨识序列的中心轴线处剖开时，剖开的dna两条单链的切口，就是平坦的，这样的切口叫做元显恭末端。
2.“分子缝合针”——dna连接酶(1)两种dna连接酶（e·colidna连接酶和t4-dna连接酶）的比较：①相同点：都缝合磷酸二酯键。
②区别：e·colidna连接酶源于大肠杆菌，就可以将双链dna片段优势互补的黏性末端之间的磷酸二酯键连接起来；而t4dna连接酶能缝合两种末端，但连接平末端的之间的效率较低。
(2)与dna聚合酶促进作用的优劣:dna聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯键。
dna连接酶是（1）载体具有的条件：①能够在受到体细胞中激活并平衡留存。
②具有一至多个限制酶切点，供外源dna片段插入。
③具备标记基因，可供重组dna的鉴别和挑选。
④对受体细胞无害。
（2）最常用的载体就是质粒,它就是一种外露的、结构直观的、单一制于细菌染色体之外，并具备自我复制能力的双链环状dna分子。
高中生物专项训练试题汇编47：基因工程(含答案详解)
高中生物专项训练试题汇编47：基因工程1．获得抗除草剂转基因玉米自交系A，技术路线如图。
为防止酶切产物自身环化，构建表达载体需用2种限制酶，选择的原则是()①Ti质粒内，每种限制酶只有一个切割位点②G基因编码蛋白质的序列中，每种限制酶只有一个切割位点③酶切后，G基因形成的两个黏性末端序列不相同④酶切后，Ti质粒形成的两个黏性末端序列相同A．①③B．①④C．②③D．②④答案：A解析：为了防止Ti质粒被切成多个片段而失去应有功能，每种限制酶只有一个酶切位点，①正确；若编码蛋白质的序列中，有限制酶酶切位点，会使序列不能合成蛋白质，②错误；酶切后形成的黏性末端不同，保证了G基因不发生自身环化，③正确；若形成的黏性末端序列相同，会使Ti质粒发生自身环化，④错误，因此选择的原则是①③，故A项正确。
2．用XhoⅠ和SalⅠ两种限制性核酸内切酶分别处理同一DNA片段，酶切位点及酶切产物分离结果如图。
以下叙述不正确的是()A．图1中两种酶识别的核苷酸序列不同B．图2中酶切产物可用于构建重组DNAC．泳道①是用SalⅠ处理得到的酶切产物D．图中被酶切的DNA片段是单链DNA答案：D解析：分析图1可知，XhoⅠ有2个酶切位点，SalⅠ有3个酶切位点，这些酶切位点不重合，所以图1中两种限制酶识别的核苷酸序列不同，故A项正确，不符合题意。
图2中的酶切产物可与用同种限制酶处理的载体构建重组DNA，故B项正确，不符合题意。
由图2可知，泳道①得到了四种酶切产物，说明泳道①是由具有3个酶切位点的酶处理后得到的，即用SalⅠ处理得到的酶切产物，故C项正确，不符合题意。
限制酶识别的是双链DNA分子中某种特定的核苷酸序列，并在特定位点上切割DNA，不是识别单链DNA，故D项错误，符合题意。
3．(经典题，6分)如图为利用基因工程培育抗虫植物的示意图。
以下相关叙述，正确的是()A．②的构建需要限制性核酸内切酶和DNA聚合酶参与B．③侵染植物细胞后，重组Ti质粒整合到④的染色体上C．④的染色体上若含抗虫基因，则⑤就表现出抗虫性状D．⑤只要表现出抗虫性状就表明植株发生了可遗传变异答案：D解析：构建表达载体需要限制性核酸内切酶和DNA连接酶，故A项错误。
高考生物试题的分类汇总专题基因工程
基因工程1. （2023浙江T6,6分）天然旳玫瑰没有蓝色花，这是由于缺乏控制蓝色色素合成旳基因B，而开蓝色花旳矮牵牛中存在序列已知旳基因B。
现用基因工程技术培育蓝玫瑰，下列操作对旳旳是（）A.提取矮牵牛蓝色花旳mRNA，经逆转录获得互补旳DNA，再扩增基因BB.运用限制性核酸内切酶从开蓝色花矮牵牛旳基因文库中获取基因BC.运用DNA聚合酶将基因B与质粒连接后导入玫瑰细胞D.将基因B直接导入大肠杆菌，然后感染并转入玫瑰细胞答案：A解析：提取矮牵牛蓝色花旳mRNA，逆转录得到DNA，然后扩增，可获得大量旳基因B，A对旳；从基因文库中获取目旳基因，只要根据目旳基因旳有关信息和基因文库中旳信息进行筛选对比即可，不需要用限制酶进行切割，B错误；目旳基因与质粒旳连接需要用DNA连接酶，而不是DNA聚合酶，C错误；目旳基因需要和运载体连接后形成重组质粒再导入，并且应当用农杆菌进行感染，而不是大肠杆菌，D错误。
2.（2023江苏T13，2分）下列有关转基因生物安全性旳论述，错误旳是（）A. 种植转基因作物应与老式农业种植区隔离B. 转基因作物被动物食用后，目旳基因会转入动物体细胞中C. 种植转基因植物有也许因基因扩散而影响野生植物旳遗传多样性D. 转基因植物旳目旳基因也许转入根际微生物答案：B解析：种植转基因作物应防止对别旳植物产生基因污染，因此与老式农业种植区隔离，A对旳；动物取食转基因作物后，要通过消化吸取才进入身体，目旳基因不也许直接进入动物细胞，B错；转基因植物也许与野生植物发生杂交而出现基因交流，影响野生植物旳多样性，C对旳；目旳基因被微生物摄入细胞内后，也许进入这些微生物中，D对旳。
非选择题1. （2023全国新课标T40，分）根据基因工程旳有关知识，回答问题：（１）限制性内切酶切割ＤＮＡ分子后产生旳片段，其末端类型有和。
（２）投料运载体用EcoRⅠ切割后产生旳片段如下：为使运载体与目旳基因相连，具有目旳基因旳DNA除可用EcoRⅠ切割外，还可用另一种限制性内切酶切割，该酶必须具有旳特点是。
考点二十四：基因工程——五年(2018-2022)高考生物真题专项汇编卷 新高考版
考点二十四：基因工程——五年（2018-2022）高考生物真题专项汇编卷新高考版1.【2022山东卷】关于“DNA的粗提取与鉴定”实验，下列说法错误的是( )A.过滤液沉淀过程在4℃冰箱中进行是为了防止DNA降解B.离心研磨液是为了加速DNA的沉淀C.在一定温度下，DNA遇二苯胺试剂呈现蓝色D.粗提取的DNA中可能含有蛋白质2.【2022辽宁卷】抗虫和耐除草剂玉米双抗12-5是我国自主研发的转基因品种。
为给监管转基因生物安全提供依据，采用PC方法进行目的基因监测，反应程序如图所示。
下列叙述正确的是( )A.预变性过程可促进模板DNA边解旋边复制B.后延伸过程可使目的基因的扩增更加充分C.延伸过程无需引物参与即可完成半保留复制D.转基因品种经检测含有目的基因后即可上市3.【2021广东卷】采矿污染和不当使用化肥导致重金属镉（Cd）在土壤中过量积累。
利用植物修复技术将土壤中的Cd富集到植物体内，进行后续处理（例如，收集植物组织器官异地妥善储存），可降低土壤中Cd的含量。
为提高植物对Cd污染土壤的修复能力，研究者将酵母液泡Cd转运蛋白（YCF1）基因导入受试植物，并检测了相关指标。
回答下列问题：（1）为获取YCF1基因，将酵母细胞的全部DNA提取、切割后与载体连接，导入受体菌的群体中储存，这个群体称为________。
（2）将DNA序列插入Ti质粒构建重组载体时，所需要的两种酶是________。
构建的重组基因表达载体中必须含有标记基因，其作用是________。
（3）进行前期研究时，将含有YCF1基因的重组载体导入受试双子叶植物印度芥菜，采用最多的方法是________。
研究者进一步获得了转YCF1基因的不育杨树株系，采用不育株系作为实验材料的目的是_________。
（4）将长势一致的野生型和转基因杨树苗移栽到Cd污染的土壤中，半年后测定植株干重（图1）及不同器官中Cd含量（图2）。
据图1可知，与野生型比，转基因植株对Cd具有更强的__________（填“耐性”或“富集能力”）；据图2可知，对转基因植株的________进行后续处理对于缓解土壤Cd 污染最为方便有效。
高考生物一轮专题复习专题15基因工程讲义
基因工程考点一：基因工程的概念与工具1.基因工程的概念（1）操作场所：生物体外。
（2）操作技术：转基因等技术。
（3）操作结果：赋予生物新的遗传特性，创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。
（4）操作水平：DNA分子水平。
2.基因工程的原理基因工程的基本原理是让人们感兴趣的基因（目的基因）在宿主细胞中稳定和高效地表达。
具体地说，基因工程就是在DNA分子水平上对基因进行操作的复杂技术，是将外源基因通过体外重组后导入受体细胞，使这个基因能在受体细胞内复制、转录、翻译表达的操作。
3.基因工程的诞生和发展✓基因工程的诞生（1）1944年，艾弗里等人通过肺炎链球菌转化实验证明了遗传物质是DNA，还证明了DNA可以在同种生物的不同个体之间转移。
（2）1953年，沃森和克里克建立了DNA双螺旋结构模型并提出了遗传物质自我复制的假说。
（3）1961年，尼伦伯格和马太破译了第一个编码氨基酸的密码子。
（4）20世纪70年代初，多种限制酶、DNA连接酶和逆转录酶被相继发现，为DNA的切割、连接以及功能基因的获得创造了条件。
（5）1973年，科学家证明质粒可以作为基因工程的载体，构建重组DNA，使外源基因在原核细胞中成功表达，并实现物种间的基因交流。
✓基因工程的发展（1）1982年，第一个基因工程药物——重组人胰岛素被批准上市。
（2）1984年，我国科学家朱作言领导的团队培育出世界上第一条转基因鱼。
（3）1985年，穆里斯等人发明PCR，为获取目的基因提供了有效手段。
（4）1990年，人类基因组计划启动。
2003年，该计划的测序任务顺利完成。
（5）21世纪以来，科学家发明了多种高通量测序技术，可以实现低成本测定大量核酸序列，加速了人们对基因序列的了解。
（6）2013年，华人科学家张锋及其团队首次报道利用最新的基因组编辑技术编辑了哺乳动物基因组。
4.DNA重组技术的基本工具✓限制性内切核酸酶（又称限制酶）——“分子手术刀”（1）来源：主要来自原核生物。
高考生物必备知识大串讲专题 基因工程(原卷版)
基因工程【考点梳理.逐个击破】一、基因工程的操作工具1．限制性核酸内切酶(简称限制酶)(1)来源：主要是从原核生物中分离纯化出来的。
(2)作用：识别双链DNA 分子的某种特定的核苷酸序列并切开特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键。
(3)结果：产生黏性末端或平末端。
2．DNA 连接酶3．载体(1)作用：携带外源DNA 片段进入受体细胞。
(2)种类：质粒、λ噬菌体的衍生物、动植物病毒等。
(3)条件⎩⎪⎨⎪⎧能自我复制有一个至多个限制酶切割位点有特殊的标记基因二、基因工程的基本操作程序 1．目的基因的获取(1)目的基因：主要是指编码蛋白质的基因，也可以是具有调控作用的因子。
(2)获取方法⎩⎪⎨⎪⎧从基因文库中获取利用PCR 技术扩增通过化学方法人工合成2．基因表达载体的构建 (1)构建基因表达载体的目的①使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传给下一代。
②使目的基因能够表达和发挥作用。
(2)基因表达载体的组成：目的基因、启动子、终止子及标记基因等。
3．目的基因导入受体细胞微生物细胞感受态细胞法(Ca2＋处理法)4．目的基因的检测与鉴定检测目的检测方法判断标准目的基因是否插入转基因生物的DNA DNA分子杂交技术是否出现杂交带目的基因是否转录出了mRNA 分子杂交技术是否出现杂交带目的基因是否翻译出蛋白质抗原—抗体杂交技术是否出现杂交带个体水平的检测如抗虫、抗病的接种实验是否表现出相应的特性三、基因工程的应用及蛋白质工程1．基因工程的应用(1)动物基因工程：提高动物生长速度从而提高产品产量；改善畜产品品质；用转基因动物生产药物；用转基因动物作器官移植的供体等。
(2)植物基因工程：培育抗虫转基因植物(如抗虫棉)、抗病转基因植物(如转基因烟草)和抗逆转基因植物(如抗寒番茄)；利用转基因改良植物的品质(如新花色矮牵牛)。
2．基因诊断与基因治疗(1)基因诊断：又称为DNA诊断，是采用基因检测的方法来判断患者是否出现了基因异常或携带病原体。
高考生物基因工程专题复习超全
碱基序列。
“分子缝合针” —ＤＮＡ连接酶
１.作用：连接磷酸二酯键,而不是氢键。
２.DNA连接酶的种类
E·coliDNA连接酶：连接黏性末端 T4DNA连接酶：连接黏性末端和平末端
3.DNA连接酶的作用部位：
脱氧核苷酸链上相邻的两个脱氧核苷 酸之间的磷酸二酯键
DNA连接酶
DNA连接酶无特异性，其催化DNA片段末端 形成磷酸二脂键。连接情况有两种：一是 催化互补的粘性末端连接，二是催化平末 端连接。只要是相同的粘性末端、平末端 DNA连接酶用某种生物发育的某个时期的 mRNA 反转录产生的多种互补DNA（也 叫cDNA）片段，与载体连接后储存在一 个受体菌群中，那么，这外
操作对象
操作水平
基
因
DNA分子水平
基本过程 结果
剪切→拼接→导入→表达 人类需要的基因产物
二、基因操作的工具
1、基因的剪刀——限制性内切酶 2、基因的针线——DNA连接酶 3、基因的运输工具——运载体
“分子手术刀” ——限制酶
1、来源： 主要是从原核生物中分离纯化出来的一
反转录 cDNA (互补DNA） DNA聚合酶
mRNA 反转录酶
cDNA
基因重？ 依据：目的基因的有关信息 如：根据基因的核苷酸序列 基因的功能基因在染色体上的位置 基因的转录产物mRNA 基因翻译需要酶相关的基因。 目前被广泛提取使用的目的基因有：苏云金杆菌抗虫基 因、植物抗病基因（抗病毒、抗细菌)、人胰岛素基因等。
1.基因的结构
（1）原核生物基因结构
非编码区
编码区
非编码区
…A‥………ATGTGCACGTAGTTA………‥G… 启动子 终止子 …T‥………TACACGTGCATCAAT………‥C…
高考生物基因工程梳理汇总(新教材学生版)
第 3 章基因工程第 1 节重组DNA 技术的基本工具1.P70从社会中来：番木瓜容易受番木瓜环斑病毒的侵袭。
当番木瓜被这种病毒感染后，产量会大大下降。
科学家通过精心设计，用“分子工具”培育出了转基因番木瓜，它可以抵御番木瓜环斑病毒。
DNA双螺旋的直径只有2nm，对如此微小的分子进行操作,是一项非常精细的工作，更需要专门的“分子工具”。
那么，科学家究竟用到了哪些“分子工具”?这些“分子工具”各具有什么特征呢?2.P71旁栏思考题：你能根据所掌握的知识，推测限制酶存在于原核生物中的主要作用是什么吗?3.P72旁栏思考题：DNA连接酶与DNA聚合酶是一回事吗?为什么?4.P73思考·讨论：重组DNA分子请你根据图3-3中的相关信息找到两条片段上EcoR I的识别序列和切割位点。
然后，用剪刀进行“切割”。
待切割位点全部切开后，将从下面那条DNA链上切下的片段重组到上面那条DNA链的切口处，并用透明胶条将切口粘连起来。
讨论（1）剪刀和透明胶条分别代表哪种“分子工具”？（2）你制作的黏性末端的碱基能不能互补配对?如果不能，可能是什么原因造成的?（3）你插入的DNA片段能称得上一个基因吗?5.P73到社会中去：随着生物技术的飞速发展，生产和销售“分子工具的公司大量涌现。
感兴趣的话，你可以登录这些公司的网站，查询和了解相关产品的特点、价格和使用说明等。
有些这样的公司已成功上市，你还可以通过分析公司的股票价格走势，大致了解公司的经营状况以及投资者目前对该行业的认可程度。
6.P74练习与应用一、概念检测1.DNA连接酶是重组DNA技术常用的一种工具酶。
下列相关叙述正确的是()A.能连接DNA分子双链碱基对之间的氢键B.能将单个脱氧核苷酸加到DNA片段的末端，形成磷酸二酯健C.能连接用同种限制酶切开的两条DNA片段，重新形成磷酸二酯键D.只能连接双链DNA片段互补的帖性末端，不能连接双链DNA片段的平末端2.在重组DNA技术中，将外源基因送入受体细胞的载体可以是()A.大肠杆菌的质粒B.切割DNA分子的酶C.DNA片段的黏性末端D.用来识别特定基因的DNA探针二、拓展应用1.想一想。
2023北京重点校高三(上)期末生物汇编：基因工程章节综合
2023北京重点校高三（上）期末生物汇编基因工程章节综合一、单选题1．（2023秋·北京昌平·高三统考期末）科研人员在常规PCR基础上发展出同时检测多种病原体的多重PCR技术，检测原理（a、b）及结果（c）如下图。
下列叙述错误．．的是（）A．需要针对不同病原体设计特异性引物和荧光探针B．图中b是PCR反应的复性过程C．多重PCR同时完成对4种病原体的检测D．由结果推测该检测样品中有A病原体的核酸2．（2023秋·北京昌平·高三统考期末）为探究海鲷催乳素启动子（psbPRL）的关键功能位点，将启动子区域序列进行分段截短，分别构建含荧光素酶基因的重组质粒，检测启动子的启动能力，结果如下图。
下列叙述错误．．的是（）A．将启动子序列插入荧光素酶基因的上游B．用限制酶和DNA连接酶构建重组质粒C．荧光值越高代表启动子的启动能力越强D．150-700bp之间具有提高启动能力的序列3．（2023秋·北京通州·高三统考期末）下列关于生物技术的操作过程、原理或应用的说法错误．．的是（）A．基因工程的核心环节是构建基因表达载体B．胚胎分割可以看作动物有性生殖方法的之一C．细胞膜具有流动性是植物体细胞杂交的基础D．稀释涂布平板法可用于微生物的分离与纯化4．（2023秋·北京石景山·高三统考期末）很多人认为“番茄没有小时候的味道了”，这是由于人们在选育番茄时更注重品相而忽略了风味所致。
与番茄风味相关的基因t可在90%以上的野生番茄中检测到，但仅有不到7%的栽培番茄含有此基因。
从进化的角度来看，人工选育番茄（）A．加快了新物种的形成B．扩大了番茄的基因库C．定向改变了番茄的进化方向D．为番茄进化提供了原材料5．（2023秋·北京石景山·高三统考期末）下列生物工程中所用物质与其发挥的作用，不能正确对应的是（）A．灭活病毒——诱导动物细胞融合B．重组质粒——携带外源基因进入受体细胞C．琼脂——为微生物生长提供碳源D．DNA聚合酶——催化合成新的子链6．（2023秋·北京东城·高三统考期末）人凝血酶Ⅲ是一种分泌蛋白，可预防和治疗急慢性血栓。
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专题：《基因工程》
组合姓名
一、读关于现代生物技术的资料，回答下列问题。
（6分）
胰岛素属于蛋白质类药物，对于I型糖尿病患者而言，注射胰岛素是目前有效的治疗方法之一，利用基因工程生产胰岛素使这一治疗方法能够走入寻常百姓家。
下列为分子实验室中可以进行的部分实验操作：
①筛选含有胰岛素基因的受体细胞②胰岛素基因与运载体重组
③重组DNA分子导入受体细胞④获取胰岛素基因
1.构建产生胰岛素的基因工程菌的正确流程是__________________（用题中的编号排序）（2分）。
2.构建产生胰岛素的基因工程菌的关键步骤中，必需的主要工具酶是_______、______（填编号）。
①纤维素酶②蛋白酶③限制酶④连接酶⑤溶酶菌
3.若选用大肠杆菌作为受体细胞，常采用的运载体是_________。
随着基因工程的发展，人类生活中出现了越来越多的基因工程产品，尽管目前尚未发现这些产品的不安全性，但其安全性一直备受关注。
4.你作为一名消费者，对于所消费的商品是否为转进产品应该具有_________。
A. 管理权
B. 执法权
C. 知情权
D. 立法权
7二、现代生物技术与应用（分）是制备转基因12图英国的科学家利用转基因技术培育出含有大鼠生长激素基因的巨型小鼠，字母下方的斜线指向的是相应的酶切位图中编号表示过程，小鼠的操作过程。
A～D表示限制酶，
点．。
；过程②所用到的酶是___________________ 121.图中过程①需要用到的限制酶是和
_________细胞。
得到巨型小鼠___________所用方法是___________，受体细胞一般采用12 2.图中过程③进行繁育。
后，可取其体细胞核，采用___________ 更多精品文档．
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3.从转基因生物的安全性方面考虑，上述转基因小鼠研究必须在限定范围内进行，这一做法的目的是防止____________基因向其他生物扩散。
三、回答下列有关遗传信息传递与表达的问题。
（9分）
pIJ702是一种常用质粒（图20），其中tsr为硫链丝菌素（一种抗生素）抗性基因，mel是黑色素合成基因，其表达能使白色的链霉菌菌落变成黑色菌落；而限制酶CLaⅠ、BglⅡ、PstⅠ、Sac Ⅰ、SphⅠ在pIJ702上分别只有一处识别序列。
_____键维系成双链结构。
质粒DNA分子中的两条链靠1.Ⅰ片/Sph对碱基）的SacⅠⅠ切取的目的基因置换pIJ702上0.4kb（1kb=10002.以SacⅠ和Sph中。
由此判断目的基因4pZHZ8。
上述两种质粒的限制酶酶切片段长度列在表段，构成重组质粒Ⅱ切割位点，并说明判断依据：Bgl 内部是否含有。
__________________________________________________________________________________Ⅰ联合酶切Ⅰ和PstⅠ区域长度为2.5kb，若用Clamel3.已知pIJ702上含基因的ClaⅠ/Pst 。
_____kb，则参照表4数据可断定酶切产物中最小片段的长度为pZHZ8所示。
若要筛选接纳了54.不含质粒的链霉菌在含硫链丝菌素固体培养基上的生长状况如表（填写表格中给定mL_____μg／或pIJ702pZHZ8的链霉菌细胞，所需的硫链丝菌素最小浓度应为______色。
；含有重组质粒浓度）pZHZ8的菌落呈
上述目的基因来源于原核生物，其蛋白质编码序列（即编码从起始密码子到终止密码子之间的5.，并说明依据_____对碱基，试判断对这段序列的测定是否存在错误：序列）经测定为1256 ______________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________。
9四、回答下列有关遗传信息传递与表达的问题。
（分）更多精品文档．
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在图27所示的质粒PZHZ11（总长为3.6 kb，1 kb=1000对碱基因）中，lacZ基因编码β-半乳糖苷酶，后者催化生成的化合物能将白色的大肠杆菌染成蓝色。
BamBam连接酶进行连接，最后将连接酶，再加，然后灭活DNA1.若先用限制酶HIHI切开pZHZ11质粒的3.6 kb质粒的细胞颜色为；含物导入足够数量的大肠杆菌细胞中，则含3.1 kb 。
细胞颜色为
BamBglBam HIkb的HI切开的单个目的基因片段置换pZHZ11若将两端分别用限制酶2.中HI和0.5 kb。
的重组质粒，则目的基因长度为酶切片段，形成4.9 kb EcoBam kb联合酶
切其中一种，只能获得和1.7 kb3.上述4.9 的重组质粒有两种形式，若用RIHI kb和DNA
片段；那么联合酶切同等长度的另一种重组质粒，则可获得 kb和3.2 kb两种
片段。
两种DNA片段先导入大肠杆菌细胞中克隆并鉴定目的基因，然后再将获得的目的基若将人的染色体DNA4.因转入植物细胞中表达，最后将产物的药物蛋白注入小鼠体内观察其生物功能是否发挥，那么上。
述过程属于 D.植物基因工程微生物基因工程 B.A.人
类基因工程动物基因工程 C.
五、分析有关基因表达的资料，回答问题。
取同种生物的不同类型细胞，检测其基因表达，结果如右图。
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中有一个是控制核糖体蛋白质合成的基因，则该基因最有可能是基因基因1～81.。
2. 图所示细胞中功能最为近似的是细胞与5
D.4 C.2与3B.2A.1与6 与5。
3. 判断图中细胞功能近似程度的依据是
连接后形成的新基因的功能，导入质粒前，用限制酶切割的正确位置7现欲研究基因1和基因
4.。
是
处，则切割基因时可右上图是表达新基因用的质粒的示意图，若要将新基因插入到质粒上的A5.。
用的限制酶是 D. Pst I C. Eco B
ⅢA. Hind B. EcoR I，才能确定受体细新基因与质粒重组后的DNA分子导入受体细胞的概率很小，因此需进行6.
胞已含有目的基因。
将这样的受体细51. 在已确定有目的基因的受体细胞中，若质粒的抗青霉素基因缺失了两个碱基，) ( 胞接种到含有青霉素的培养基中，该细胞中可能出现的结果是
没有表达1和7基因抗青霉素基因不能转录A. B. 质粒上的酶切位置发生改变和7不能连接 D.1C.基因专题：《基因工程》答案 6一、读关于现代生物技术的资料，回答下列问题。
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1.④②③①
2.③、④
3.质粒
4.C
二、现代生物技术与应用（7分）
1．A C DNA连接酶2．显微注射受精卵克隆/核移植35．目的/外源/大鼠生长激素
三、回答下列有关遗传信息传递与表达的问题。
（9分）
1.氢
2.含有，据表4和题意，pIJ702上原有的一个BglⅡ位点被目的基因置换后，pZHZ8仍被BglⅡ切为线状，故目的基因中必然含有一个BglⅡ位点。
3. 0.3
4. 5 ；白
6.错误因为原核生物决定每个氨基酸的碱基序列为三联密码，所以基因的编码碱基序的整数倍。
3列应为
分）9四、回答下列有关遗传信息传递与表达的问题。
（ 1.白色；白色和蓝色/白色或蓝色2. 1.8 3.5 3. 1.4
4.C
五、分析有关基因表达的资料，回答问题。
2 ．1 A．2 3．表达的相同基因最多，差异表达的基因最少B4．C5．6．筛选
B ．7 D
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