《自身抗体检测在自身免疫性疾病中的临床应用专家建议》解读

n 1.怀疑自身免疫疾病检测自身抗体
n 2.公认方法、定量/半定量/滴度
n 3.检验与临床结合
n 4.诊断标准中的项目应开展
n 5.ANA、dsDNA抗体规定
n 6.不同疾病推荐:RA、SLE等
抗核抗体的检测的推荐建议
1.ANA是自自身身免疫性疾病实验诊断的第一一级检验 2.ANA主要用用于诊断,而而不是为了监测疾病进展 3.IIFA是ANA筛查的参考方方法。其他方方法虽可采用用，但
是会出现不同的假阴性和假阳性。 4.实验室报告应注明ANA的检测方方法 5.ANA,anti-dsDNA和ENA应作为SARD及其他AID诊断
程序的一一部分
n 6、ANA–IIFA依赖于试剂、设备和其他因素，因而筛查 稀释度可因地而异。 一个ANA的异常结果应是在正常 对照人群第95百分位以上的滴度。通常而言， 以 Hep-2细胞为底物检测ANA评价成人人群SARD时，所 用的稀释度为1:160；
疾病诊疗临床路径
检测程序的标准化
临床血清（浆） 标本IIF筛查
阳性
阴性但有自身 免疫病症状
特异抗体检测及确认试验
NCCLS I/LA2-A
实验室方方法的选择及结果的确认
ANA初筛
95%～99%可排除SLE （－） SLE治疗缓解
病情特重（大大量IC沉积消耗抗体） （＋）低滴度 常⻅见于RA等其它自自身身免疫性疾病 高高滴度 可作为诊断SLE的依据
抗CCP抗体研究回顾
1999
发现抗CCP对RA的特异性
1993
1997
抗聚丝蛋白白抗体(AFA)群的抗 原决定簇与瓜瓜氨酸残基有关
抗核周因子子(APF)靶抗原: ----前聚丝蛋白白部分去磷酸化产物(Simon, 1993)
1979 1964
IFA:以大大鼠鼠食食管上皮皮细胞角角质层为底物的RA特异性的抗体( 抗角角蛋白白抗体,AKA)(Young BJJ.Br Med J.1979,2:97)
自自身身抗体检测的一一般原则
n 筛查性试验与确诊性试验项⺫目目的合理组合 n 选择相关的自自身身抗体检测项⺫目目 n 切忌盲⺫目目的全面面检测 n 实验中应同步设置阳性和阴性对照
筛查实验与确认实验存在差异?
n 筛查实验 抗原含量丰富、抗原存在分布不均、含量过 低,不同处理方法对特定抗原的破坏 可能导致部分特异性抗体的漏检
检测、预后判断
为什么要作自身抗体检测
n 自身抗体产生是自身免疫疾病（AID）的基本特征 n 自身抗体成为绝大多数AID的血清学标记物 n 自身抗体检测用于AID的定义和分类 n 自身抗体检测是AID诊断和鉴别诊断的重要依据之一 n 某些自身抗体可用于AID活动度监测和治疗效果评价 n 某些自身抗体可用于AID预后或累及器官的估计 n 某些自身抗体对AID发病有预警价值 n 自身抗体检测新的应用领域（肿瘤、感染、血栓）
n 一、预测疾病
n AMA可在原发性胆汁性肝硬化发病前十年发现 n 抗胰岛细胞抗体可在I型糖尿病发病前5年检出。
n 二、预测疾病特异临床表现 n RA患者中CCP可预测疾病的侵蚀性 n SLE抗磷脂抗体可预测脑卒中 n SLE抗核糖体P蛋白预测神经精神症状
《自身抗体临床应用专家共识》
n 6.不同疾病推荐:RA、SLE等
1.怀疑自身免疫疾病检测自身抗体
n “非感染非肿瘤性炎症”诊断思路:
n 非感染非肿瘤性炎症是疑难病诊断思路,也是风湿免疫 科医生多年来惯用的一种临床思维。除了排除感染、 肿瘤，当然也要排除物理化学损伤、过敏、移植排斥 等导致的炎症。
n 如何知道存在炎症？不明原因发热、非特异炎症指标 CRP升高等。
CRP在风湿免疫病中的地位
二、 《自身抗体检测在自身免疫性
疾病中的临床应用专家建议》
n
中华风湿病学杂志,2014,18(7):437-443
n 1.怀疑自身免疫疾病检测自身抗体
n 2.公认方法、定量/半定量/滴度
n 3.检验与临床结合
n 4.诊断标准中的项目应开展
n 5.ANA、dsDNA抗体规定
性时，只要注明哪项anti-ENA阳性即可； n 4、当临床怀疑混合型结缔组织病时，推荐定量检测anti-RNP抗体； n 5、当临床高度怀疑并要求检测anti-ENA时，不管ANA结果如何，
也要满足临床要求。如anti-Jo-1对炎症性肌病、anti-ribosomal P 对SLE、anti-SS-A/Ro n 6.对先天性心脏传导阻滞/新生儿狼疮/干燥综合征/亚急性皮肤狼 疮；
n 7、 ANA阳性时，推荐同时报告荧光图型和最高稀释度；
n 8 、ANA–IIFA荧光图型的报告应采用标准化术语；
n 9、可能时，除了细胞核荧光图型外，其他的细胞浆和 有丝分裂荧光图型也应一并报告；
anti-dsDNA检测
n 1、临床怀疑SLE时，如ANA阳性，则还需检测antidsDNA抗体；
n 2、检测anti-dsDNA时，Farr试验和CLIFT（短膜虫免 疫荧光检测）具有高临床特异性。其他方法的特异性 较低，因而推荐这些方法检测阳性时再用Farr试验和 CLIFT加以确认，并分别报告结果；
n 3、在报告anti-dsDNA结果时应包括检测方法； n 4、anti-dsDNA结果的报告应是定量的（或CLIFT半定
IFA:以颊粘膜上皮皮细胞核周围的角角质透明蛋白白颗粒为底物的RA 特异性抗体APF(Nienhuis RLF.Ann Rheum Dis,1964,23:302)
2010 RA新诊断标准( ACR/EULAR)
RA相关的自自身身抗体
名称
类⻛风湿因子子
RA33/36抗体 Sa抗体 抗角角蛋白白抗体 抗核周因子子 抗CCP抗体 抗CB10抗体 抗BiP抗体
《自身抗体检测在自身免疫性疾病中 的临床应用专家建议》解读
武汉市第一医院 崔天盆，陈超
一、自身免疫性疾病发病机理进展
(一)凋亡清除缺陷与自身免疫性疾病
凋亡细胞释放找我信号
一、自身免疫性疾病发病机理进展
(二)中性粒细胞外捕网与自身免疫性疾病
一、自身免疫性疾病发病机理进展
(三) CRP在风湿免疫病中的地位
Addisino病
自自身身免疫性肝炎
绝经过早（少数病例） 硬皮皮病
1型糖尿病
原发性胆汁性肝硬化
男性不育（少数病例） 多发性肌炎/皮皮肌炎
重症肌无无力力
百度文库
原发性硬化性胆管炎
交感性眼炎
混合性结缔组织病
多发性硬化症 溃疡性结肠炎
晶状体源性葡萄膜炎 系统性血血管炎
脱髓鞘疾病
克罗恩病
抗磷脂综合征
寻常型天疱疮
自自身身免疫性肾小小球肾炎
6、浆膜炎； 7、肾脏病变：尿蛋白白＞0.5g/24h或有RBC管型； 8、神经病变：癫痫发作或精神异常，多发性单神经炎，脊 髓炎，外周或颅神经病变，脑炎； 9、溶血血性贫血血； 10、WBC＜4×109/L至至少1次，或淋巴细胞＜1×109/L至至少1次； 11、血血小小板＜100×109/L至至少1次。
敏感性(%) 特异性(%)
50--70
25-45 37 33
38-62 60-70
72 70
86 93.6 78-97 87-92 70-90 96 70-88 92
2009年标准（SLE国际临床协作组-SLICC）
-------- 敏感性94%，特异性92%
临床标准：
1、急性或亚急性皮皮肤狼疮表现； 2、慢性皮皮肤狼疮表现； 3、口口腔或鼻咽部溃疡； 4、脱发； 5、炎性滑膜炎，有≥2个外周关节肿胀或压痛伴晨僵；
n 确认实验 特异性抗体数量极其有限 自身免疫性疾病患者体内存在的自身抗体多 确认实验不能代替针对总抗体筛查实验
n 检测方法敏感性、特异性差异
自身抗体检测项目合理选择
v 自身抗体临床应用： 自身抗体(谱) ↑，分型↑
v 大撒网式筛查不是好医生 v 临床需求，基本项目
检测项目、检测程序合理选择
间接免疫荧光法（IIF） ELISA 免疫印迹法（Western-blot） 酶免疫斑点法 免疫发光法
自身抗体检测目前存在的问题
n 检测人员：人、质量管理理念局限性 n 检测方法：局限性 n 检测程序：局限性 n 检测试剂、仪器：质量问题
自身免疫检验技术的影响因素
正确认识阴阳性对照与质控
肺肾出血血综合征
已明确40多种，高度相关20多；可能相关100多种
自身免疫性疾病诊断与实验室检测
n 一、病史和查体 n 二、影像学检查 n 三、组织病理学检查 n 四、实验室检查 n 1.三大常规、肝功、肾功、甲功 n 2.炎性标志物：CRP、SAA、PCT、IL-6 n 3.其他：HLA分型、T细胞 n 4.自身抗体：重要特征，诊断鉴别诊断、治疗
≤80% anti-Scl-70﹙80.0﹚, anti-Sm﹙74.1﹚, antinRNP﹙72.0﹚
≤70% ASMA﹙65.1﹚
≤60% anti-β2-GP1﹙60.0﹚, aCL﹙59.5﹚, APF ﹙57.7﹚ anti-dsDNA﹙52.9﹚, AKA﹙51.9﹚
参加277家，其中210家回报,总体回报率75.81%
≥90% ≤90%
anti-CCP﹙97.1﹚, AMA﹙96.7﹚, anti-M2﹙96.0﹚, RF﹙94.7﹚, anti-SSB﹙93.1﹚, anti-SSA﹙91.5﹚
ANA ﹙89.4﹚, anti-Jo-1﹙87.1﹚, anti-MPO﹙86.9﹚, anti-rRNP﹙82.6﹚, ANCA﹙82.4﹚, anti-PR3﹙82.4﹚
ENA抗体谱检测
（－）不能排除
抗dsDNA、Sm、rib抗体 （＋）可帮助诊断
自身抗体检测的质量管理
n 室内质控 n 实验室间比对：项目少 n 专业机构：NCCL 2002年ANA，2009年
353家；CAP>40项目。 n 专业学会：中华风湿病协会 n 商业公司
2012自身抗体比对最低准确率
量）； n 5、应以相同方法用于anti-dsDNA的定量检测和SLE病
情活动监测；
anti-ENA检测
n 1、ANA阳性时，推荐还检测anti-ENA； n 2、检验报告中应注明anti-ENA检测方法。如与IIFA或临床诊断偏
差时，应考
n 虑用其他检测方法； n 3、应分别报告anti-ENA（包括阴性结果）；如ANA筛查结果为阴
n 当临床高度怀疑“自身免疫疾病”应检测自身抗体。
自自身身免疫病的“病谱”
器官特异性
非非器官特异性
桥本甲状腺炎 扩张性心心肌炎
自自身身免疫性溶血血性贫血血 系统性红斑狼疮
原发性粘液水水肿 恶性贫血血
特发性血血小小板减少性紫癜 干燥综合征
甲状腺机能亢进 自自身身免疫性胃炎
特发性粒细胞减少症 类⻛风湿关节炎
《自身抗体临床应用专家共识》
n
中华风湿病学杂志,2014,18(7):437-443
n 1.怀疑自身免疫疾病检测自身抗体
n 2.公认方法、定量/半定量/滴度
n 3.检验与临床结合
n 4.诊断标准中的项目应开展
n 5.ANA、dsDNA抗体规定
n 6.不同疾病推荐:RA、SLE等
预测自身抗体
《自身抗体临床应用专家共识》
n
中华风湿病学杂志,2014,18(7):437-443
n 1.怀疑自身免疫疾病检测自身抗体
n 2.公认方法、定量/半定量/滴度
n 3.检验与临床结合
n 4.诊断标准中的项目应开展
n 5.ANA、dsDNA抗体规定
n 6.不同疾病推荐:RA、SLE等
2. 公认方法、定量/半定量/滴度
n
中华风湿病学杂志,2014,18(7):437-443
n 1.怀疑自身免疫疾病检测自身抗体
n 2.公认方法、定量/半定量/滴度
n 3.检验与临床结合
n 4.诊断标准中的项目应开展
n 5.ANA、dsDNA抗体规定
n 6.不同疾病推荐:RA、SLE等
《自身抗体临床应用专家共识》
n
中华风湿病学杂志,2014,18(7):437-443
《自身抗体临床应用专家共识》
n
中华风湿病学杂志,2014,18(7):437-443
n 1.怀疑自身免疫疾病检测自身抗体
n 2.公认方法、定量/半定量/滴度
n 3.检验与临床结合
n 4.诊断标准中的项目应开展
n 5.ANA、dsDNA抗体规定
n 6.不同疾病推荐:RA、SLE等
抗环瓜瓜氨酸肽抗体（抗CCP抗体）