冠心病患者TNF-a 水平及其基因多态性的研究

!# 体重指数 + " * / 3 8 G G ; < 3 2 W U F 5F R
& N ’ N !!@ L M 扩增
! H 7 = E #基因型频率和 等 位 基 因 频 率 用 & 检 验 ! 计量资料采用均数 [ 标准 差 " 表 示! 进 行3 检 F[>#
以 /"$ 以上 统计在 , 验! N $ ) 为差异显著 ! G G& & N ) . 软件包上完成 %
!! 结 ! 果
C B A!: ; < 患者一般临床资料和血清 ! & + . # 水 平的 比较 ! 表A " 两组之间在 年 龄 $ 性 别$ 吸 烟$ 体重指数等方面 ! 但 冠心 病组 伴 高 血 压 $ 差异均无显著性 " /#$ N $ )# 高血脂 $ 糖尿病者 较 多 % 冠 心 病 组 的 血 清 H 7 = E #水 平显著高于对照组 " # % /"$ N $ )
! $ * 1 2 3 4 * 3 5 67 * 8 + 9 1 : ; 1 < 5 2 1 3 5 2 9 + * 9 *$ # * 7 + -! 5 > + 3 1 : 5 6? @ A 1 -B + C * 2 > + 3 @ A 1 -’ ( $ $ " $$ D A + 1" 0 =( 0 =$?
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& N ’ N ’! 酶切结果的电泳检测 取酶切产物 ’ 加& J! J 加样缓冲液于 #Z 聚丙 $ $ 烯酰 胺 凝 胶 电 泳 分 离 后 ! 用 &Z 溴 化 乙 锭 浸 染 ! 使用法国 c ( $ F ; < J凝 胶 成 像 及 分 析 系 统 判 断 结 果 并拍照 % A B F! 血清 ! & + . # 水平测定 采用 双 抗 体 夹 心 D J K , * 法检测血清 H 7 = E #水 平" 按说明书进行 # A B G! 统计学处理 采用直接计数法计算基因型和等位基因的频 然后经 ? 表明各 率! 8 0 3 E V 2 ; < 4 2 0 5 R 遗 传 平 衡 定 律! 基因型频率已达遗传平衡 ! 具有群体代表性 %
$ 8 1 6 2 0 / G : 9 2 0 / G ; G * ," !! 炎性反应在动脉粥样硬化 ! 形成中有重要作用 $ 被认为是粥样斑块形成的病理
&$ !& 基 础 之 一% (肿 瘤 坏 死 因 子 E 1 F / 0< 2 : 0 / G ; G #!
正常组 织中为 $Z $ 因此 H H 7 = 阳性率为 ’ )Z $ 7 = E # 与冠心病 的 进 程 密 切 相 关 ( 本 研 究 通 过 检 测 血 清 限制性片段长度 H 7 = E E # 水平及 应 用 聚 合 酶 链 反 应 多态 性 ! / 9 F 2 0 8 G 2: 6 8 ; <0 2 8 : 1 ; / < E 0 2 G 1 0 ; : 1 ; / <> 0 8 E . 5 R 检测 H F 2 < 1 9 2 < 1 6. / 9 F / 0 6 ; G F$ @ L M E M = J @" 7 = E # R 5 . 启动子上游 I# + + ) % L H 及 I# " ( L * 基因多态性 $ 为 了解 冠 心 病 患 者 H 7 = E E # ) %) I# " (位点基因型的 # 分布特点 $ 基因型与冠心病风险的相关性提供一定 的实验依据 (
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遗!传 ! " # " $ % & ’ (" ) * + + ! $ $ ’!!!!!!!!!!!!!!!!! "卷! , .#
&! 材料和方法
A B A! 研究对象 冠心病患者 & 男# 女( 平均年 ! & 例! ’ 例! % 例! 龄" 来自! ’ N C $[C N ’ $ 岁! $ $ &年’月至! $ $ (年’ 月武汉大学人民医院心内科病房或冠心病监护病房 " ! 病例以 & L L \# C % C 年 Y? ] 关于缺血性心脏病的 命名和诊断标准 为 依 据 ! 根 据 病 史$ 临 床 表 现$ 心电 图$ 心肌酶谱 等 确 定 诊 断 " % ( # 例经冠脉照影确诊# 其中 心 肌 梗 死 患 者 ’ 心绞痛患者% % 例! ’ 例 %& & ) 例年龄 匹 配 的 健 康 对 照 者 ! 男性% 女性’ ’ 例! & 例! 平均年龄 " 无高血压 $ 糖尿病 $ 心脏 & N ( $[& ’ N ! $岁! 病病史 % 所有研究 对 象 均 为 湖 北 地 区 汉 族 人 群 ! 且 无血缘关系 % A B C! 标本收集 取空腹 & 分成两份 ! 一份不抗凝 ! ! 小时静脉血 ! 一份为 D X H * E ^ ( 抗 凝 血% 冠 心 病 患 者 于 入 院 后 用 药前取血 % A B D! 主要试剂 限制性内切酶 H & 1 7 * 聚 合 酶$ 3 7 H @$ 8 ; K为 EX 血清 H _ + K产品 & 7 = E #水平测定试剂盒由晶美生物 工程 " 北京 # 有限公司提供 % A B E! 实验方法 & N ’ N &! 基因组 X 7 * 提取 采取 7 8 K法提取外周血白细胞 X 7 * %
# ! " = > ) % , ( H F / 0 < 2 : 0 / G ; G= 8 : 1 / 0 E H 7 = E ; G8: 1 / U ; < 2 1 6 8 1 6 8 GF 1 ; 9 2 > < : 1 ; / < G B K 1 : / 9 34 2 ; < A / 9 A 2 3 ; <: 8 0 3 ; / A 8 G : E # # 5 . $ 9 8 0. 8 1 6 / 6 G ; / 9 / B Q ; A 2 < 1 6 ; G. / G G ; 4 ; 9 ; 1 V 2F 2 8 G 0 2 3G 2 0 FH 7 = E 2 A 2 9 4 J K , *8 < 3G 2@ L M E M = J @F 2 1 6 / 3 G 1 / #9 . 5 R 5 5 5D ! 2 W 8 F ; < 2 1 6 23 ; G 1 0 ; 4 1 ; / </ >H 7 = E / : GR 2 < 2. / 9 F / 0 6 ; G F8 1I# ) %8 < 3 I# " (G ; 1 2 G ; <: / 0 / < 8 0 2 8 0 1 3 ; G 2 8 G 2 L ? X" #9 5 . 56 ! $ >L ? X; G6 ; 6 2 0 1 6 8 <1 6 8 1/ > : / < 1 0 / 9 G / "$ N $ )" 8 1 ; 2 < 1 G8 < 3F 8 1 : 6 2 3: / < 1 0 / 9 G BY 2 > / < 3 1 6 2G 2 0 F9 2 A 2 9 / >H 7 = E #/ R . ! " $ I# " (R 2 < / 1 28 < 38 9 9 2 9 26 8 A 2G ; ; < ; > ; : 8 < 1 3 ; > > 2 0 2 < : 24 2 1 V 2 2 2 < 1 V /R 0 / G /"$ N $ ) 8 < 31 6 2 0 28 0 2< /3 ; > > 2 0 2 < : 2; < 5 . R . 1 V /R 0 / G8 1I# ) %G ; 1 2 B . # * ? ’ $ % 6 ) H F / 0< 2 : 0 / G ; G= 8 : 1 / 0 E : / 0 / < 8 0 2 8 0 1 3 ; G 2 8 G 2 2 < 2. / 9 F / 0 6 ; G F #* 56 R 5 . 3@
% %& ’$ )& $ 而且 + H 7 = E 8 0 8 1 6等 " 应用免疫组织化 #升 高 学和原位杂交技 术 对 人 类 粥 样 硬 化 斑 块 进 行 检 测 $
发现典型 斑 块 中 H 轻度病变中 7 =阳性率为# #Z $
收稿日期 ! 修回日期 ! ! $ $ ( & & & %" ! $ $ ’ $ ( & ) 基金项目 ! 湖北省自然科学基金资助项目 ! " % ! " & ! $ $ ( * + * & # ( , / 0 1 2 34 1 6 27 8 1 0 8 9, : ; 2 < : 2= / < 3 8 1 ; / </ >? 4 2 ;@ 0 / A ; < : 2 7 / B ! $ $ ( * + * & # ( . . 5 作者简介 ! 向萍霞 ! $ 女$ 湖北武汉人 $ 硕士研究生 $ 研究方向 # 炎性因子与冠心病 (D # & C % #’" E F 8 ; 9 2 G 1 6 2 0 2 G 1 6 2 0 ; < 8 B : / F "G
表 A! 两组一般临床资料和血清 ! & + . # 水平比较 ! , > 2 ’A!H , ) ’ 2 * 0 ’( 2 * 0 * ( , 2( 5 , % , ( ’ % * ) * ( ), 0 6) ’ % " # ! & + . 9( $ 0 % $ 2 ), 0 6: ; < #$