罗格列酮对肝癌细胞增殖的影响

增殖 抑 制 率 与 ＲＳ 的浓 度 一 间 里 正相 关 ；Ｃ 检 测 发 现 。．Ｇ 使 肝 癌 ＨｅＧ ． Ｇ 时 ＦＭ ＲＳ ｐ ２细 胞 的 细胞 周 期 被 阻 滞 于 Ｇ１ 。而 进 入 ｓ 期 期
的细 胞 明 显 减 少 ， 呈浓 度 依 赖 ； Ｇ 干 预 后 ， ｙｌ Ｄ１ ｍ ＮＡ及 蛋 白表 达 在 肝 癌 细 胞 中 下调 。 结＂ ： Ｓ 依 赖 激 活 Ｐ 且 ＲＳ Ｃ ｃ ｎ 的 Ｒ． ｉ ／Ｉ Ｇ ￣Ｋ Ｐ
织 中呈现 表达 ，被 配 体激 活后 能 抑 制人 结 肠 癌 、 胃
癌 、乳 腺 癌 等 多种 肿 瘤细 胞 的增 殖 【 卜 。罗 格列 酮 。
作者 简 介 ： 康 敏 （ ７ 一） ， 师 ， 士生 １ ５ ， 讲 ９ 女 硕
肝癌细 胞增 殖 的影 响及 其 机 制 ， 探讨 Ｐ Ａ 作 为肝 ＰＲ
ｔ ａｅ ｃｐｏ ａ ｍａ（Ｐ Ｒ／ ｏ ｒｌｅａｉ ｆ ｕ ａ ｅ ａ ｃｒｉｏ ａｃｌＭｅｈ ｄ ： ｕ ａ ｅ ａ ｃｒｉｏ ｉ ｔｄｒ ｅ ｔｒ ｍ ｖ ｅ ｇ Ｐ Ａ ￣， ｎｐｏ ｆｒｔ ｎｏ ｍ ｎｈｐ ｔ ａ ｎ ｍ ｅ１ ｔｏ ｓＨ ｍ ｎｈ ｐ ｔ ａｃｎ — ） ｉ ｏ ｈ ｏ ｃ ． ｏ
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Ｃ ｕ ｔ ｇＫ ｔ８（Ｃ 一 ） ｎ ｌｓ ． ｈ ｈ ｎｅｏ ｅ ｙ ｌ ａ ｅｃ ｏ ｃｎｒｔ ｎｗ ｒ ｄ ｔｃ ｄｂ ｏ ｙｏ ｔ ｏ ｎｉ ｉ ｎ 一 Ｃ Ｋ ８ ａ ａ ｉ Ｔ ｅｃ ａ ｇ ｆ ｌ ｃｃｅ ｔ ａｈｃｎ ｅ ｔ ｉ ｅｅ ｅ ｔ ｙｆ ｗ ｃｔ ｒ ｙｓ ｃｌ ａｏ ｅｅ ｌ ｍｅ ｙ （Ｃ ） Ｔ ｅｅｐｅｓ ｎｏ ｙｌ Ｄ Ｎ ｎ ｒｔｉ ｅｅｉｖ ｓ ｇｔ ｙｒａ ｔ ｕｒｓｅ ｔ ｕｎｉｖ ｏ ’ Ｆ Ｍ ． ｘ ｒｓｉ ｆ ｃｉ ｍＲ Ａ ａ ｄｐｏ ｎｗ ｒ ｎ ｅｔ ａｅ ｂ ｌ ｉ ｆ ｏｅｃ ｎ ｑ ａｔｉｅｐ ｌ ｈ ｏ Ｃ ｎ１ ｅ ｉ ｄ ｅ — ｍｅｌ ｔ ｙ
泸州 医学 院学 报
２１ ０ １年
第 ３ ４卷
第 １ 期
Ｊ ｕ ｎ ｌｏ ｕ ｈ ｕ Ｍｅ ｉａ ｏ ｅ ｅ Ｖｏ ．４ ｏ １ ２ １ ｏ ｒ ａ ｆＬ ｚ ｏ ｄ ｃ ｌＣ Ｈ ｇ １ Ｎ ． ０ ３ １
罗格 列 酮对 肝 癌 细胞 增 殖 的影 响
康 敏， 钟德 君 ， 杜光 红 ， 美萍 任
ｃ ｒｉｏ ． ａ ｃ ｎ ｍａ
Ｋｅ ｒ ｓ ｙ ｗｏ ｄ Ｒｏ ｉｌｔ ｚ ｎｅ ｓｇｉａ ｏ ；Ｐｅ ｏ ｉｏ ｒ ｌｆ ｒ ｔ ｒａ ｔｖ ｔ ｄ ｒ ｃ ｐ ｏ ａ ｒ ｘ ｓ ｍｅ ｐ ｏ ｉ ａｏ ｃ ｉａ ｅ ｅ ｅ ｔ ｒｇ ｍｍａ ｅ ；Ｈｅ ａｏ ａ ｃｎ ｍａ ｐ ｔ ｃ ｒ ｉｏ ；Ｐｒ ｌ ｅ ａｉ ｎ ｏ ｉ ｒ ｔｏ ｆ
ｃ ｕ ｉ ｎ Ｔ ｅ ｅ ｒ ｓ ｌ ｎ ｉ ａｅ ｔ ａ ｈ ｒ ｗｔ ｉ ｈ ｂ ｔｒ ｆ ｃ ｆ ＲＳ ｓ ｍｅ ｉ ｔｄ ｔ ｒ ｕ ｈ Ｐ ＡＲ ／ ｓ ｎ ｌ ｇ ｌｓ ｏ ： ｈ ｓ ｅ ｕ ｔ ｉ ｄ ｃ ｔ ｈ ｔ ｔ ｅ ｇ ｏ ｈ— ｎ ｉ ｉ ｙ ｅｆ ｔ ｏ Ｇ ｉ ｓ ｏ ｅ ｄａｅ ｈ ｏ ｇ Ｐ ￣ ｉ ａｉ ｇ ｎ
ＲＳ ｉ ｏ ｅ ｎ ｒ ｔｏ ｅ ｅ ｅ ｎ ｒ ｒ ａ —ｔ ｕ ｒ ｓ ｅ ｔｑｕ ｎｔ ｉ ｅ ｐｏｙ ｒ ｓ ｃ ｉ ｅ ｃｉ ｎ ａ ｄ ｉ Ｇ ｎ ａ ｃ ｎ ｅ ｔａｉ ｎ ｄ ｐ ｎｄ ｎｔｍａ ｎｅ ｅ ｌ ｉ ｍｅ ｆ ｏ ｅ ｃ ｎ ａ ｉ ｖ ｌ ｍｅ ａ ｅ ｈａｎ ｒ ａ ｔｏ ｎ ｍ— ｌ ｔ
途 径能 在 体 外 抑 制 肝 癌细 胞 生 长 ， 示 Ｐ Ａ 提 Ｐ ＫＴ可 能 是 肝 癌 治 疗 的 一 个 新分 子 靶 点 。
关键词 罗格 列 酮 ； 氧 化 物 酶 体增 殖激 活 受 体 ＾； 癌 ； 殖 过 ｙ肝 增 文 献标 识 码 Ａ 文 章 编 号 １０ — ６ ９ ２ １ ） － ４ — ４ ０ ０ ２ ６ （０ １ １０ ４ ０ 中 图分 类号 Ｒ ２ ． ； ７ ．５ ３ ９２ Ｒ ３ １ ５ ３
对肝 癌 Ｈｅ Ｇ ｐ ２细 胞 增 殖 的影 响 ；流 式 细胞 仪 （Ｃ Ｆ Ｍ）检 测 细 胞 周期 ；实 时 荧 光 定 量 ｐ Ｒ 方 法 分 析 细 胞 周 期 蛋 白 Ｃ ｃｎ ｃ ｙｌ Ｄ１的 ｉ
ｍＲＮＡ 表 达 变 化 ； 疫 细胞 化 学 法 分 析 Ｃ ｃｎ ． 免 ｙｈＤ１的蛋 白表 达 变 化 。结 果 ：． 抑 制 肝 癌 ＨｅＧ２细 胞增 殖 ． Ｋ一 ＲＳ Ｇ ｐ ＣＣ ８比 色 法 显示
马来酸 罗格 列酮 购 自葛 兰 素史克 公 司 。药 物 实验 前 Ｒ Ｇ溶 解 于 二 甲基 亚 砜 （ ＭＳ 中 ， 元 血 清 培 养 Ｓ Ｄ Ｏ） 用 基 稀释 至终 浓度 ， ＭＳ 的终浓度 不超 过 ０１ 一 ０ Ｄ Ｏ ．％， ２ 。 冻存 。Ｃ Ｋ ８试剂 购 自碧 云天生 物技 术研究 所 。流 Ｃ一
式 细胞 试剂 购 自 Ｂ ｃ ｍａ ｅｋ ｎ公 司 。 荧光 定 量 Ｐ Ｒ试 剂 Ｃ
下游 引物 序 列 为 ５一 Ｃ Ｔ Ｃ Ｃ Ｇ Ｃ Ｔ Ｔ Ｇ Ｃ Ａ Ｃ Ａ Ａ Ｔ Ｔ Ｃ Ｇ
ＧＴ－３ 。
Ｃ ｃｉＤ１阳性结 果为 ３ ５ ｐ 反应条 件为 ：０ ｌ ｙｌ ｎ ８ｂ。 ３ 体 系 ３ ℃逆 转 录 １ｈ ９ Ｉ 变 性 ２ｍ ｎ ９ ℃变 性 ７ ，４ｃ 预 二 ｉ ，４ ２ ，３ 退火 ３ ，２ｏ延 伸 ４ ，共 ３ 个 循 环 ； ０Ｓ ５ ℃ ０Ｓ７ Ｃ ０ｓ ５
过 氧 化物 酶 体增 殖 物激 活 受体 （ Ｐ Ｒ 是 当 Ｐ Ａ ）
前 核 受 体 方 面研 究 的热 点 。 Ｐ Ａ ￣在 多种 肿瘤 组 Ｐ Ｒ／
（ Ｓ 是 Ｐ Ａ ￣ 的合 成 配体 之一 ， 生物 利 用度 最 Ｒ Ｇ） Ｐ Ｒ／ 其
高 ， 毒 副作用 相 对 较小 。本 文 旨在 研究 Ｒ Ｇ对 人 且 Ｓ
Ａ ｓ ａｔ Ｏｂｅ ｔｅＴ ｖｓｇｔ ｏ ｆｃ ｏ ｓ ｌａｏｅ（Ｓ ）ｈ ｇｎ ｆ ｐｒｘ ｏ ｅｐｏｉｒｔ ｃ ｂｔ ｃ ｊｃｉ ：ｏｉ ｅｔａｅ ｆ ｆ ｔ ｆｏｉｉｚｎ Ｒ Ｇ， ｅｌａｄｏ ｅｏｉ ｍ ｒｌｅａｏ ａ・ ｒ ｖ ｎ ｉ ｅｅ ｒ ｇ ｔ ｔ ｉ ｓ ｆ ｒ
ＡＣＧ 一３ 。
１１１药 品 与 试 剂 ．．
细 胞 培 养基 Ｒ ＭＩ６ ０购 自美 国 Ｇ Ｂ Ｏ公 司 ， Ｐ １４ ＩＣ
内参 磷 酸甘 油 醛脱 氢 酶（ Ａ Ｄ ）－ Ｇ Ｐ Ｈ Ｉ游引 物 序列 ＿
为 ５一 Ｔ ＡＡＧＡＴ ＡＴ ＣＣ Ｃ Ｃ ＣＡＧＣ ＡＡＴ ３ ， 一
盒 购 自 ＭＢ 公 司 。Ｃ ｃ ｎ １ 鼠抗 人 多克 隆抗体 购 Ｉ ｙｌ Ｄ 小 ｉ
癌新 的治疗 靶点 的可 能性 。
第 １ 期
康
敏 等 ： 格 列 酮 对 肝癌 细胞 增 殖 的影 响 罗
４ ５
１ 材料 与 方法
１ １材 料 ．
Ｃ ｃｉＤ１基 因 上 游 引 物 序 列 为 ５ 一 Ｔ Ｃ ｙｌ ｎ Ｃ—
ＴＡＧＣＴＧＴＣＣＴＣＣＴＧＴＣＣ 一３ ．
下 游 引 物序 列 为 ５一Ｇ Ｇ Ｔ Ｇ Ｔ Ｔ Ａ Ｇ Ｔ Ａ Ａ ｒ ＧＧ Ｃ Ｇ Ｇ
ｍｅ ａ ｅ ｃ ａ ｎ ｒ ａ ｔ ｎ ａ ｄ ｉ ｒ ｓ ｈ ｉ ｅ ｃｉ ｎ ｍｍｕ ｏ ｖ ｏ ｈ ｍｉ ａ ｔ ｏ ｅ ｐ ｃ ｉｅ ｙ Ｒｅ ｕｔ ： ｔｃ ｅ ｃ ｌ ｍｅｈ ｄ ｒ ｓ ｅ ｔ ｌ ． ｖ ｓ ｌ ＲＳ ｈ ｗ ｄ ｓｇ ｉ ｃ ｎ ｆ ｔ ｏ ｓ ｉ ｅ ｉ ｈ ｂ ｔ ｇ ｔ ｅ ｃ １ ｐ ｏｉ ｒ ｔ ｎ Ｃ ８ ａ ｓ ｙ ｉ ｄ ｃ ｔ ｄ ｔ ａ Ｇ ｏ ｌ ｎ ｉ ｉ ｔ ｅ ｐ ｏｉ ｒ ｔ ｎ ｏ ｐ ｅｌ ｎ ｉ ｉ ｎ ｅ１ ｒ ｌ ｅ ａ ｉ ．Ｃ Ｋ一 ｓ ａ ｎ ｉａ ｅ ｈ ｔＲＳ ｃ ｕ ｄ ｉ ｈ ｂ ｔ ｈ ｒ ｌ ｅ ａ ｉ ｆＨｅ Ｇ２ ｃ ｉ ｉ ｉ ｈ ｆ ｏ ｆ ｏ ｓｎ ａ ｃ ｎ ｅ ｔ ｔ ｎ ｔ ｅ ｅ ｄ ｎ ｎ ｅ ． ＣＭ ｈ ｗ ｄ ｔ ｅ ｃ ｌ ｃ ｃｅ ｏ ｐ ｅｌ ａ ｒｅ ｔ ｄ ａ ｔｇ ｙ ０ ｃ ｎ ｒ ｉ ｉ ｄ ｐ ｎ ｅ ｔｍａ ｎ ｒ ａ ０ ｍｅ Ｆ ｓ ｏ ｅ ｈ ｅ ｌ ｙ ｌ ｆ Ｈｅ Ｇ２ ｃ ｌ ｗ ｓ ａ ｒ ｓ ｔＧ１ ｓａ ｅ ｂ ｓ ｅ
ｐａｈ ｙ ｉ ｅ ｔ ｃ ｒ ｉ ｏ ｅｌｉ ｉ ｏ ｕｇ ｅ ｔ ｈａ ｔ ｗａ ｎ ｈ ｐａｏ ａ ｃｎ ｍａ ｃ ｌ ｎ ｖ ｔ ，ｓ ｇ ｓｉ ｔ ｔＰＰＡＲ￣ ｍｉｈ ｏ ｅ ｈｅ ａ ｕ ｉ ａ ｇ ｔｆｒ ｈ ｐ ｔ— ｒ ｎｇ ｇ ｔｂｅ ａ ｎ ｖ ｌｔ ｒ ｐｅ ｔｃ ｔｒ ｅ ｏ ｅ ａ ｏ
（ 州 医 学 院附 属 医院 消 化 内科 ． 川泸 州 ６ ６ ０ ） 泸 四 ４ ００
摘
要
目的 ： 察 过 氧化 物 酶 体 增 殖物 激 活 受 体 （Ｐ 观 Ｐ
） 的配 体 罗格 列 酮 （ Ｇ） 肝 癌 细 胞 增 殖 的 影响 。 法 ： 外培 ＲＳ 对 方 体
养 人 肝 癌 ＨｅＧ２细 胞 ， 用 Ｃ Ｋ－ ｐ 应 Ｃ ８比 色 法 检 测 不 同 浓 度 ＲＳ ２ 、０ １０ ２ ０ ｍｏ／ ） 不 同作 用 时 间 ＲＳ ２ ｈ ４ ｈ ７ｈ ． Ｇ（５５ 、０ 、０ １ ｌＬ 和 ｘ ． Ｇ（４ 、 ８ 、２ ）
ＥＦＦ ＥＣＴＳ ｏＦ ＰＰ ＡＲＴ ＬＩ ＧＡＮＤ ＲｏＳ ＧＬＩ Ｉ ＴＡＺｏＮＥ ｏＮ ＰＲｏＬＩ ＦＥＲＡＴＩ ｏＮ ｏＦ ＨＵＭ ＡＮ ＨＥＰ ＡＴｏＣＡＲＣＤ ｏＭ Ａ ＣＥＬＬＳ
Ｋａ ｇ Ｍｉ ，ｅ ｌ ｎ ｎ ｔａ
Ｄ ｐ ｒ ｅ ｔｆＤｇ ｓ ｎｔｅＡ ｌ ｔｄＨ ｓ ｉｌｆＬ ｚｏ ｄｃ ｏ ｅｅ ｅ ａｔ ｎ ｉ ｔ ， ｆ ｉ ｅ ｏｐｔ ｕｈ ｕＭｅ ｉ Ｃ ｌ ｇ ｍ ｏ ｅｏ ｈ ｉ ａ ａｏ ｌ ａ ｌ
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