检验与干扰

检验分析出现的干扰
随着现代医学的发展，临床医学检验的作用显得也越来越重要，并且已成为当下医疗中至关重要的组成部分。

通过对患者体内各项指标的检测，为临床诊断疾病、检测疾病发展提供了重要帮助。

因此检验质量的优劣会对诊断和治疗带来直接影响，而检验质量的提高关键在于减少检验过程中的干扰。

本文将从检验前、检验中、检验后三个方面对于检验过程中一些常见的干扰因素进行简述。

一、检验前存在的干扰因素
1.患者生理因素对检验的干扰
年龄对试验结果会产生影响：不同年龄阶段器官功能会发生变化, 从而影响血液中某些试验参考值的不同。

例如新生儿细胞数量和血红蛋白一般都会高于成人。

健康儿童由于骨质生长与发育导致成骨细胞、破骨细胞的活性增加, 碱性磷酸酶活性明显升高, 是健康成年男子的 3倍。

性别，时间也会对检验结果产生影响：性别差异体现在多种检测项目上，例如血常规测定的细胞数量一般男性高于女性，而生化检测中男性的肌酐及肌酸激酶在血清中的活性或浓度一般来说也高于女性。

体内随着各种代谢作用，各项物质浓度也产生了变化，某些检测指标在一天内有较大波动。

血清皮质醇在晨6点钟左右达最高值, 随后下降, 午夜12点至最低值；血液促甲状腺素在深夜达峰值，在正午时分为最低值；生长激素在人清醒时水平很低，在入睡后水平升高。

季节循环通常对人体指标影响不大，但甲状腺素在夏天比冬天低20％，而25羟维生素D夏天比冬天高。

生活习惯对检验结果的影响：如果持续饮酒，通过酶诱导作用，血清肝酶如γGT 等活性增加。

吸烟能使血清HDL-C水平降低，降低的程度与每日吸烟的数量相关。

2.患者身体状态对检验的干扰
饮食对检验结果的干扰：多数实验尤其对于生化检验，采血前应禁食12小时, 否则血脂等结果会升高，或因脂肪食物被吸收后形成脂血造成光学干扰，从而对检测结果造成干扰。

食用高蛋白食物会使氨、尿酸和尿素值大幅升高。

食用动物肝脏，肉类则会造成大便隐血试验的假阳性。

体力活动对结果的干扰：运动会引起血液成分的改变, 例如剧烈运动会造成红细胞数量检测值的改变。

患者身体状况出现不稳定时，检测结果和标志值有很大差异性，直接导致凝血检测的准确度，出现这样的例子很多，比如剧烈运动、大量体力活等，大大增加了纤溶活性增高。

所以应该嘱咐患者在安静状态或正常活动下采集标本。

3.药物对检验结果的干扰
药物对检验的干扰：药物一般通过直接参与检测反应、激活或抑制检测反应、颜色干扰等影响检测结果。

如水杨酸盐与Folin 试剂的反应方式与尿酸和该试剂的反应方式相同, 故水杨酸盐可干扰尿酸的测定。

某些药物可以产生荧光, 可以抑制和淬灭由分析物产生的荧光, 因此对荧光分析法产生干扰。

药物还可以引起浊度或形成沉淀, 对各种光度法均可产生干扰。

有的药物可以改变反应混合物的理化条件, 特别是 pH 值, 维生素C通过降低pH值，干扰Jaffe 反应测定肌酐。

药物通过其化学性质，特别是药物或其代谢产物的氧化还原性质，对检验结果可产生很大的干扰。

维生素C、多巴胺、左旋多巴、去甲肾上腺素、肾上腺素等药物、具有较强的还原性，对酶偶联Trinder反应测定尿酸、葡萄糖、胆固醇和甘油三酯有明显的负干扰。

一些药物直接干扰被测定的成分，当用磷钨酸法测定尿酸时，还原性的青霉素胺本来应该产生一个假性高的尿酸浓度，但由于形成了青霉素胺尿酸复合物而产生了假性降低的结果，青霉素胺尿酸复合物的还原性比尿酸和青霉素胺的还原性都弱。

4.标本的采集情况对检验的干扰
采样时间对检验结果的干扰：做OGTT试验时需要在特定时间段分别采集血液。

而在肥达反应中，血清中的凝集素在发病的第一周出现，第二周阳性率最高，到第四周达 90％，所以应5 —7 天抽血一次，每次效价依次增高对伤寒有诊断价值。

心肌损伤标志物主要是肌红蛋白、肌钙蛋白和肌酸激酶，这三项指标发病时间各不相同，分别在发病2~4h、4~12h 和6~9h，阳性率最高。

因此采样时如果没在最佳采样时间采样，就会导致结果的偏差而不能给临床提供正确的检测。

采血体位对检验结果的干扰：直立体位血液相对浓缩，久卧时血液相对稀释。

直立位时，水和电解质从血管逸出，造成血浆蛋白、酶类、钙、激素类等浓度上升而醛固酮、肾上腺素血管紧张素和去甲肾上腺素都有7%~70%的升高。

卧位时血浆蛋白等指标浓度又会下降10%~15%。

止血带使用不当对检验结果的干扰：止血带压力过大或止血时间过长均可使血管内皮细胞释放组织性纤溶酶激活物，使纤溶活性增强或加速血小板的激活及血小板因子Ⅳ分泌增加。

反复攥拳以运动上臂使静脉暴露更明显，这种习惯会使血钾值上升0.8mmol/L 。

血液标本使用抗凝剂不当对检验结果的干扰：血沉试验中，如果枸橼酸盐比例不正确会影响血沉结果。

使用肝素钠抗凝血浆进行生化检测不仅直接影响电解质结果，导致钠钾钙测定值降低，而且亦间接影响葡萄糖浓度下降，纤维蛋白原增加。

肝素会增强凝血酶活性，干扰凝血项目的检测。

使用EDTA-K2抗凝的血浆会造成钾离子检测的升高，而亚铁离子，钙离子，镁离子则会减少。

标本的运送对检验的干扰：标本传送过程中不能过度震荡，否则会造标本溶血，
干扰检测结果。

标本采集完毕后，必须及时的运送。

尿液留取后超2小时送检被认为
不新鲜标本，其化学成份将分解，使结果成假阴性；血气分析标本久置后，PH和
PO2下降，PCO2升高，必须立即送检，否则将严重影响结果的准确性；一般血液标
本送检延时时，其红细胞代谢产生的内源性产物将释放入血，使钾、转氨酶显著升高，血糖降低。

二、检验中存在的干扰因素
溶血对检验的干扰：细胞内成分主要指溶血标本中红细胞内物质的逸出, 包括血红蛋白、细胞内酶类、离子、有机物等。

细胞内高浓度的钾离子、LDH、AST、ACP等
随溶血进入血清后, 使检验结果偏高。

相反, 红细胞内浓度极低的物质如脂蛋白、胆固酯、钠、钙等随溶血, 细胞内液体对血清的稀释作用也要重视。

尤其是重度溶血时，红细胞内还含有较多的有机磷酸酯、非糖还原物质、非肌酐jaffe反应物质等, 随着溶血
使这类物质在血清中浓度升高而对一些检验结果产生干扰。

血红蛋白对结果的影响也
不可忽视。

血清总胆红素测定的中血红蛋白与重氮试剂反应形成的产物可破坏偶氮胆
红素, 还可被亚硝酸氧化为高铁血红蛋白而干扰吸光度。

血红蛋白引起胆红素结果下降, 其下降程度与血清中血红蛋白含量及胆红素浓度有关。

实验资料表明血清中血红蛋白
浓度在1.0g/L以下对胆红素测定结果影响不大, 血红蛋白浓度大于是1.5g/L以上胆红素测定结果明显下降。

据报道血清总胆固醇CHOD-PAP终点法中血红蛋白高于2g/L 会起正干扰。

在磷的测定中，标本溶血使血细胞内磷酸酯水解使无机磷增加。

而造成
溶血主要有两个方面分为体内溶血和体外溶血。

体内溶血主要是由贫血症、药物反应、严重感染、输血反应及其他可引起体内溶血的疾病所致。

体外溶血原因有：采血操作
不规范或不熟练，如在患者输液一侧抽血、找不准静脉而多次穿刺、进针后活塞抽出
过快、止血带绑扎过紧过久、酒精污染样品、容器不洁净、样品混合时过度摇晃等；
样品运送环节不周到，如冷藏、密闭不好、颠簸振动大、气压管道未采用真空采血管等；样品处理时使用器物挑拨血块、离心分离的速度与时间把握不好等；标本储存过久、温控失效等。

黄疸对检验的干扰：黄疸样本中胆红素的干扰机制主要有三方面即本底干扰、光
谱干扰和程序干扰。

研究结果显示胆红素只有浓度达到34.2μmol/L时，才对Cr的检测结果产生轻度负干扰、对FDP检测结果则产生轻度正干扰。

想要尽量避免黄疸对检验的干扰可以采用双试剂、合理的双波长、测定波长避开胆红素优势波长、加入适当
氧化剂等方法降低胆红素的干扰。

然而对于高浓度的黄疸样本，上述方法的纠正能力
有限，只能用生理盐水稀释样本后再检测才能降低干扰。

脂血对检验的干扰：脂血样本中的乳糜微粒对TG、PA和TBA的检测结果有显著干扰，尤其是TG受乳糜微粒干扰最重。

其主要原因是乳糜微粒具有散射光特性，使
入射光产生散射，对比色法和比浊法产生严重干扰，而且干扰误差随着乳糜浊度增加
而增大，呈现良好的正相关。

实验室为消除脂血对检测结果的干扰，可采用双波长测定、设置样本空白、超滤、高速离心等方法。

但需注意高速离心法不宜用来消除脂血
对TG和总胆红素的干扰，因为血清乳糜微粒中含有约86%的TG和4%的总胆红素，高速离心后检测下层清液必然导致TG和总胆红素减少，特别是TG浓度明显下降，
因此对于严重脂血样本，只能通过稀释原血清后再测定来消除乳糜的干扰。

检测试剂间的交叉污染对检验的干扰：试剂间的干扰主要有两个原因。

一是试剂
中含有下一个测试所要测定的底物，或是含有的某种试剂成分与下一反应所要测定的
底物有作用, 因而直接干扰下一反应的测定结果；另一个则是该试剂所引导的反应对下一个项目的反应进程带来了间接的干扰，因为在有试剂污染的情况下，下一项目所测
定的是前后两个项目反应的综合作用结果。

例如，ALT和AST试剂中含有高活力LDH 成分, 有可能会对LDH的测定带来干扰。

镁离子试剂中含有EDTA成分，为钙离子螯
合剂，可能对钙离子的测定带来干扰。

检验仪器对检验的干扰：一是样本针携带污染，目前大多数生化仪采用循环冲洗
式样本针吸取样本，当样本针清洗不完全或者黏附力增加时，样本残留可能会对下一
相邻样本的检测结果造成影响。

二是试剂针携带污染，全自动生化仪一般采用双试剂针，试剂针R1和试剂针R2在每吸取一次试剂后都会进行清洗。

当自身清洗能力下降，试剂针在吸取试剂时会将部分残留的前项目试剂成分带入到后项目的反应杯中，对后
项目的检测结果造成影响。

三是搅拌棒携带污染，试剂与样本、第一试剂与第二试剂
的混匀都需要搅拌棒，而搅拌棒如果清洗不完全或者黏附力增加时，残留试剂可能会
对下一检测结果造成影响。

四是比色杯污染，生化分析仪的比色杯大体分为两种包括
循环使用的和定期更换的，每个比色杯检测完毕后进行清洗，然后继续下一个检测项
目的检测。

当由于各种原因导致某个比色杯清洗不完全或者比色杯老化时，吸附在比
色杯的上一个项目的残留试剂可能会对在这个比色杯进行的下一个项目的检测结果造
成影响。

三、检验后存在的干扰因素
主观因素对检验的干扰：检验结束产生检验结果后，检验人员一定要认真仔细审
核检验结果。

如果疏忽大意，可能发现不出检验的错误结果。

比如生化指标一般不会
出现负值，如果某些指标出现负值一定要查明原因。

检验人员应该及时发送报告，避
免延误诊断和治疗。

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