EPO光激化学发光定量检测方法的建立

EPO光激化学发光定量检测方法的建立
陈凯;吴丹;聂庆东;相平;任杰;李会强
【期刊名称】《中国免疫学杂志》
【年(卷),期】2013(029)011
【摘要】目的:建立双抗体夹心模式光激化学发光免疫(LiCA)技术定量检测血清促红细胞生成素(EPO)的方法,并对方法进行方法学评估.方法:采用棋盘格滴定法,用针对EPO抗原的一个单克隆抗体及两个多克隆抗体,分别包被发光微粒,及进行生物素化,两两配对筛选出最佳双抗体组合,进而确定最佳反应浓度,建立光激化学发光检测EPO的方法,建立标准曲线,评价该方法.研究中采用SPSS19.0软件和ELISA Calc 进行统计分析.结果:筛选到一组最适抗体,分别与发光微粒和生物素进行连接,成功建立了EPO定量检测的双抗体夹心模式LiCA方法.该法检测的敏感性为0.09 ng/ml,在0.09~30 ng/ml范围内线性良好.批内变异系数和批间变异系数分别为2.93%和3.86%,EPO浓度高达30 ng/ml时无Hook效应.51例EPO增高及51例健康体检者EPO的测定结果与放射免疫法检测EPO比较具有良好的相关性(r=0.957),建立的参考范围为0.76~6.80 ng/ml.结论:成功建立了双抗体夹心模式的光激化学发光定量检测EPO的方法.该检测方法均具有敏感性高、免洗板、线性范围宽、背景荧光低、快速简便等特点.在EPO检测中具有极好的应用前景,有助于EPO诊断试剂盒的研制.
【总页数】6页(P1202-1206,1215)
【作者】陈凯;吴丹;聂庆东;相平;任杰;李会强
【作者单位】天津市北辰医院检验科,天津,300400;天津市北辰医院检验科,天津,300400;清华大学医院检验科,北京,100084;天津医科大学检验学院,天
津,300140;天津医科大学检验学院,天津,300140;天津医科大学医学检验学院免疫学教研室,天津,300140
【正文语种】中文
【中图分类】R392-33
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