2018年高考生物二轮专题总复习 专题整合训练：(十七)生物技术实践(含答案)

专题整合训练(十七) 生物技术实践
[全员必做题]
1．(2017·江西省新余四中高三物试题)甲、乙、丙三个生物兴趣小组分别按如下三个流程进行课外探究活动，据此结合所学知识回答下列问题。

兴趣小组甲挑选豆腐―→毛胚―→咸胚―→调制卤汤―→密封腌制
兴趣小组乙植物组织―→形成愈伤组织―→长出丛芽―→生根―→试管苗
兴趣小组丙土壤取样―→梯度稀释―→接种于培养基―→计数
(1)甲组同学在制作腐乳过程中，先将切好的豆腐块放置在笼屉内，为使毛霉发酵充分，必须提供适宜的温度和________等条件。

豆腐块上生长的毛霉菌丝来自于________。

密封腌制时添加卤汤，卤汤中的酒的含量应控制在12%左右，酒精含量过高会导致______________________________________________。

(2)乙组同学欲按此原理生产蝴蝶兰组培苗，在诱导丛芽和诱导生根的再分化培养过程中，培养基的不同之处主要是__________________________________________________。

(3)丙组同学欲按上述流程统计被苯酚污染的土壤中能高效降解苯酚的某菌株的数量。

其流程中土壤样品稀释后应该采用稀释涂布平板法接种于以________为唯一碳源的培养基上。

该组同学在稀释倍数为104的培养基中测得平板上菌落数的平均值为30.4，则每毫升样品中的菌落数是________个(涂布平板时所用稀释液的体积为0.2毫升)。

实验结束后，使用过的培养基应该进行________处理后，才能倒掉。

【答案】(1)湿度空气中的毛霉孢子发酵时间延长
(2)生长素和细胞分裂素的浓度配比和使用顺序
(3)苯酚 1.52×106灭菌(高压蒸汽灭菌)
【解析】(1)在制作腐乳过程中，先将切好的豆腐块平放在笼屉内，笼屉中的温度应控制在15～18℃，并保持在一定的湿度，以便使毛霉发酵充分。

豆腐块上生长的毛霉菌丝来自于空气中的毛霉孢子。

密封腌制时，添加的卤汤中的酒的含量应控制在12%左右，若酒精含量过高，对蛋白酶的抑制作用增大，会导致发酵时间延长。

(2)利用植物组织培养技术生产蝴蝶兰组培苗，在诱导丛芽和诱导生根的再分化培养过程中，培养基的不同之处主要是生长素和细胞分裂素的浓度配比和使用顺序。

(3)从被苯酚污染的土壤中筛选能高效降解苯酚的某菌株，其培养基应以苯酚为唯一碳源。

在稀释倍数为104的培养基中测得平板上菌落数的平均值为30.4(涂布平板时所用稀释液的体积为0.2毫升)，则每毫升样品中的菌落数是30.4×104÷0.2＝1.52×106个。

为了防止杂菌污染，实验结束后，使用过的培养基应该进行灭菌(高压蒸汽灭菌)处理后，才能倒掉。

2．(2017·宁夏六盘山高级中学高三试题)我校高2017届同学在生物实验室开展生物技术实践活动。

请回答下列有关问题：
(1)A组同学制作的苹果酒清香、明快，风味清爽，它是由果汁发酵产生的。

果汁发酵后是否有酒精产生，可用________来检验。

(2)B组同学在蓝莓果酒制作过程中，在变酸的酒的表面观察到的菌膜是由________大量繁殖而形成的，其可在缺少糖源时将乙醇变为________，然后变为醋酸。

(3)C组同学用豆腐发酵制成腐乳，发酵过程中主要是微生物分泌的多种酶发挥作用，其中主要是
氨酸生产中，培养基中碳氮比为4：1时，菌体大量繁殖而产生的谷氨酸少；当碳氮比为3：1时，菌体繁殖受抑制，但谷氨酸的合成量大增，因此通过发酵得到大量谷氨酸的发酵条件是不断向发酵液中通入无菌空气，发酵液中C/N＝4：1培养一段时间使菌种大量繁殖，后将培养液的C/N改为3：1。

4．(2017·河南新乡高三理科综合)为了调查某城市自来水的水质情况，某研究小组对自来水水样中的大肠杆菌含量进行了测定，请回答下列问题：
(1)检测自来水中大肠杆菌的数量，可选用伊红美蓝培养基，伊红美蓝培养基除了为大肠杆菌的生长繁殖提供水和碳源外，还可以提供________等基本营养成分。

该研究小组在统计菌落数目时，选取菌落数目未定时的记录作为结果，这样可以防止因________而遗漏菌落的数目。

(2)在接种前，该研究小组随机取若干灭菌后的空平板先行培养了一段时间，结果发现空白对照组的平板上出现了6个菌落，请分析说明可能的原因(写出两点)：①________；②________。

若空白平板上无菌落出现，其他三组实验组平板上菌落平均数为33—35个，这些平板需要在37℃温度下，pH调至________的条件下培养1—2d。

(3)该小组采用平板划线法分离水样中的细菌，操作时，每次划线之前都要对接种环进行灭菌目的是________。

在第二次及以后划线时，总是从上一次的末端开始划线，这样做的目的是________；划线时落在培养基上共画了5个区域，则需要________次灼烧接种环。

(4)直接给牲口饮用自来水或河水，牲口易出现腹泻。

在饮水中加土霉素可预防牲口出现大面积腹泻，但长期大量使用土霉素容易引起大肠杆菌产生抗药性，这一过程的实质是大肠杆菌种群的________发生了变化。

【答案】(1)氮源和无机盐培养时间不足(2)培养基灭菌不合格倒平板过程被污染(或培养皿灭菌不合格) 中性或微碱性(3)杀死上次划线后接种环上残留的菌种将聚集的菌体逐步进行稀释，以获得单个菌落 6 (4)抗药性基因频率
【解析】(1)微生物培养基成分应包括水、无机盐、碳源、氮源等。

(2)为了确定培养基的灭菌是否合格，微生物学实验一般会设置空白对照：随机取若干灭菌后的空白平板培养一段时间，观察培养基上是否有菌落生成。

(3)接种时接种环需要灼烧灭菌；在第二次及以后划线时，总是从上一次的末端开始划线，这样做的目的是通过划线次数的增加，使每次划线时菌体的数目逐渐减少，以便得到单个菌落。

每次划线之前及接种之后都要对接种环进行灭菌，因而划5个区域，则需要6次灼烧接种环。

(4)长期大量使用土霉素容易引起大肠杆菌产生抗药性，这是人工选择的结果，实质是大肠杆菌种群的抗药性基因频率发生了变化。

5．(2017·广西高级中学高三理综试题)某实验小组对某种品牌的酸奶中乳酸菌的数量进行了测定，取6支灭菌的试管，分别加入9 mL灭菌的生理盐水，标号为A1、A2、A3、A4、A5、A6，吸取1 mL酸奶样液加入试管A1中，然后另取一支吸管从A1中吸取1 mL溶液，加入A2中，依次类推，最后从试管A6中取0.1 mL样液进行涂布计数，涂布三个平板，其菌落数分别为251、265、276个。

请回答下列问题：
(1)培养乳酸菌除了必要的营养物质外，还需在培养基中添加________。

(2)制备乳酸菌的培养基过程中，对培养皿灭菌的常用方法是________。

倒平板时培养基的温度不能太低，原因是________；待平板冷凝后，要将平板倒置，其目的是________。

(3)该实验小组对乳酸菌接种所采用的方法是________。

根据三个平板中菌落数，可推测原酸奶中乳酸菌的浓度为________个/mL，该方法测定的乳酸菌的含量和实际值相比，一般________(填“偏大”或“偏小”)。

(4)为了使测量结果更加准确，该实验对照组的设置是________。

【答案】(1)维生素(2)干热灭菌法温度太低会导致培养基凝固，无法铺展均匀防止平板冷凝后，培养皿盖上凝结的水珠落入培养基中造成污染(3)稀释涂布平板法 2.64×109偏小
(4)另增设一组培养基，接种等量灭菌的生理盐水
【解析】(1)培养基除了提供主要营养物质外，还需满足某些微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求，培养乳酸菌需在培养基中添加维生素，才能保证乳酸菌的生长繁殖。

(2)微生物培养过程中，培养皿常用干热灭菌法灭菌；由于温度太低会导致培养基凝固，无法铺展均匀，所以倒平板时培养基的温度不能太低；待平板冷凝后，要将平板倒置，以防止平板冷凝后，培养皿盖上凝结的水珠落入培养基中造成污染。

(3)根据题干信息分析，该实验小组对乳酸菌接种所采用的方法是稀释涂布平板法；根据三个平板中菌落数，可推测原酸奶中乳酸菌的浓度＝(251＋265＋276)/10－7/3＝2.64×109个/mL，由于乳酸菌会重叠，所以该方法测定的乳酸菌的含量和实际值相比偏小。

(4)为了使测量结果更加准确，应该另增设一组培养基，接种等量灭菌的生理盐水。

6．(2017·福州外国语学校高三理科综合)2015年“青蒿素之母”屠呦呦获得了诺贝尔生理学或医学奖。

青蒿素是从黄花蒿的茎叶中提取的无色针状晶体，易溶于有机溶剂，不溶于水，不易挥发。

请回答以下问题：
(1)从黄花蒿中提取青蒿素时，应采用________法，所选用的有机溶剂为________(填“乙醇”或“乙酸乙酯”)，通常在提取前将黄花蒿茎叶进行粉碎和________，以提高效率。

提取过程中宜采用________加热以防止燃烧、爆炸，加热时瓶口要安装________装置，所得液体浓缩前进行________。

(2)黄花蒿精油是从黄花蒿的花蕾中提取的，其原理是利用水蒸气将挥发性较强的植物芳香油携带出来，形成油水混合的乳浊液呈________色，此时向乳浊液中加入氯化钠，就会出现明显的分层现象，可用分液漏斗将其分开，然后再加入________，得到纯精油。

【答案】(1)萃取乙酸乙酯干燥水浴回流冷凝(冷凝回流或冷凝) 过滤(2)乳白无水硫酸钠
【解析】(1)根据题干信息已知，“青蒿素易溶于有机溶剂、不溶于水、不易挥发”，所以应采用萃取法从黄花蒿中提取青蒿素。

乙醇是水溶性有机溶剂，萃取中能与水混溶而影响萃取效果，所以乙醇不能用于青蒿素的萃取；乙酸乙酯不与水混溶，因此可用于菁蒿素的萃取。

通常在提取前将黄花蒿茎叶进行粉碎和干燥，以提高效率。

提取过程中宜采用水浴加热以防止燃烧、爆炸，加热时瓶口要安装回流冷凝装置，所得液体浓缩前进行过滤。

(2)黄花蒿精油是从黄花蒿的花蕾中提取的，其原理是利用水蒸气将挥发性较强的植物芳香油携带出来，形成油水混合的乳浊液呈乳白色，此时向乳浊液中加入氯化钠，就会出现明显的分层现象，可用分液漏斗将其分开，然后再加入无水硫酸钠吸水，得到纯精油。

[重点选做题]
1．(2017·湖南省长沙市长郡中学高三理科综合)请回答下列有关提取植物有效成分的问题：
(1)玫瑰精油是制作高级香水的主要成分，其适合用水蒸气蒸馏法提取，理由是玫瑰精油具有________的性质。

将鲜玫瑰花瓣和清水经水蒸气蒸馏后收集到的产物是_____________________________。

(2)橘皮精油是食品、化妆品和香水配料的优质原料，一般采用压榨法从橘皮中提取。

为了提高出油率，
【答案】(1)平板划线法缺少氮源(2)高压蒸汽灭菌不可(3)将聚集的菌体逐步稀释以便获得单个菌落(4)需要(5)乙酸乙酯萃取胡萝卜素的有机溶剂应不与水混溶，而乙醇为水溶性有机溶剂【解析】(1)将幽门螺杆菌接种到pH适宜的该培养基中，最常用的接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法，培养基中缺乏氮源，幽门螺杆菌不能正常生活，数量会减少。

(2)纯化细菌时使用的培养基一般用高压蒸气灭菌，不可用加入抗生素的方法防止杂菌感染，因为抗生素会杀死细菌。

(3)对接种环常用的灭菌方法是灼烧灭菌；在第二次及以后的划线时，总是从上一次划线的末端开始划线的目的是：将聚集的菌体逐渐稀释分散以便获得由单个细胞繁殖而来的菌落。

(4)工业生产上，用养殖的岩藻作为原料提取胡萝卜素时，需要将新鲜的岩藻干燥。

(5)萃取胡萝卜素的有机溶剂应该能够充分溶解胡萝卜素，并且不与水混溶，故乙醇和乙酸乙酯两种溶剂，应选用其中的乙酸乙酯作为胡萝卜素的萃取剂。