HPV临床常用检测方法

由于HPV不能在体外细胞培养，故不能用简便的血清血检测进行HPV的诊断和分型.临床上用于检测HPV的方法包括细胞学方法、免疫组化、原位杂交、斑点杂交、核酸印迹和PCR 等,其中以PCR方法的敏感性最高，是目前应用最多
感染的HPV型别、含量、持续时间决定病变的发展与预后,是进行HPV检测的主要内容.目前主要是通过应用分子生物学方法进行HPV DNA的检测.
1、现有的HPV实验室主要检测手段:
①聚合酶链反应（PCR, Polymerase Chain Reaction):扩增位于两段已知序列之间的DNA片断的方法。

该法有较高的敏感度，可进行HPV分型,缺点是对实验室环境要求较高，容易发生样本间的交叉污染，从而导致假阳性率高。

②核酸杂交检测
有较好的特异性和敏感度，还可以进行HPV DNA的分型，各种核酸杂交检测方法有一定的优缺点.
A核酸印迹原位杂交
适用于HPV分型和HPV DNA分子量鉴定，虽然灵敏度高,但因操作复杂，需要新鲜组织标本,不便在临床上大规模使用。

B斑点印迹
其敏感度和特异性均低于核酸印迹原位杂交法,虽然经济实用，但实验过程存在有放射性污染，是环保所不能轻视的问题.
C原位杂交（in situ hybridization,一种核酸杂交技术，可用来测定基因或特定核苷酸序列在核酸分子的所在部位，检测重组体DNA）通过非放射性探针对石蜡组织进行检测，能作定位检测，假阳性率低,但灵敏度不高,大大降低了临床使用价值。

D杂交捕获法(Hybrid Capture）
杂交捕获试验是利用化学发光对抗体捕获的信号加以放大.首先使DNA双链释放并分解成为可以杂交的核苷酸单链，DNA单链与RNA组合探针结合为RNA-DNA杂合体,特异性抗体将RNA—DNA杂合体捕获，偶联有碱性磷酸酶的第二抗体与RNA—DNA杂合体结合,碱性磷酸酶使酶底物发光，根据光的强弱可确定碱性磷酸酶的含量,从而确定RNA—DNA杂合体的含量。

能检测13种高危型HPV,包括HPV16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、68.
各种检测方法的比较
各种检测方法的比较
HPV基因分型检测试剂盒（PCR—反向点杂交法）
【产品用途】
对人乳头瘤病毒（HPV）的感染情况进行定性检测并加以分型,能够检测23种HPV基因型，直接提示感染HPV的基因型;包括18种高危和5种低危型,可用于临床HPV感染的辅助诊断。

【产品优势】
1。

精确分型：能同时对23种HPV基因型进行精确分型，包括18种高危型和5种地位型；
2。

效率高：单次检测标本数量可达96份;
3.性能好：特异性强、重复性好，均高于98％；
4。

设备通用：如普通PCR仪和杂交仪，适应于大、中、小型实验室；
5.内部质控:具有真正意义上的内部质控,检测结果更加准确；
6。

可以检测多种临床标本。

【技术方法】
采用PCR和反向点杂交法相结合的基因芯片技术
【检测原理】
将大量不同序列的探针分子固定于支持物的不同位置上，然后与已做标记的样本进行杂交，通过检测杂交信号的强度和分布来进行分析。

【检测标本】
宫颈脱落细胞、液基细胞学标本、疣体组织、石蜡组织切片等
【临床意义】
1。

宫颈病变及宫颈癌的筛查；
2.对于未明确诊断意义的非典型鳞状细胞(ASCUS）患者的分流管理；
3.预测病变恶化或术后复发的风险，有效指导术后追踪；
4。

指导HPV疫苗的研究及使用。