食品与保健品中抗菌药物残留检测方法的研究进展

食品、保健品与人们的生活密切相关。食品、保健 品中抗菌药物残留问题受到各国政府和食品安全机构 的广泛关注…。人们若长期食用含有抗菌药物的食品 或保健品，无疑是等于长期服用小剂量的抗菌药物，对 抗菌药物过敏的人会发生过敏反应；即使是正常食用 者，体内的某些条件性致病菌易产生耐药性，一旦患病 再应用同种抗菌药物治疗很难奏效。为了保障食品、 保健品的安全，促进食品、保健品中抗菌药物残留检测 技术的研究得到发展，正在寻求简便、快速、准确和灵 敏的检测方法，以满足日趋严格的残留限量的要求。 美国、欧盟和日本等世界许多国家，已经制订了食品与 保健品中抗菌药物药物的残留限量。因此，只有不断 发展快速、准确、灵敏度高的检测方法，才能满足Ｅｌ趋 严格的残留限量的要求，保障食品与保健品的食用安 全。目前，食品与保健品中抗菌药物残留检测方法，主 要分为色谱测定法、酶联法和微生物检测法等３种方
・收稿日期：２００９－０２－０４
万方数据
天津药学Ｔｉａｎｊｉｎ
Ｐｈａｒｍａｃｙ
２００９年第２１卷第４期
５５
质和具有挥发性的有机物，对于沸点高、易分解、腐蚀
性和反应性较强的物质，以及分子量超过３００的高分 子物质等，气相色谱分析则较为困难。有人统计，约有 ２０％左右的有机物，可用气相色谱测定。因此，气相色 谱的应用有一定的局限性。宫向红等Ｈ１报道，采用气 相色谱法检测水产品中氯霉素残留。试样用乙酸乙酯 提取，蒸干后用０．０１ ｍｏｌ／Ｌ盐酸溶解，正己烷去脂肪， 吹干后乙酸乙酯溶解样品，加ＢＳＴＦＡ＋ＴＭＣＳ（９９＋１） 试剂在超声浴中硅烷化，用气相色谱法测定，外标法定 量。当添加水平在０．２—２．０“ｇ／ｋｇ时，回收率大于 ８５％，线性相关系数为０．９９９，定量结果的相对标准偏 差为０．９％～２．７％。 ２高效液相色谱法 高效液相色谱（ＨＰＬＣ）是目前广泛应用的一种理 化检测方法，该方法引入了气相色谱理论，在技术上采 用了高压泵，高效同定相和高灵敏度检测器，实现了分 离速度快、效率高和操作自动化。几乎所有化合物，包 括高极性／离子型待测物和大分子物质，均可用ＨＰＬＣ 进行测定。与ＧＣ相比，ＨＰＬＣ流动相参与分离机制， 其组成、比例和ｐＨ值等可灵活调节，如离子对色谱、 胶束色谱、手性分离色谱等，使许多极难分离的待测物 得以分析。反相高效液相色谱法（ＲＰ—ＨＰＬＣ）发展最 快，目前已成为大多数抗菌药物残留的常规分析方法。 最常用的检测方式为紫外检测器和荧光检测器。紫外 检测器最普及，其次是荧光检测器和电化学检测器。 由于大部分抗菌药物在高于波长２３０ ｎｍ的光谱区无 吸收，而在低于波长２３０ ｎｍ的紫外区，许多样本基质 和流动相产生干扰，需衍生化后测定，限制了紫外检测
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ｖｅｃｕｒｏｎｉｕｍ
ｏｎ
ｂｒｏｎｃｈｏｓｐａｓｍ ａｆｔｅｒ １２ Ｒａｆｅｈｅｒｔ
１９
Ｔａｉｖａｉｎｅｎ
ห้องสมุดไป่ตู้
ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ
ｏｆ
ａｎｅｓｔｈｅｓｉａ ａｎｄｅｎｄｏｔｒａｃｈｅａｌ
ｉｎ
ｈａｔｉｏｎ：ａ ｐｒｏｓｐｅｃｔｉｖｅ，ｒａｎｄｏｍｉｚｅｄ ｔｒｉａｌ
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Ｅｌｕｔ
器的应用。但是，大部分抗菌药物是手性分子，因此旋
光检测器有很大发展潜力。目前，该方法已用于红霉 素、庆大霉素、四环素、氨苄青霉素和磺胺类药物残留 的测定。此外，近１０年来光电二极管阵列检测器 （ＤＡＤ）是ＨＰＬＣ最重要的突破。ＤＡＤ可同时接收整 个光谱区的信息，在色谱峰流出的同时，能进行每个瞬
的定量检测限（ＬＯＱ）依次是０．０２５、０．０２５、０．０５和
０．０５
ｍｇ／Ｌ，回收率为８４％一１１０％，ＲＳＤ＜１０％。邹月
利∞１报道，高效液相色谱法测定蜂蜜中链霉素含量。 采用酸性甲醇溶液提取，高效液相色谱法分离，外标法 定量分析，标准曲线的线性关系数为０．９９９ ８，线性范 围为８．７～８７０斗ｇ／Ｌ。蜂蜜中链霉素的平均回收率为 ８９．０％～１１０．０％，方法检测限为１０斗ｇ／ｋｇ，定量结果
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食品与保健品中抗菌药物残留检测方法的研究进展‘
左志辉
（天津市药品检验所，天津３０００７０） 中图分类号：Ｒ９２７．１ｌ 文献标识码：Ａ 文章编号：１００６－５６８７（２００９）０４－００５４－０５
ｒｏｃｕｒｏｎｉｕｍ ａｎｄ
ｒａｔｅ
（３）：４８８
１３
Ｂｒａｇａ
ｉｎｔｒａｃｒａｎｉａｌ Ｊ
ｐｒｅｓｓｕｒｅ．ｍｅａｎ
ｐｒｅｓｓｕｒｅ
ａｎｄ ｈｅａｒｔ
ｉｎ
Ａｄｅ Ｆ，Ｙｏｓｈｉｏｋａ Ｌ，Ｂｒａｇａ Ｆ Ｓ。矗ａ１．Ｎｅｕｒｏｍｕｓｃｕｌａｒ ａｎｄ ｃａｒｄｉｏ－
ｅｆｆｅｃｔｓ
ｎｅｕｒｏｓｕｒｇｉｃａｌ
柱可达１００万个理论塔板数；③低检测限，可检测
１０’１—１０‘１３
ｇ的物质；④分析速度快，一般分析只需几
分钟至几十分钟；⑤应用范围广，对于部分不能直接用 于色谱测定的物质，可以采用化学处理的方法，使之转 变成可用于色谱分析的物质。虽然气相色谱有以上诸 多优点，但也存在着不足，首先该方法只能分析气态物
天津药学Ｔｉａｎｊｉｎ
３ Ｏｔａｇｉｒｉ Ｔ．Ｎｅｗ ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔｓ ｎｃｕｌＤｎｎｌ∞ｕｌａｒ ｂｌｏｃｋｉｎｇ
Ｐｈａｒｍａｃｙ
２００９年第２ｌ卷第４期
１ｌ Ｓｔｕｔｈ Ｇ。Ｓｅ ｆｌｏｃｋ Ｍ ｐｏｓｓｉｂｌｅ ｍｅｃｈｎｉｓｍ ｆｏｒ
ｉｎ
ａｇｅｎｔｓ．Ｍａｓｕｉ，
Ｅ
Ａ。Ｓｔｕｃｋｅ
Ａ
Ｃ１８柱纯化样品，ＢＳＴＦＡ—ＴＭＣＳ
衍生后，用ＮＣＩ源选择ｍ／ｚ为４６６的特征离子为目标 离子，在ＳＩＭ模式下进行ＧＣ—ＭＳ分析，检测限可达
０．０８
ｗｇ／ｋｇ，氯霉素质量浓度在０．０８—１００斗ｇ／ｋｇ内，
方法的线性关系良好，相关系数为０．９９８。郝凯等报
道了采用固相萃取一气相色谱一质谱联用法测定鱼肉 中甲砜霉素的残留。 目前ＧＣ—ＭＳ应用较多，而ＬＣ—ＭＳ是除ＧＣ—ＭＳ 之外，又一种集高效分离和多组分定性、定量于一体的 系统。ＬＣ—ＭＳ对高沸点、不挥发和热不稳定的化合 物的分离和鉴定，具有独特的优势。ＬＣ—ＭＳ—ＭＳ联 用的优点则更显著，气相色谱只能分离易挥发且不分 解的物质，而液相色谱对生物大分子也能分离，ＬＣ与 高选择性、高灵敏度的ＭＳ—ＭＳ结合，可对复杂样品进
法㈨】。
ｌ气相色谱法 气相色谱法（ＧＣ）是以气体作为流动相的色谱法。 该法在食品与保健品中抗菌药物残留的检测方面都有 所应用，只是根据各种抗菌药物的理化性质的不同及 待检样品的性质和状态的不同，在前处理上有所不同。 与其他色谱法相比，气相色谱法有以下几个特点：①高 选择性，ＧＣ法能分离理化性质极为相似的同一类抗菌 药物的各组分。如磺胺类药物中的磺胺甲嘧啶、磺胺 二甲基嘧啶、磺胺甲氧嘧啶等；②高效能，一般毛细管
ｓｅｑｕｅｎｃｅ
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ｏｆ
ｐｅｄｉａｔｒｉｃ ｐａｔｉｅｎｔｓ．Ａｎｅｓｔｈ Ａｎｕｌｇ，２００２，９４
样本中多种药物及其代谢物检测。对分析牛奶中青霉
素类抗生素，质谱作为一种专一检测器已获得广泛应 用。其分析方式有直接探头分析法、直接液体导入法、 气相色谱质谱联用法（ＧＣ／ＭＳ）、液相色谱质谱联用法
（ＬＣ／ＭＳ）等。使用电子轰击离子化、化学电离、快速原
子轰击、热喷雾电离、等离子体喷雾、粒子束电离、大气 压化学电离（ＡＰＣＩ）和电喷雾电离（ＥＳＩ）技术，对不同 ＭＳ离子源条件下青霉素类药物分子碎片类型的特征， 已经作了大量的工作。另外，离子阱质谱技术（ＭＳ／ ＭＳ）也已用于鉴别青霉素类药物。李海平等人【ｌ刨报 道，气相色谱一质谱分析法在猪肉氯霉素残留检测中 的应用，样品中氯霉素用乙酸乙酯提取，脂肪用正己烷 去除，采用Ｂｏｎｄ
间的动态光谱扫描，并快速采集信号，经计算机处理后 得到色谱一光谱的三维图谱，信息量大大增加。一次
进样可得到每个组分峰的定量、定性和纯度信息，灵敏 度亦明显提高。秦燕等人口１报道，牛奶中四环素族抗 生素残留的高效液相色谱法。样品经ＥＤＴＡ—Ｍｃｌｌｖａｉｎ 缓冲液提取，离心后取上清液于预平衡的Ｓｅｐ—Ｐａｋ
ＷａｔｅｒｓＴＭ Ｓｅｐ—Ｐａｋ Ｃ１８固相萃取柱净化，用１０ ｍｍｏｌ／Ｌ
草酸甲醇溶液洗脱，并于４０℃用Ｎ：浓缩仪吹干，加流 动相０．５ ｍｌ溶解残渣，进行ＨＰＬＣ分析。结果标准校 准曲线在０．０５一１．０ ｍｇ／Ｌ的范围内，相关系数（ｒ）大 于０．９９。牛奶中土霉素、四环素、金霉素和强力霉素
行实时分析，即使在Ｌｃ难分离的情况下，只要通过
的相对标准偏差均小于１０％。林红英等＂１报道，采用
ＨＰＬＣ法测定牛奶中磺胺二甲基嘧啶残留量。戴军 等邛１报道，采用ＨＰＬＣ测定牛奶和虾仁中氯霉素残留。 文毅等归１报道，采用聚合物整体柱微萃取一高效液相 色谱法检测鸡蛋中的磺胺嘧啶和磺胺二甲嘧啶残留。 ３色谱质谱联用法 色谱质谱联用法由于实现了高效层析分离和检测 联机，可用微电脑控制层析条件、程序和数据处理，其 特异性、灵敏度和重复性均好，并可一次同时完成同一
ＭＳｌ及ＭＳ２对目标化合物进行中性碎片扫描，则可发 现并突出混合物中的目标化合物，显著提高信噪比。
万方数据
天津药学Ｔｉａｎｊｉｎ
Ｐｈａｒｍａｃｙ
２３２６ １０ Ｆｌｅｍｉｎｇ Ｎ Ｗ，Ｃｈｕｎｇ Ｆ，Ｇｌａｓｓ Ｐ Ｓ，ｅｌ耐．Ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ｉｎｔｕｂａｔｉｏｎ－
ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ ｐｒｏｖｉｄｅｄ ｂｙ
Ｔ，Ｍｅａｋｉｎ Ｇ Ｈ，Ｍｅｒｅｔｏｊａ Ｏ Ａ，ｅｔ耐．Ｔｈｅ ｍｇ／ｋｇ ｄｕｒｉｎｇ
ｎｉｔｒｏｕｓ
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ａｎｄ ｅｆｆｉｃａｃｙ ｏｆ
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ｒａｐａｃｕｒｏｎｉｕｍ（ＯＲＧ ９４８７）ｏｒ ｓｕｅｅｉｎｙｌｅｈｏｌｉｎｅ
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ｏｘｉｄｅ—－ｏｐｉｏｉｄ ａｎａｅｓｔｈｅｓｉａ
ｈｕｍａｎｓ ｄｕｒｉｎｇ ａｎｅｓｔｈｅｓｉａ ｗｉｔｈ ｆｅｎｔｓｎｙｌ ａｎｄ ｐｒｏｐａｆ０１．Ａｎｅｓｔｈｅｓｉｏｌｏｇｙ，