五血尿素氮的测定二乙酰一肟法

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血尿素〔mmol/L〕=血尿素氮〔mg%〕 × 0.375
陕西师范大学体育学院实验教学示范中心
运动生物化学实验课件
六、本卷须知
➢ 沸水浴时间对显色程度影响很大,应该严格控制。 ➢ 二乙酰一肟-硫氨脲溶液不能久置,假设有结晶析
出应该重新配置。 ➢ 运动实践中利用这一指标时,可以分别在运动前、
后及次日晨取血。
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三、实验试剂
➢ 1%的氟化钠溶液 ➢ 10%的三氯乙酸溶液 ➢ 二乙酰一肟-硫氨脲溶液:称取二乙酰一肟600g和硫氨脲30mg,加蒸馏水溶
解,稀释至100ml,冰箱保存。 ➢ 混合酸液:浓磷酸35ml,浓硫酸80ml,缓缓参加800ml蒸馏水中,冷却后加
蒸馏水至1000ml。 ➢ 尿素氮标准贮存液〔1ml=1mg氮〕:准确称取尿素0.2143g置于100ml容量
充分混匀后,准确沸水浴中10分钟,置于流水中冷却至室温,以空白管 调零,500nm陕波西长师比范色大学体育学院实验教学示范中心
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五、实验结果
➢ 计算公式:
OD测 血尿素氮〔mg%〕= -------------- × 100
OD标 血尿素〔mg%〕= 2.143×血尿素氮〔mg%〕
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七、指标应用
➢ 正常人血尿素安静值为3.2~7.0mmol/L。运发动的安静值与普通人一 致。一般超过30分钟以上的运动会使血尿素含量有明显增加。
➢ 血尿素是评定运动量、机体疲劳程度及运动训练后机能恢复状况的良 好指标。在评定运动量时,一般在运动前及运动后30-60min取血, 假设血尿素≥8mmol/L〔血尿素疲劳阈值〕,且较运动前升高 2mmol/L以上,说明运动量过大,机体不能适应,运发动已达疲劳状 态。
➢ 在评定机能恢复状况时应分别在训练前、后及次日晨取血;评定一个 训练周期情况时,应在周期始初、中间及结束时分别取晨血跟踪测试。
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瓶中,用1%硫酸溶解,稀释至刻度。 ➢ 尿素氮标准应用液〔1ml=1mg氮〕:准确吸取尿素氮标准贮存液1ml,用1%
硫酸稀释至100ml。 ➢ 空白液:取1份0.1%氟化钠和3份10%的三氯乙酸混合而成。
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四、实验操作
➢ 制备去蛋白血液:吸取0.48 ml 1%的氟化钠溶液置于离心 管中,采手指血20 l溶于其中,混匀后参加1.5 m10%的 三氯乙酸,充分摇匀,离心5分钟〔3000rpm〕,取上清液 与另一小试管中备用。
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实验五 血尿素氮的测定 (二乙酰一肟法)
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一、 实验目的
➢ 复习稳固尿素的生成机理及生化评定意义。 ➢ 学习血尿素氮的测定方法。 ➢ 掌握血尿素氮指标在运动实践中的应用
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Hale Waihona Puke 运动生物化学实验课件二、实验原理
➢ 去蛋白血滤液中的尿素,在强酸的条件下,与二乙酰一肟 和硫氨脲共热反响,生成红色的二嗪衍生物,其颜色深浅 与尿素含量成正比,通过与同样处理的尿素标准液比较, 即可求出血尿素氮的含量。

加热
➢ 尿素 + 二乙酰一肟
红色复合物

强酸 〔500nm波长有一吸收
峰〕 陕西师范大学体育学院实验教学示范中心
➢ 取三只大试管,编号,按下表操作:
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血尿素氮的测定
空白液(mL)
测定管 0.5
标准管 —
空白管 —
尿素氮标准应用液(mL)
0.5

去蛋白血滤液(mL)

二乙酰一肟-硫氨脲溶液 (mL)
0.5
0.5
0.5
0.5
混合酸液(mL)
3.0
3.0
3.0
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