实验七.微生物鉴定中的生理生化反应

甲基红试验观察 培养液中，各加入2～3滴甲基红指示剂。
V.P.验观察：
加入5～10滴40%KOH溶 37℃，15－30min)。呈红色者为阳性。
实验报告
1 用文字描述实验项目、实验目的、材料与方法.
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实验结果。设计表格，将观察结果填入表内。
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实验分析。参考相关文献，对实验结果进行分析。实验 操作中存在什么问题，应如何改进？
观察、记录 （透明圈有无及大小）
3.2.2 糖发酵试验
糖发酵培养基制备（已完成） 标记（培养基、菌种） 接种
（葡萄糖发酵培养基试管3支，
乳糖发酵培养基试管3支
E. coli ， P. vulgaris ，CK）
培养（ 37℃，24－48h） 观察、记录（ 颜色、气泡）
3.2.3 吲哚试验
每试验制作试管培养基各2支 吲哚试验 （蛋白胨水培养基） 甲基红试验、V.P.试验 （葡萄糖蛋白胨水培养基）
接种
（ E. coli ， P. vulgaris）
培养
（ 37℃，48h ） 结果观察
吲哚试验观察： 加入3～4滴乙醚 振荡 静置1min 加入2滴吲哚试剂
产生红色环状物为阳性。
注意：沿管壁加入，仔细观察培养液上层，若培养液上层变成红色，即为 若仍呈黄色，则为阴性反应，分别用“＋”或“－”表示。
3.1.3 试剂：卢戈氏碘液，甲基红指示剂，40%KOH溶液，5%α萘酚，乙醚， 吲哚试剂。 3.1.4 其它物品： 无菌培养皿，接种环，试管，菌玻璃涂棒，培养箱。
3.2 方法
3.2.1 淀粉水解试验 制作淀粉培养基平板（已制备）
平板分区，标记（4部分）
接种4种微生物（平板划线法）
培养（37℃，24h）
3 材料与方法 3.1 实验器材
3.1.1 菌种：Escherichia coli(大肠杆菌）, Bacillus subtilis（枯草杆菌）, Protegus vulgaris（普通变形杆菌）, Enterobacter aerogenes（产气肠杆 菌）.
3.1.2 培养基：固体淀粉培养基，糖发酵培养基（葡萄糖、乳糖），马蛋 白胨水培养基，葡萄糖蛋白胨水培养基。
实验七 细菌的生理生化反应 1 实验目的
1.1 掌握微生物水解淀粉的实验原理和操作方法；
1.2 掌握通过糖发酵试验鉴别不同微生物的原理和方法。 1.3 掌握鉴别大肠杆菌和产气肠杆菌的原理和方法。
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实验原理
2.1 微生物是怎样利用淀粉等大分子物质的?如何判断微生物 水解淀粉的情况？ 2.2 糖发酵试验中德汉氏小管的作用是什么?溴甲酚紫溶液的 作用是什么？ 2.3 如何判断微生物是否产生色氨酸酶？是否利用葡萄糖产生 酸或者中性化合物？