猪脑蛋白质含量测定研究

猪脑蛋白质含量测定研究
作者：黄晓君，李俏，周建湘
来源：《现代食品》 2019年第13期
◎ 黄晓君，李?俏，周建湘
（广东福寿仙健康制药有限公司，广东?广州?510470）
Huang Xiaojun, Li?Qiao, Zhou Jianxiang
(Guangdong Fushouxian Health Pharmaceutical Co., Ltd., Guangzhou?510470, China)
摘?要：目的：测定猪脑的蛋白质含量，为建立并完善猪脑质量标准提供依据。

方法：采用凯氏氮测定法对10批猪脑样品进行蛋白质含量测定。

结果：猪脑蛋白质含量为31.6%～37.0%。

结论：本研究所建立的猪脑蛋白质含量测定方法简单、准确，可用于猪脑的质量控制。

关键词：猪脑；质量控制；蛋白质含量测定
Abstract：Objective: To determined the protein content of pig brain and provide a basis for establishing and improving the quality standard of pig brain. Methods: The protein content of 10 batches of pig brain samples was determined by Kjeldahl nitrogen assay. Results: The protein content of pig brain was 31.6%～37.0%. Conclusion: The method for determination of protein content in pig brain
established in this study was simple and accurate, and can be used for quality control of pig brain.
Key words：Pig brain; Quality control; Protein content determination 中图分类号：S858.28
猪脑为脊椎动物门哺乳纲食肉目猪科动物猪的脑髓。

出自《中华本草》，性味甘、寒，有毒。

可补益脑髓；疏风；润泽生肌。

主治头痛；眩晕；失眠；手足皲裂；痈肿及冻疮。

适宜体
质虚弱者、气血虚亏者及头晕头痛、神经衰弱、偏头痛者食用。

猪脑不仅肉质细腻，鲜嫩可口，而且营养丰富，含有丰富的蛋白质，近年来，研究者从猪
脑中分离出蛋白质，并用酶法水解成游离氨基酸和低分子水解物，用于治疗脑方面的疾病[1]。

现今猪脑蛋白水解提取物得到了较广泛的使用，主要用于治疗颅脑外伤及脑血管病等引起的记
忆力减退及注意力集中障碍，辅助治疗脑功能不全，也用于治疗神经衰弱、蛋白质缺乏及蛋白
质消化吸收障碍等[2]。

但是作为原材料的猪脑的质量控制标准却仅有性状描述，难以控制其优劣。

因此，为了进一步提升与完善猪脑的质量标准，本研究对猪脑蛋白质含量测定进行了研究，为其质量标准的完善提供依据。

1?仪器与材料
1.1?实验仪器
AG204万分之一电子分析天平（METTLER TOLEDO），TC-15套式恒温器（海宁市新华医疗器械厂），milli-q Intergral 10超纯水机（密理博中国有限公司）。

1.2?实验材料
10批猪脑样品（广州市花都区新华屠宰场）。

硫酸铜、硫酸钾、硫酸、硼酸、氢氧化钠、
无水硫酸钠、甲基红、溴甲酚绿及乙醇均为分析纯，购自广州化学试剂厂。

所有试液均用超纯
水（不含氨）配制。

2?方法与结果
2.1?仪器装置
如图1。

图中A为1 000 mL圆底烧瓶，B为安全瓶，C为连有氮气球的蒸馏器，D为漏斗，
E为直形冷凝管，F为100 mL锥形瓶，G、H为橡皮管夹。

连接蒸馏装置，A瓶中加水适量与甲基红指示液数滴，加稀硫酸使其呈酸性，加玻璃珠或
沸石数粒，从D漏斗加水约50 mL，关闭G夹，开放冷凝水，煮沸A瓶中的水，当蒸气从冷凝
管尖端冷凝而出时，移去火源，关H夹，使C瓶中的水反抽到B瓶，开G夹，放出B瓶中的水，关B瓶及G夹，将冷凝管尖端插入约50 mL水中，使水自冷凝管尖端反抽至C瓶、B瓶，再如
上法放水。

如此将仪器内部洗涤2～3次。

2.2?样品处理
取供试品约0.03 g，精密称定，置干燥的30～50 mL
凯氏烧瓶中，加硫酸钾（或无水硫酸钠）0.3 g与30%硫酸铜溶液5滴，再沿瓶壁滴加硫酸2.0 mL；在凯氏烧瓶口放一小漏斗，并使烧瓶成45°斜置，用小火缓缓加热，使溶液温度保持
在沸点以下，泡沸停止后，逐步加大火力，沸腾至溶液成澄明的绿色后，继续加热10 min，放冷，加水2 mL。

取2%硼酸溶液10 mL置100 mL锥形瓶中，加甲基红-溴甲酚绿混合指示液5滴，将冷凝管
尖端插入液面下。

然后，将凯氏烧瓶中的内容物由D漏斗转入C蒸馏瓶中，用少量水淋洗凯氏
烧瓶及漏斗数次，再加入40%氢氧化钠溶液10 mL，用少量水再洗漏斗数次，关G夹，加热A瓶，进行蒸气蒸馏，至硼酸液开始由酒红色变为蓝绿色时起，继续蒸馏约10 min后，将冷凝管尖端提出液面，使蒸气继续蒸馏约1 min，用水淋洗尖端后停止蒸馏。

2.3?滴定
馏出液用硫酸滴定液（0.005 mol·L-1）滴定至溶液由蓝绿色变为灰紫色，并将滴定结果
用空白试验校正。

每1 mL硫酸滴定液（0.005 mol·L-1）相当于0.1401 mg的N。

每批样品平
行测定3次。

2.4?计算
样品中蛋白质含量的计算方法如式（1）所示。

式（1）中：X为样品中蛋白质的含量，%；V1为样品消耗的硫酸滴定液的体积，mL；V2为
空白试剂消耗的硫酸滴定液的体积，mL；C为硫酸滴定液的标定浓度（0.005 010 mol·L-1）；
0.140 1为消耗
1 mL硫酸滴定液对应的氮克数；m为样品的质量，g；F为氮换算为蛋白质的系数。

蛋白质
中氮含量一般为
15%～17.6%，取6.25。

2.5?测定结果
10批猪脑样品的蛋白质含量测定结果见表1。

3?小结与结论
凯氏氮测定法作为经典的绝对定量方法，方法操作稳定，干扰因素只有非蛋白氮，对比福
林酚法、双缩脲法和紫外-可见分光光度法，干扰因素少，其方法的准确度和专属性均较好[3-4]。

本实验为猪脑质量标准的提升研究，根据上述10批猪脑样品的测定结果，本文所建立的质量控制方法简单，可用于猪脑的质
量控制。

参考文献：
[1]周?烨.猪脑多肽的制备、分离及其生物活性研究[D].镇江：江苏大学.2015.
[2]邓?峰，梁蔚阳.氨基酸分析法测定脑蛋白水解物注射液中肽的含量[J].药物分析杂志，2010，30
（10）：2001.
[3]国家药典委员会.中华人民共和国药典（2015年版）四部[M].北京：中国医药科技出版社，2015.
[4]国家药典委员会.中国药典分析检测技术指南[S].北京：中国医药科技出版社，2017.。