鸡传染性法氏囊病亚单位灭活疫苗免疫SPF鸡琼扩抗体效价与攻毒保护相关性试验
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鸡传染性法氏囊病亚单位灭活疫苗免疫SPF鸡琼扩抗体效价
与攻毒保护相关性试验
王雷;凌红丽;曲信芹;张园园
【摘要】为了探讨鸡传染性法氏囊病(IBD)亚单位灭活疫苗琼扩抗体效价与攻毒保护之间的相关性,为血清学效力检验标准的制定提供依据,用试验室试制的3批鸡传染性法氏囊病基因工程亚单位灭活疫苗以不同剂量分别免疫21日龄SPF鸡,免疫后21日采血分离血清并用强毒攻击,将每只鸡的琼扩抗体效价与攻毒保护情况一一对应,结果显示IBD琼扩抗体效价不低于1:1的鸡均可以抵抗强毒攻击,表明琼扩抗体效价与攻毒保护具有一定的相关性.
【期刊名称】《山东畜牧兽医》
【年(卷),期】2016(037)002
【总页数】2页(P2-3)
【关键词】鸡传染性法氏囊病;琼扩抗体效价;攻毒保护;相关性
【作者】王雷;凌红丽;曲信芹;张园园
【作者单位】青岛蔚蓝生物股份有限公司山东青岛 266114;青岛蔚蓝生物股份有限公司山东青岛 266114;青岛蔚蓝生物股份有限公司山东青岛 266114;青岛蔚蓝生物股份有限公司山东青岛 266114
【正文语种】中文
【中图分类】S858.31
鸡传染性法氏囊病(infectious bursal disease, IBD)是危害雏鸡的一种急性、高度接触性、病毒性传染病。
病原为鸡传染性法氏囊病病毒(infectious bursal disease irus, IBDV)[1]。
目前该病已遍布全球养禽地区,在工业化养禽业发达地
区尤为严重。
邝荣禄于1979年在广州首先发现我国存在该病,此后北京、上海等地发现了该病[2, 3]。
1990年以后,我国报道分离到IBD超强毒株和变异毒株,
使该病出现了新的流行特点,给我国养禽业造成了很多的经济损失[4]。
常规疫苗存在的潜在免疫病理作用是无法克服的缺陷,对病毒不断变异也束手无策。
另一方面,基因工程疫苗或药物的生产越来简易并趋于产业化,这些都是传统疫苗无法比拟的。
VP2蛋白是IBDV的主要结构蛋白和宿主保护性抗原,也是病毒衣壳的主要成分,与病毒中和抗体的诱导与识别、病毒毒力变异、病毒的抗原漂移、细胞凋亡的诱导等有很大关系[5, 6],为此,采用近年流行的超强毒株制备了IBD
VP2亚单位灭活疫苗。
为了解鸡传染性法氏囊病亚单位灭活疫苗免疫鸡只琼扩抗
体效价与攻毒保护之间是否存在一定的相关性,将不同批次的疫苗以不同的免疫剂量免疫SPF鸡后测定琼扩抗体效价并攻毒,现将试验报告如下。
1.1 材料
1.1.1 疫苗将表达IBDV VP2的重组大肠杆菌发酵菌体破碎后离心取上清,纯
化后检测其琼扩效价,调整至不低于1:16用于配苗,水相:油相为1:3。
制备3批
疫苗,批号分别为201001、201002、201003,100ml/瓶,经各项检验合格,
置2~8℃保存备用。
1.1.2 SPF鸡120只SPF鸡购自北京梅里亚维通实验动物技术有限公司。
1.1.3 攻毒用的毒种鸡传染性法氏囊病病毒BC6/85株,购自中国兽医药品监
察所。
1.1.4 诊断抗原鸡传染性法氏囊病琼扩诊断抗原购自中国兽医药品监察所。
1.2 方法
将120只21日龄SPF鸡随机分成12组,每组10只,分别接种3个批次疫苗,每个批次的疫苗肌肉注射接种剂量分别为0.05、0.1、0.2、0.3ml,另10只不接
种作为对照,免疫后21日采血,采用琼扩方法检测抗体,并点眼攻IBD强毒
0.1ml⁄只(实含病毒量为100BID),观察记录发病情况并于攻毒后72~96h剖检,
观察法氏囊病变。
具体试验设计方案见表1。
3批疫苗以不同剂量肌肉注射21日龄SPF鸡,21日后测血清琼扩效价同时用
100BID的强毒BC6/85攻毒,结果显示不同批次、不同剂量IBD亚单位灭活疫苗免疫的SPF鸡,当免疫剂量为0.05ml/只时,部分免疫鸡琼扩抗体效价转阳,攻
毒保护数为5/10~7/10;免疫剂量为0.1ml/只时,少数免疫鸡的琼扩抗体效价为阴性,攻毒保护数为当琼扩抗体效价为8/10~9/10;免疫剂量为0.2ml/只以上时,免疫鸡只琼扩抗体均为阳性,攻毒保护数均为10/10。
将每只鸡的琼扩抗效价与
攻毒保护情况进行一一对照,表明琼扩抗体效价与攻毒保护具有相关性。
具体试验数据见表2。
3.1 鸡只的个体差异
不同批次疫苗相同免疫剂量攻毒保护结果不同可能由于鸡只的个体差异。
不同批次IBD亚单位灭活疫苗免疫的SPF鸡,当免疫剂量为0.05ml/只时,攻毒保护数为
5/10~7/10;免疫剂量为0.1ml/只时,攻毒保护数为当琼扩抗体效价为8/10~
9/10。
不同批次疫苗免疫剂量相同时,保护率存在一定差异,推测可能是由于鸡
只的个体差异造成的这一结果。
3.2 抗体效价与攻毒保护的相关性
采用实验室制备的3批鸡传染性法氏囊病VP2亚单位疫苗以不同免疫剂量免疫21日龄SPF鸡,免疫后21日采血分离血清测定琼扩抗体效价并用BC6/85株强毒以100BID/只剂量攻毒,攻毒后72~96h剖杀所有试验鸡,观察法氏囊病变,将每
只鸡的琼扩抗体效价与攻毒保护情况一一对应,结果显示,所有琼扩抗体转阳的鸡
只均能抵抗强毒的攻击,琼扩抗体效价与攻毒保护具有一定的相关性,但由于本文所用的疫苗批次及试验鸡数量有限,琼扩抗体效价转阳鸡只是否一定能获得攻毒保护尚需大规模的试验验证。
【相关文献】
[1] (美)B.W.卡尔尼克主编, 高福, 刘文军主译. 禽病学第9版[M]. 北京: 中国农业大学出版社, 1991, 554-556.
[2] 周蛟等. 北京地区鸡传染性法氏囊病病原分离[J]. 中国兽医杂志. 1982, 7: 25-26.
[3] 毕英佐. 广东地区鸡传染性法氏囊病的研究[J]. 华南农业大学学报, 1985, 1: 46-59.
[4] 李德山, 武志强, 陈冠春. 鸡传染性法氏囊病超强毒株的分离和初步鉴定[J]. 中国畜禽传染病, 1999, 6: 3-7.
[5] 包晓玮, 张厚双, 高宏雷. 鸡传染性法氏囊病超强毒Gx及其致弱毒株基因组B节段的克隆和序列分析[J]. 中国预防兽医学报, 2005, 27(2): 85-89.
[6] 蒋静, 孙建和, 陆萍. 传染性法氏囊病病毒上海超强毒株VP2-4-3基因真核质粒的构建与表达[J]. 华中农业大学学报, 2004, 23(2): 179-182.
[7] 白文彬, 于康震. 动物传染病诊断学[M]. 北京: 中国农业出版社, 2002: 138-142.。