高压氧对急性一氧化碳中毒大鼠少突胶质细胞前体细胞ADAM10 mRNA表达的影响
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ｎｅｏｎａｔａｌ ｒａｔ ｗｅｒｅ ｃｕｌｔｕｒｅｄ ｉｎ ｖｉｔｒｏ ａｎｄ ｄｉｖｉｄｅｄ ｉｎｔｏ ｔｈｒｅｅ ｇｒｏｕｐｓ：ｃｏｎｔｒｏｌ，ＡＣＯＰ ａｎｄ ＨＢＯ ｇｒｏｕｐｓ．Ｃｏｎｔｒｏｌ ｇｒｏｕｐ：ｎｏ
ｔｒｅａｔｍｅｎｔ．ＡＣＯＰ ｇｒｏｕｐ：ｔｈｅ ＯＰＣ ｃｅｌｌｓ ｗｅｒｅ ｐｌａｃｅｄ ｉｎ ａ ｓｅａｌｅｄ ｃｏｎｔａｉｎｅｒ ａｎｄ ｉｎｊｅｃｔｅｄ ｗｉｔｈ １％ ｃａｒｂｏｎ ｍｏｎｏｘｉｄｅ ａｅ
ＯＰＣｓ增 殖和分化 能力 下降 ，ＨＢ０可一定 程度 改善 人动物 实验 舱 中 ，以 ９８％０ 、２％Ｃ０ 洗舱 １０ ｍｉｎ，然后
ＯＰＣｓ的功 能 ，但机 制仍 不 清楚＿７＿。因此 ．本实 验采用 差 １５ ｍｉｎ内加压 至 ０．３５ ＭＰａ并停 留 ２ ｈ，２０ ｍｉｎ内减 至
速贴壁法体外纯化 培养大 鼠 ＯＰＣｓ，建立 ＯＰＣｓ的 ＡＣＯＰ 常压 ，处理期间舱温控制在 ３７￣Ｃ，余处理同 ＡＣＯＰ组
化 ，ＡＣＯＰ组 逐渐 减 少 ，ＨＢＯ组 逐 渐 增 多 ，差 异 有 统 计 学 意 义 （Ｆ＝８．４９１，Ｐ＜０．０１）；与 对 照 组 在 ６、２４ ｈ和 ４８ ｈ
三个时间点大鼠少突胶质细胞前体细胞 ＡＤＡＭ１０ ｍＲＮＡ水平 比较 ，ＡＣＯＰ组均明显减少 ，ＨＢＯ组均明显增加（Ｆ：
８８．６９２，Ｐ＜０．０１）。 结 论 大 鼠少突 胶 质 细胞 前体 细胞 ＡＤＡＭ１０分 子 在一 氧 化 碳 中毒 造成 的脑 白质 损 伤 及 高 压 氧治疗 中发挥 重要 作用 。
急性一氧 化碳 中毒 （ａｃｕｔｅ ｃａｒｂｏｎ ｍｏｎｏｘｉｄｅ ｐｏｉｓｏｎ ｉｎｇ，ＡＣＯＰ）：￣ 常见 的职业性及生活性 中毒之一 ，可 造成全身多个脏器损害 ，其中以中枢神经系统 （ｃｅｎｔｒａｌ ｎｅｒｖｏｕｓ ｓｙｓｔｅｍ，ＣＮＳ）损伤危 害最 大 ，造成 巨大社 会 、 经济负担 ［１］。一 氧化碳 中毒迟发 性脑病 （ｄｅｌａｙｅｄ ｅｎ—
多生理 病理 过程 ，是 阿尔 兹海 默病 、肿瘤 、炎症 等疾病 摇 ｌ６～２０ ｈ后转 移振摇 后 的细 胞上 清 ，种 于未 包 被 的
的潜在治疗靶点『３＿。已有研究发现，ＡＤＡＭ１０不但在外 １００ ｍｍ培养皿 （Ｃｏｒｎｉｎｇ）中 ，置 于 ３７ ５％Ｃ０ 培 养
周 神经 系统 （ｐｅｒｉｐｈｅｒａｌ ｎｅｒｖｏｕｓ ｓｙｓｔｅｍ，ＰＮＳ）的雪 旺氏 箱 中 ．静 置贴壁 ３０ ｍｉｎ，吸取上 清 ，收集 上清 于离 心 管
ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ ａｍｏｎｇ ｔｈｅ ｔｈｒｅｅ ｇｒｏｕｐｓ （Ｆ＝８．４９１，Ｐ＜Ｏ．Ｏ１）．Ｃｏｍｐａｒｅｄ ｗｉｔｈ ｃｏｎｔｒｏｌ ｇｒｏｕｐ，ｔｈｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ＡＤＡＭ１０ ｍＲＮＡ ａｔ ６，２４，４８ ｈ ｗａｓ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ ｒｅｄｕｃｅｄ ｉｎ ＡＣＯＰ ｇｒｏｕｐ，ｗｈｉｌｅ ｗａｓ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ ｉｎｃｒｅａｓｅｄ ｉｎ ＨＢＯ ｇｒｏｕｐ （Ｆ＝ ８８．６９２，Ｐ＜０．０１）．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ ＡＤＡＭ １０ ｏｆ ＯＰＣｓ ｍａｙ ｐｌａｙ ａｎ ｉｍｐｏｒｔａｎｔ ｒｏｌｅ ｉｎ ｔｈｅ ｉｎｊｕｒｙ ｏｆ ｃｅｎｔｒａｌ ｎｅｒｖｏｕｓ ｓｙｓｔｅｍ
ＧＵＯＤａｚｈｉ ＦＥＮＧ Ｙｕａｎ ＨＵＨｕｉｊｕｎ ＬＩＮａ ＰＡＮ Ｓｈｕｙｉ Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｈｙｐｅｒｂａｒｉｃ Ｏｘｙｇｅｎ Ｎａｖｙ Ｇｅｎｅｒａｌ Ｈｏｓｐｉｔａｌ，Ｂｅｉｊｉｎｇ １０００４８，Ｃｈｉｎａ ［Ａｂｓｔｒａｃｔ］Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ Ｔｏ ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅ ｔｈｅ ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｈｙｐｅｒｂａｒｉｃ ｏｘｙｇｅｎ（ＨＢＯ）ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｏｎ ｔｈｅ ｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ Ｏｌｉｇｏｄｅｎｄｒｏ— ｃｙｔｅ Ｐｒｅｃｕｒｓｏｒｓ（ＯＰＣｓ）ＡＤＡＭ１０ ｍＲＮＡ ｉｎ ｔｈｅ ａｃｕｔｅ ｃａｒｂｏｎ ｍｏｎｏｘｉｄｅ ｐｏｉｓｏｎｉｎｇ（ＡＣＯＰ）ｒａｔｓ．Ｍｅｔｈｏｄｓ ＯＰＣｓ ｃｅｌｌｓ ｏｆ
ＤＥＡＣＭＰ）是 ＡＣＯＰ后最 主要 的神经精 神后 遗症 ，表 现 温 离心 机 中 以 １６００ ｒ／ｍｉｎ的速度 离 心 ８ ｍｉｎ，弃 去 Ｅ 为部分患者急性中毒症状消失以后 ，经过数天或数周 清液 ，用 培 养基 重 悬 细胞 沉 淀 ，接 种 于用 多 聚赖 氨 酸 表现 正 常 或接 近 正 常 的假 愈 期后 又 出 现 以痴 呆 为 主 预包被 的 细胞培 养 瓶 中 ，置 于普 通 细胞 培养 箱 （３７￣Ｃ、 的精 神 、神 经症 状 。脑 白质 脱髓 鞘 改 变 是 ＤＥＡＣＭＰ ５％ｃ０２）中培养 ，次 日更换培养基 ，每 ３～４天换液 １次 ，
脱 髓鞘 病变 ，我们推 测 ＡＤＡＭ１０可能参 与 ＡＣＯＰ后 脱 １．３ 实验 分 组 及 处 理
髓 鞘 病变 的病 理生理 过 程 。
ＯＰＣｓ纯化培 养 ３ ｄ后 ，将 细胞分 为 ｉ组 ：对 照组 、
高 压 氧 （Ｈｙｐｅｒｂａｒｉｃ Ｏｘｙｇｅｎ，ＨＢＯ）是 治 疗 ＡＣＯＰ ＡＣＯＰ组和高压氧组。①对照组 ：无 ＣＯ处理 ；＠ＡＣＯＰ
ＣＨＩＮＡ ＭＥＤＩＣＡＬ ＨＥＲＡＬＤ Ｖｏ１．１５ Ｎｏ．５ Ｆｅｂｒｕａｒｙ ２０１ ８ 豳
· 论 著 ·
中 国医药导报 ２０１８年 ２月第 １５卷 第 ５期
ｃｅｐｈａｌｏｐａｔｈｙ ａｆｔｅｒ ａｃｕｔｅ ｃａｒｂｏｎ ｍｏｎｏｘｉｄｅ ｐｏｉｓｏｎｉｎｇ， 胞悬液用 ２００目的筛 网过 滤 ，过滤后悬 液置于 ４℃的低
ａｆｔｅｒ ＡＣＯＰ ａｎｄ ＨＢＯ． ［Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ］Ｈｙｐｅｒｂａｒｉｃ Ｏｘｙｇｅｎ；ａｃｕｔｅ ｃａｒｂｏｎ ｍｏｎｏｘｉｄｅ ｐｏｉｓｏｎｉｎｇ；Ｏｌｉｇｏｄｅｎｄｒｏｃｙｔｅ ｐｒｅｃｕｒｓｏｒｓ；ＡＤＡＭ１０
【基金项 目】北京市 自然科学基金资助项 目（７１５３１７５）；国家 自然科学基金资助项 目（８１４０１０６３）。 【通讯作者】潘树义（１９６３．３－），男 ，博 士 ，主任医师 ，海军总 医院高压氧科主任 ；研究方 向：各类重症神经损伤的高压氧 综 合治 疗 。
细胞 有 表达 ，而 且 在 ＣＮＳ的少 突胶 质 细胞 前体 细胞 中 ８００ ｒ／ｍｉｎ离 心 ５ ｍｉｎ，弃 去 上 清 ，用 ＯＰＣｓ培 养 基
（Ｏｌｉｇｏｄｅｎｄｒｏｃｙｔｅ Ｐｒｅｃｕｒｓｏｒｓ．ＯＰＣｓ）和 少突胶 质 系细胞 （含 １０ ｎｇ／ｍＬ ＰＤＧＦ—ＡＡ、１０ ｎｇ／ｍＬ ＦＧＦ、１ｘＮ２、１ｘＢ２７
Ａｎｄ Ｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅ，ＡＤＡＭ）家 族 的 重要 一员 ，具 有 参数 为 ２００ ｒ／ｍｉｎ，先 预振 摇 ２ ｈ，然后 弃上 清 ，更 换 新
调 节 细胞黏 附和金 属 蛋 白酶双 重功 能 ，参 与发育 等诸 的培养基 ，继续 置 于 ３７％恒温 摇床 振摇 ，参数不 变 ，振
【关 键词 】高压氧 ；一氧 化碳 中毒 ；少 突胶 质 细胞 前体 细胞 ；ＡＤＡＭ１０
【中图分 类号 】Ｒ５９５．１
【文 献标 识码 】Ａ
【文章 编号 】１６７３—７２１０（２０１８｝０２（ｂ）一０００９—０４
Ｈｙｐｅｒｂａｒｉｃ ｏｘｙｇｅｎ ｏｎ ｔｈｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ＡＤＡＭ １０ ｏｆ ｒａｔ ０ｌｉｇＯｄｅｎｄｒ０ｃｙｔｅ ｐｒｅｃｕｒｓｏｒｓ ｉｎ ｖｉｔｒｏ ａｆ ｔｅｒ ａｃｕｔｅ ｃａｒｂｏｎ ｍ ｏｎｏｘｉｄｅ ｐｏｉｓｏｎｉｎｇ
中国医药导报２０１８年２月第１５卷第５期
论 著
高压氧对急性一氧化碳 中毒大鼠少突胶质细胞 前体细胞 ＡＤＡＭ１０ ｍＲＮＡ 表 达的影 响
郭大 志 冯 园 胡 慧军 李 娜 潘 树 义 海军总医院高压氧科 ，北京 １０００４８
［摘要】目的 探讨 高压氧对急性一氧化碳 中毒大鼠少突胶质细胞前体细胞 ＡＤＡＭ１０ ｍＲＮＡ表 达的影响 方 法 体外纯化培养新生大鼠皮层少突胶质细胞前体细胞 （ＯＰｃｓ），按 ３种处理方式分为对照组 、急性一氧化碳 中毒
（Ｏｌｉｇｏｄｅｎｄｒｏｃｙｔｅ，ＯＬｓ）也 有 表 达 ＿４１。鉴 于 ＡＤＡＭ１０蛋 的 ＤＭＥＭ／Ｆ１２培养 基 ）重 悬后 ，种 于 含有 ＰＬＩ 预 包 被
白的分 布特点 ．结合 ＤＥＡＣＭＰ最主要 病理特 征是 白质 的盖玻 片 的 ２４孔 板及 ９６孔 板 中。ＯＰＣｓ隔天换 液 。
组 （ＡＣＯＰ组 ）、高 压 氧组 （ＨＢＯ组 ）。对 照组 不 进行 任何处 理 ；ＡＣＯＰ组将 细 胞放 在 密 闭容 器 内 ，根据 体积 比例 注 入
１％一氧 化碳 ；ＨＢＯ组 将 一 氧化碳 处 理 的 ＯＰＣｓ放人 动 物实 验 舱 中 ，以 ９８％０ 、２％Ｃ０：洗 舱 １０ ｍｉｎ，然 后 １５ ｍｉｎ内
最显著 的病理学和颅脑影像学表现 ，但其机制仍不 直至混合胶质细胞长满培养瓶底 （约 １０ ｄ）。待混合胶
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清楚 Ｉ２１。
质 细胞 长满 培 养 瓶瓶 底 后 ，拧 紧培 养瓶 瓶 盖 ，并 用 封
ＡＤＡＭ１０是 解 聚 素 和 金 属 蛋 白酶 （Ａ Ｄｉｓｉｎｔｅｇｒｉｎ 口胶 封闭瓶 口 ，将 培养瓶 置于 ３７￣Ｃ恒温摇 床振 摇 ，设
和 ＤＥＡＣＭＰ的重 要方 法 之一 。有研究 表 明 ，ＨＢＯ可 促 组 ：将细胞 放在 密 闭容 器 内 ，根据体 积 比例 注入 １％ＣＯ
进 ＡＣＯＰ后损 伤髓 鞘再 生 ，还具 有诱 导神 经 干细胞 分 （用一氧化碳检 测仪检测 ，容器 内一氧化 碳浓 度 为
化 的功 能 。我 们 前 期 研 究 发 现 ，ＡＣＯＰ导 致 大 鼠 １０ ０００ ｐｐｍ）；③ＨＢ０组 ：将一氧化碳处理的 ＯＰＣｓ放
加压至 ０．３５ ＭＰａ并停 留２ ｈ，２０ ｍｉｎ内减至常压 ，处理期间舱温控制在 ３７％，余处理 同 ＡＣＯＰ组 。以 ＨＢＯ处理后
即刻为 ０ ｈ，三组 均 在 ６、２４ ｈ和 ４８ ｈ时 间点取 材 ；采用 ＲＴ—ＰＣＲ方法观 察 不 同时 间点 ＯＰＣｓ细胞 ＡＤＡＭＩＯ ｍＲＮＡ
的表达。 结果 在 ６、２４ ｈ和 ４８ ｈ三个时间点 ，大鼠少突胶质细胞前体细胞 ＡＤＡＭ１０ ｍＲＮＡ在对照组无明显变
ｃｏｒｄｉｎｇ ｔｏ ｔｈｅ ｖｏｌｕｍｅ ｒａｔｉｏ，ＨＢＯ ｇｒｏｕｐ：ＯＰＣｓ ｃｅｌｌｓ ａｆｔｅｒ ＡＣＯＰ ｗｅｒｅ ｐｌａｃｅｄ ｉｎ ａｎｉｍａｌ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｓ ｏｆ ｈｙｐｅｒｂａｒｉｃ ｏｘｙｇｅｎ ｃｈａｍｂｅｒ，ｗｉｔｈ ９８％ Ｏｚ，２％ ＣＯ２ ｗａｓｈｉｎｇ １０ ｍｉｎ，ｔｈｅｎ １５ ｍｉｎ ０．３５ Ｍ Ｐａ ｐｒｅｓｓｕｒｅ ｓｔａｙｉｎｇ ２ ｈ，ａｔ ｌａｓｔ ２０ ｍｉｎ ｒｅｄｕｃｉｎｇ ｔｏ ｎｏｒｍａｌ ｐｒｅｓｓｕｒｅ．Ｔｈｅ ｃｈａｍｂｅｒ ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ ｗａｓ ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ ａｔ ３７％ ．Ｔｈｅ ｅｎｄ ｔｉｍｅ ｏｆ ＨＢＯ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｗａｓ ｓｅｔ ａｓ ０ ｈ．ｔｈｅ ｔｈｒｅｅ ｇｒｏｕｐｓ ｗｅｒｅ ｃｏｌｌｅｃｔｅｄ ａｔ ６ ，２４ ｈ ａｎｄ ４８ ｈ ｆｏｒ ｓｕｂｓｅｑｕｅｎｔ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｓ．Ｔｈｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ＡＤＡＭ １０ ｍＲＮＡ ａｔ ６， ２４ ｈ。ａｎｄ ４８ ｈ ｗｅｒｅ ｄｅｔｅｃｔｅｄ ｂｙ ＲＴ—ＰＣＲ．Ｒｅｓｕｌｔｓ ６，２４ ｈ，ａｎｄ ４８ ｈ，ｔｈｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ＡＤＡＭ １０ ｍＲＮＡ ｗａｓ ｎｏ ｃｈａｎｇｅ ｉｎ ｃｏｎｔｒｏｌ ｇｒｏｕｐ，ｂｕｔ ｇｒａｄｕａｌｌｙ ｄｅｃｒｅａｓｅｄ ｉｎ ＡＣＯＰ ｇｒｏｕｐ，ａｎｄ ｉｎｃｒｅａｓｅｄ ｉｎ ＨＢＯ ｇｒｏｕｐ，ｔｈｅｒｅ ｗａｓ ｓｔａｔｉｓｔｉｃａｌｌｙ
ｔｒｅａｔｍｅｎｔ．ＡＣＯＰ ｇｒｏｕｐ：ｔｈｅ ＯＰＣ ｃｅｌｌｓ ｗｅｒｅ ｐｌａｃｅｄ ｉｎ ａ ｓｅａｌｅｄ ｃｏｎｔａｉｎｅｒ ａｎｄ ｉｎｊｅｃｔｅｄ ｗｉｔｈ １％ ｃａｒｂｏｎ ｍｏｎｏｘｉｄｅ ａｅ
ＯＰＣｓ增 殖和分化 能力 下降 ，ＨＢ０可一定 程度 改善 人动物 实验 舱 中 ，以 ９８％０ 、２％Ｃ０ 洗舱 １０ ｍｉｎ，然后
ＯＰＣｓ的功 能 ，但机 制仍 不 清楚＿７＿。因此 ．本实 验采用 差 １５ ｍｉｎ内加压 至 ０．３５ ＭＰａ并停 留 ２ ｈ，２０ ｍｉｎ内减 至
速贴壁法体外纯化 培养大 鼠 ＯＰＣｓ，建立 ＯＰＣｓ的 ＡＣＯＰ 常压 ，处理期间舱温控制在 ３７￣Ｃ，余处理同 ＡＣＯＰ组
化 ，ＡＣＯＰ组 逐渐 减 少 ，ＨＢＯ组 逐 渐 增 多 ，差 异 有 统 计 学 意 义 （Ｆ＝８．４９１，Ｐ＜０．０１）；与 对 照 组 在 ６、２４ ｈ和 ４８ ｈ
三个时间点大鼠少突胶质细胞前体细胞 ＡＤＡＭ１０ ｍＲＮＡ水平 比较 ，ＡＣＯＰ组均明显减少 ，ＨＢＯ组均明显增加（Ｆ：
８８．６９２，Ｐ＜０．０１）。 结 论 大 鼠少突 胶 质 细胞 前体 细胞 ＡＤＡＭ１０分 子 在一 氧 化 碳 中毒 造成 的脑 白质 损 伤 及 高 压 氧治疗 中发挥 重要 作用 。
急性一氧 化碳 中毒 （ａｃｕｔｅ ｃａｒｂｏｎ ｍｏｎｏｘｉｄｅ ｐｏｉｓｏｎ ｉｎｇ，ＡＣＯＰ）：￣ 常见 的职业性及生活性 中毒之一 ，可 造成全身多个脏器损害 ，其中以中枢神经系统 （ｃｅｎｔｒａｌ ｎｅｒｖｏｕｓ ｓｙｓｔｅｍ，ＣＮＳ）损伤危 害最 大 ，造成 巨大社 会 、 经济负担 ［１］。一 氧化碳 中毒迟发 性脑病 （ｄｅｌａｙｅｄ ｅｎ—
多生理 病理 过程 ，是 阿尔 兹海 默病 、肿瘤 、炎症 等疾病 摇 ｌ６～２０ ｈ后转 移振摇 后 的细 胞上 清 ，种 于未 包 被 的
的潜在治疗靶点『３＿。已有研究发现，ＡＤＡＭ１０不但在外 １００ ｍｍ培养皿 （Ｃｏｒｎｉｎｇ）中 ，置 于 ３７ ５％Ｃ０ 培 养
周 神经 系统 （ｐｅｒｉｐｈｅｒａｌ ｎｅｒｖｏｕｓ ｓｙｓｔｅｍ，ＰＮＳ）的雪 旺氏 箱 中 ．静 置贴壁 ３０ ｍｉｎ，吸取上 清 ，收集 上清 于离 心 管
ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ ａｍｏｎｇ ｔｈｅ ｔｈｒｅｅ ｇｒｏｕｐｓ （Ｆ＝８．４９１，Ｐ＜Ｏ．Ｏ１）．Ｃｏｍｐａｒｅｄ ｗｉｔｈ ｃｏｎｔｒｏｌ ｇｒｏｕｐ，ｔｈｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ＡＤＡＭ１０ ｍＲＮＡ ａｔ ６，２４，４８ ｈ ｗａｓ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ ｒｅｄｕｃｅｄ ｉｎ ＡＣＯＰ ｇｒｏｕｐ，ｗｈｉｌｅ ｗａｓ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ ｉｎｃｒｅａｓｅｄ ｉｎ ＨＢＯ ｇｒｏｕｐ （Ｆ＝ ８８．６９２，Ｐ＜０．０１）．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ ＡＤＡＭ １０ ｏｆ ＯＰＣｓ ｍａｙ ｐｌａｙ ａｎ ｉｍｐｏｒｔａｎｔ ｒｏｌｅ ｉｎ ｔｈｅ ｉｎｊｕｒｙ ｏｆ ｃｅｎｔｒａｌ ｎｅｒｖｏｕｓ ｓｙｓｔｅｍ
ＧＵＯＤａｚｈｉ ＦＥＮＧ Ｙｕａｎ ＨＵＨｕｉｊｕｎ ＬＩＮａ ＰＡＮ Ｓｈｕｙｉ Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｈｙｐｅｒｂａｒｉｃ Ｏｘｙｇｅｎ Ｎａｖｙ Ｇｅｎｅｒａｌ Ｈｏｓｐｉｔａｌ，Ｂｅｉｊｉｎｇ １０００４８，Ｃｈｉｎａ ［Ａｂｓｔｒａｃｔ］Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ Ｔｏ ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅ ｔｈｅ ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｈｙｐｅｒｂａｒｉｃ ｏｘｙｇｅｎ（ＨＢＯ）ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｏｎ ｔｈｅ ｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ Ｏｌｉｇｏｄｅｎｄｒｏ— ｃｙｔｅ Ｐｒｅｃｕｒｓｏｒｓ（ＯＰＣｓ）ＡＤＡＭ１０ ｍＲＮＡ ｉｎ ｔｈｅ ａｃｕｔｅ ｃａｒｂｏｎ ｍｏｎｏｘｉｄｅ ｐｏｉｓｏｎｉｎｇ（ＡＣＯＰ）ｒａｔｓ．Ｍｅｔｈｏｄｓ ＯＰＣｓ ｃｅｌｌｓ ｏｆ
ＤＥＡＣＭＰ）是 ＡＣＯＰ后最 主要 的神经精 神后 遗症 ，表 现 温 离心 机 中 以 １６００ ｒ／ｍｉｎ的速度 离 心 ８ ｍｉｎ，弃 去 Ｅ 为部分患者急性中毒症状消失以后 ，经过数天或数周 清液 ，用 培 养基 重 悬 细胞 沉 淀 ，接 种 于用 多 聚赖 氨 酸 表现 正 常 或接 近 正 常 的假 愈 期后 又 出 现 以痴 呆 为 主 预包被 的 细胞培 养 瓶 中 ，置 于普 通 细胞 培养 箱 （３７￣Ｃ、 的精 神 、神 经症 状 。脑 白质 脱髓 鞘 改 变 是 ＤＥＡＣＭＰ ５％ｃ０２）中培养 ，次 日更换培养基 ，每 ３～４天换液 １次 ，
脱 髓鞘 病变 ，我们推 测 ＡＤＡＭ１０可能参 与 ＡＣＯＰ后 脱 １．３ 实验 分 组 及 处 理
髓 鞘 病变 的病 理生理 过 程 。
ＯＰＣｓ纯化培 养 ３ ｄ后 ，将 细胞分 为 ｉ组 ：对 照组 、
高 压 氧 （Ｈｙｐｅｒｂａｒｉｃ Ｏｘｙｇｅｎ，ＨＢＯ）是 治 疗 ＡＣＯＰ ＡＣＯＰ组和高压氧组。①对照组 ：无 ＣＯ处理 ；＠ＡＣＯＰ
ＣＨＩＮＡ ＭＥＤＩＣＡＬ ＨＥＲＡＬＤ Ｖｏ１．１５ Ｎｏ．５ Ｆｅｂｒｕａｒｙ ２０１ ８ 豳
· 论 著 ·
中 国医药导报 ２０１８年 ２月第 １５卷 第 ５期
ｃｅｐｈａｌｏｐａｔｈｙ ａｆｔｅｒ ａｃｕｔｅ ｃａｒｂｏｎ ｍｏｎｏｘｉｄｅ ｐｏｉｓｏｎｉｎｇ， 胞悬液用 ２００目的筛 网过 滤 ，过滤后悬 液置于 ４℃的低
ａｆｔｅｒ ＡＣＯＰ ａｎｄ ＨＢＯ． ［Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ］Ｈｙｐｅｒｂａｒｉｃ Ｏｘｙｇｅｎ；ａｃｕｔｅ ｃａｒｂｏｎ ｍｏｎｏｘｉｄｅ ｐｏｉｓｏｎｉｎｇ；Ｏｌｉｇｏｄｅｎｄｒｏｃｙｔｅ ｐｒｅｃｕｒｓｏｒｓ；ＡＤＡＭ１０
【基金项 目】北京市 自然科学基金资助项 目（７１５３１７５）；国家 自然科学基金资助项 目（８１４０１０６３）。 【通讯作者】潘树义（１９６３．３－），男 ，博 士 ，主任医师 ，海军总 医院高压氧科主任 ；研究方 向：各类重症神经损伤的高压氧 综 合治 疗 。
细胞 有 表达 ，而 且 在 ＣＮＳ的少 突胶 质 细胞 前体 细胞 中 ８００ ｒ／ｍｉｎ离 心 ５ ｍｉｎ，弃 去 上 清 ，用 ＯＰＣｓ培 养 基
（Ｏｌｉｇｏｄｅｎｄｒｏｃｙｔｅ Ｐｒｅｃｕｒｓｏｒｓ．ＯＰＣｓ）和 少突胶 质 系细胞 （含 １０ ｎｇ／ｍＬ ＰＤＧＦ—ＡＡ、１０ ｎｇ／ｍＬ ＦＧＦ、１ｘＮ２、１ｘＢ２７
Ａｎｄ Ｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅ，ＡＤＡＭ）家 族 的 重要 一员 ，具 有 参数 为 ２００ ｒ／ｍｉｎ，先 预振 摇 ２ ｈ，然后 弃上 清 ，更 换 新
调 节 细胞黏 附和金 属 蛋 白酶双 重功 能 ，参 与发育 等诸 的培养基 ，继续 置 于 ３７％恒温 摇床 振摇 ，参数不 变 ，振
【关 键词 】高压氧 ；一氧 化碳 中毒 ；少 突胶 质 细胞 前体 细胞 ；ＡＤＡＭ１０
【中图分 类号 】Ｒ５９５．１
【文 献标 识码 】Ａ
【文章 编号 】１６７３—７２１０（２０１８｝０２（ｂ）一０００９—０４
Ｈｙｐｅｒｂａｒｉｃ ｏｘｙｇｅｎ ｏｎ ｔｈｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ＡＤＡＭ １０ ｏｆ ｒａｔ ０ｌｉｇＯｄｅｎｄｒ０ｃｙｔｅ ｐｒｅｃｕｒｓｏｒｓ ｉｎ ｖｉｔｒｏ ａｆ ｔｅｒ ａｃｕｔｅ ｃａｒｂｏｎ ｍ ｏｎｏｘｉｄｅ ｐｏｉｓｏｎｉｎｇ
中国医药导报２０１８年２月第１５卷第５期
论 著
高压氧对急性一氧化碳 中毒大鼠少突胶质细胞 前体细胞 ＡＤＡＭ１０ ｍＲＮＡ 表 达的影 响
郭大 志 冯 园 胡 慧军 李 娜 潘 树 义 海军总医院高压氧科 ，北京 １０００４８
［摘要】目的 探讨 高压氧对急性一氧化碳 中毒大鼠少突胶质细胞前体细胞 ＡＤＡＭ１０ ｍＲＮＡ表 达的影响 方 法 体外纯化培养新生大鼠皮层少突胶质细胞前体细胞 （ＯＰｃｓ），按 ３种处理方式分为对照组 、急性一氧化碳 中毒
（Ｏｌｉｇｏｄｅｎｄｒｏｃｙｔｅ，ＯＬｓ）也 有 表 达 ＿４１。鉴 于 ＡＤＡＭ１０蛋 的 ＤＭＥＭ／Ｆ１２培养 基 ）重 悬后 ，种 于 含有 ＰＬＩ 预 包 被
白的分 布特点 ．结合 ＤＥＡＣＭＰ最主要 病理特 征是 白质 的盖玻 片 的 ２４孔 板及 ９６孔 板 中。ＯＰＣｓ隔天换 液 。
组 （ＡＣＯＰ组 ）、高 压 氧组 （ＨＢＯ组 ）。对 照组 不 进行 任何处 理 ；ＡＣＯＰ组将 细 胞放 在 密 闭容 器 内 ，根据 体积 比例 注 入
１％一氧 化碳 ；ＨＢＯ组 将 一 氧化碳 处 理 的 ＯＰＣｓ放人 动 物实 验 舱 中 ，以 ９８％０ 、２％Ｃ０：洗 舱 １０ ｍｉｎ，然 后 １５ ｍｉｎ内
最显著 的病理学和颅脑影像学表现 ，但其机制仍不 直至混合胶质细胞长满培养瓶底 （约 １０ ｄ）。待混合胶
Байду номын сангаас
清楚 Ｉ２１。
质 细胞 长满 培 养 瓶瓶 底 后 ，拧 紧培 养瓶 瓶 盖 ，并 用 封
ＡＤＡＭ１０是 解 聚 素 和 金 属 蛋 白酶 （Ａ Ｄｉｓｉｎｔｅｇｒｉｎ 口胶 封闭瓶 口 ，将 培养瓶 置于 ３７￣Ｃ恒温摇 床振 摇 ，设
和 ＤＥＡＣＭＰ的重 要方 法 之一 。有研究 表 明 ，ＨＢＯ可 促 组 ：将细胞 放在 密 闭容 器 内 ，根据体 积 比例 注入 １％ＣＯ
进 ＡＣＯＰ后损 伤髓 鞘再 生 ，还具 有诱 导神 经 干细胞 分 （用一氧化碳检 测仪检测 ，容器 内一氧化 碳浓 度 为
化 的功 能 。我 们 前 期 研 究 发 现 ，ＡＣＯＰ导 致 大 鼠 １０ ０００ ｐｐｍ）；③ＨＢ０组 ：将一氧化碳处理的 ＯＰＣｓ放
加压至 ０．３５ ＭＰａ并停 留２ ｈ，２０ ｍｉｎ内减至常压 ，处理期间舱温控制在 ３７％，余处理 同 ＡＣＯＰ组 。以 ＨＢＯ处理后
即刻为 ０ ｈ，三组 均 在 ６、２４ ｈ和 ４８ ｈ时 间点取 材 ；采用 ＲＴ—ＰＣＲ方法观 察 不 同时 间点 ＯＰＣｓ细胞 ＡＤＡＭＩＯ ｍＲＮＡ
的表达。 结果 在 ６、２４ ｈ和 ４８ ｈ三个时间点 ，大鼠少突胶质细胞前体细胞 ＡＤＡＭ１０ ｍＲＮＡ在对照组无明显变
ｃｏｒｄｉｎｇ ｔｏ ｔｈｅ ｖｏｌｕｍｅ ｒａｔｉｏ，ＨＢＯ ｇｒｏｕｐ：ＯＰＣｓ ｃｅｌｌｓ ａｆｔｅｒ ＡＣＯＰ ｗｅｒｅ ｐｌａｃｅｄ ｉｎ ａｎｉｍａｌ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｓ ｏｆ ｈｙｐｅｒｂａｒｉｃ ｏｘｙｇｅｎ ｃｈａｍｂｅｒ，ｗｉｔｈ ９８％ Ｏｚ，２％ ＣＯ２ ｗａｓｈｉｎｇ １０ ｍｉｎ，ｔｈｅｎ １５ ｍｉｎ ０．３５ Ｍ Ｐａ ｐｒｅｓｓｕｒｅ ｓｔａｙｉｎｇ ２ ｈ，ａｔ ｌａｓｔ ２０ ｍｉｎ ｒｅｄｕｃｉｎｇ ｔｏ ｎｏｒｍａｌ ｐｒｅｓｓｕｒｅ．Ｔｈｅ ｃｈａｍｂｅｒ ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ ｗａｓ ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ ａｔ ３７％ ．Ｔｈｅ ｅｎｄ ｔｉｍｅ ｏｆ ＨＢＯ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｗａｓ ｓｅｔ ａｓ ０ ｈ．ｔｈｅ ｔｈｒｅｅ ｇｒｏｕｐｓ ｗｅｒｅ ｃｏｌｌｅｃｔｅｄ ａｔ ６ ，２４ ｈ ａｎｄ ４８ ｈ ｆｏｒ ｓｕｂｓｅｑｕｅｎｔ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｓ．Ｔｈｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ＡＤＡＭ １０ ｍＲＮＡ ａｔ ６， ２４ ｈ。ａｎｄ ４８ ｈ ｗｅｒｅ ｄｅｔｅｃｔｅｄ ｂｙ ＲＴ—ＰＣＲ．Ｒｅｓｕｌｔｓ ６，２４ ｈ，ａｎｄ ４８ ｈ，ｔｈｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ＡＤＡＭ １０ ｍＲＮＡ ｗａｓ ｎｏ ｃｈａｎｇｅ ｉｎ ｃｏｎｔｒｏｌ ｇｒｏｕｐ，ｂｕｔ ｇｒａｄｕａｌｌｙ ｄｅｃｒｅａｓｅｄ ｉｎ ＡＣＯＰ ｇｒｏｕｐ，ａｎｄ ｉｎｃｒｅａｓｅｄ ｉｎ ＨＢＯ ｇｒｏｕｐ，ｔｈｅｒｅ ｗａｓ ｓｔａｔｉｓｔｉｃａｌｌｙ