川芎挥发油的提取和分离方法[发明专利]

(10)申请公布号 (43)申请公布日 2014.04.09
C N 103710133
A (21)申请号 201310639536.3
(22)申请日 2013.12.04
C11B 1/00(2006.01)
C11B 1/10(2006.01)
C11B 3/00(2006.01)A61K 36/236(2006.01)
(71)申请人颈复康药业集团有限公司
地址067000 河北省承德市高新技术产业开
发区
(72)发明人王春民 郭金甲 杨冬丽 秦婷
张东阁 郑艳春 李君 刘井利
胡春兰 耿榕徽
(74)专利代理机构上海翼胜专利商标事务所
(普通合伙) 31218
代理人翟羽 曾人泉
(54)发明名称
川芎挥发油的提取和分离方法
(57)摘要
本发明川芎挥发油的提取和分离方法，包含
以下步骤：⑴采用蒸馏-萃取耦合技术提取川芎
挥发油：将川芎药材置于提取装置中，加入川芎
药材5～10倍量的水；在挥发油油水分离器中加
入为挥发油量0.1～2倍的萃取剂，然后用水蒸气
蒸馏法提取挥发油；⑵采用液-液萃取技术分离
川芎挥发油：在步骤⑴得到的川芎挥发油与萃取
剂的混合液中加入为所述混合液0.5～3倍的乙
醇或无水乙醇，然后萃取，离心，得到乙醇与挥发
油混合液；再向乙醇与挥发油混合液中加入为乙
醇或无水乙醇0.2～2倍的水或1～30%的氯化
钠水溶液，然后萃取，离心，弃去分出的水层，得到
川芎挥发油。

采用本发明的方法提取的川芎挥发
油具有挥发油得率高，有效成分转移率高的优点。

(51)Int.Cl.权利要求书1页 说明书5页
(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请权利要求书1页 说明书5页(10)申请公布号CN 103710133 A
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1.一种川芎挥发油的提取和分离方法，其特征在于，包含以下步骤：
（1）采用蒸馏-萃取耦合技术提取川芎挥发油
将川芎药材置于提取装置中，加入川芎药材5～10倍量（重量比）的水，在挥发油油水分离器中加入为挥发油量0.1～2倍（体积比）的萃取剂，然后，用水蒸气蒸馏法提取挥发油；
（2）采用液-液萃取技术分离川芎挥发油
在步骤（1）得到的川芎挥发油与萃取剂的混合液中加入为所述混合液0.5～3倍（体积比）的乙醇或者无水乙醇，然后萃取，离心，得到乙醇与挥发油的混合液；
再向乙醇与挥发油的混合液中加入为乙醇或无水乙醇0.2～2倍（体积比）的水或1～30%的氯化钠水溶液，然后萃取，离心，弃去分出的水层，得到目标产物——川芎挥发油。

2.根据权利要求1所述的川芎挥发油的提取和分离方法，其特征在于，步骤（1）所述的萃取剂为液体石蜡、凡士林或羊毛脂的一种。

3.根据权利要求1所述的川芎挥发油的提取和分离方法，其特征在于，步骤（2）所述的乙醇为浓度为50～95%（体积比）的乙醇。

权 利 要 求 书CN 103710133 A
川芎挥发油的提取和分离方法
技术领域
[0001] 本发明涉及中药制备技术领域，具体地说，是一种用于提取和分离川芎挥发油的方法。

背景技术
[0002] 中药挥发油入药自古有之，《中国药典》（2010年版一部）记载的成药品种中，约有50%的成药品种的原药材需检测挥发油含量。

其中，很多挥发油类成分的药理作用已明确，例如薄荷、柴胡、藿香、荆芥、防风、紫苏等挥发油可用于治疗外感热病；柴胡挥发油具有解热作用；川芎挥发油具有改善微循环、降低血压、增加脑血流量、镇痛、调节心血管功能和抗凝血的作用；红花油能降低血清胆固醇和甘油三酯；莪术油能够抑制肝癌细胞DNA的合成与增殖；薤白挥发油对体内外肿瘤细胞具有抑制作用。

因此，中药中的挥发油具有广泛的应用价值。

[0003] 根据中药挥发油理化性质的不同可将挥发油分为不同的类别，例如，按挥发油比重不同分为重油和轻油；以挥发油在水中的溶解度大小分类，分为溶解度大的挥发油和溶解度小的挥发油；以在中药材中的存在状态不同分为游离态挥发油和结合态挥发油等。

不同理化性质的挥发油需要采用不同的提取、浓缩方法和制剂工艺。

目前常用的挥发油的提
取方法有压榨法、溶剂法、水蒸气蒸馏法和超临界CO
2萃取法。

其中，超临界CO
2
萃取法提取
的挥发油得率高，高沸点的成分较高；水蒸气蒸馏法提取的挥发油纯度好，低沸点的挥发性成分较高，是目前工业生产中使用较多的提取挥发油的方法。

[0004] 本发明所涉及的川芎在用传统水蒸气蒸馏法提取挥发油时，由于川芎挥发油中同时含有轻油和重油，随着提取时间的延长，会出现挥发油的分层现象：其中，轻油位于水面上层，重油则随着提取时间的延长，提取量的不断加大而最终与轻油分为上下两层并逐渐下沉至挥发油油水分离器的底部，会随着回流水逐渐流回到提取容器中，造成川芎挥发性成分损耗较大，提取不完全。

[0005] 有研究人员使用有机溶剂萃取法提取川芎挥发油，再经回收有机溶剂而得到川芎挥发油。

但是，这样在挥发油的纯化过程中，挥发油损耗较大，同时也容易存在有机溶剂残留，从而影响川芎挥发油的入药。

发明内容
[0006] 本发明的目的在于解决上述问题，提供一种川芎挥发油的提取和分离方法，它采用蒸馏-萃取耦合技术与液-液萃取相结合的方法提取分离川芎挥发油，可同时提取川芎挥发油的轻油和重油，避免在提取过程中挥发油的分层现象，降低提取过程中挥发油在水中的溶解度。

采用本方法提取的川芎挥发油与现有方法相比具有挥发油得率高，有效成分转移率高等优点。

[0007] 为实现上述目的，本发明采用了以下技术方案。

[0008] 一种川芎挥发油的提取和分离方法，其特征是，包含以下步骤：
（1）采用蒸馏-萃取耦合技术提取川芎挥发油
将川芎药材置于提取装置中，加入川芎药材5～10倍量（重量比）的水；
在挥发油油水分离器中加入为挥发油量0.1～2倍（体积比）的萃取剂，然后，用水蒸气蒸馏法提取挥发油；
（2）采用液-液萃取技术分离川芎挥发油
在步骤（1）得到的川芎挥发油与萃取剂的混合液中加入为所述混合液0.5～3倍（体积比）的乙醇或者无水乙醇，然后萃取，离心，得到乙醇与挥发油的混合液；
再向乙醇与挥发油的混合液中加入为乙醇或无水乙醇0.2～2倍（体积比）的水或1～30%的氯化钠水溶液，然后萃取，离心，弃去分出的水层，得到目标产物——川芎挥发油。

[0009] 进一步，步骤（1）所述的萃取剂为液体石蜡、凡士林或羊毛脂的一种。

[0010] 进一步，步骤（2）所述的乙醇为浓度为50～95%（体积比）的乙醇。

[0011] 本发明川芎挥发油的提取和分离方法的积极效果是：
（1）采用蒸馏-萃取耦合技术提取、液-液萃取分离川芎挥发油的方法，可同时提取川芎挥发油的轻油和重油，避免在提取过程中挥发油的分层现象，降低提取过程中挥发油在水中的溶解度。

[0012] （2）采用本发明的方法提取的川芎挥发油具有挥发油得率高，有效成分转移率高等优点，与传统的水蒸气蒸馏法相比，挥发油的得率、有效成分的转移率能提高20～70%。

[0013] （3）采用本发明的方法提取的川芎挥发油可直接制成液体制剂、固体制剂或进一步包合后制成固体制剂入药。

具体实施方式
[0014] 以下进一步说明本发明川芎挥发油的提取和分离方法的具体实施方式，介绍7个实施例和1个比较例，但是应该指出，本发明的实施不限于以下的实施方式。

[0015] 实施例1
一种川芎挥发油的提取和分离方法，包含以下步骤：
（1）采用蒸馏-萃取耦合技术提取川芎挥发油
取川芎药材300g，粉碎后置于提取装置中，加水1800ml，在挥发油油水分离器中加入液体石蜡1ml，用水蒸气蒸馏法提取挥发油5小时，收集并得到挥发油与液体石蜡的混合液。

[0016] （2）采用液-液萃取技术分离川芎挥发油
在步骤（1）得到的挥发油与液体石蜡的混合液中加入浓度为95%（体积比）的乙醇3ml，摇动均匀，经离心分离（3000r.min-1）分取石蜡层。

[0017] 对剩余油层加水两次，每次2ml，摇动均匀，经离心分离（3000r.min-1）3分钟，将分出的水层弃去，即得川芎挥发油，标号挥发油1。

[0018] 实施例2
一种川芎挥发油的提取和分离方法，包含以下步骤：
（1）采用蒸馏-萃取耦合技术提取川芎挥发油
取川芎药材300g，粉碎后置于提取装置中，加水1800ml；将凡士林置热水浴中加热，待融化后将凡士林液体0.5ml加入挥发油油水分离器中，用水蒸气蒸馏法提取挥发油5小时，
收集并得到挥发油与凡士林的混合液。

[0019] （2）采用液-液萃取技术分离川芎挥发油
在步骤（1）得到的挥发油与凡士林的混合液中加入浓度为95%（体积比）的乙醇3ml，摇动均匀，经离心分离（3000r.min-1）分取油层。

[0020] 对油层加水两次，每次2ml，摇动均匀，经离心分离（3000r.min-1）3分钟，将分出的水层弃去，即得川芎挥发油，标号挥发油2。

[0021] 实施例3
一种川芎挥发油的提取和分离方法，包含以下步骤：
（1）采用蒸馏-萃取耦合技术提取川芎挥发油
取川芎药材300g，粉碎后置于提取装置中，加水1500ml，在挥发油油水分离器中加入液体石蜡3ml，用水蒸气蒸馏法提取挥发油5小时，收集并得到挥发油与液体石蜡的混合液。

[0022] （2）采用液-液萃取技术分离川芎挥发油
在步骤（1）得到的挥发油与液体石蜡的混合液中加入浓度为95%（体积比）的乙醇9ml，摇动均匀，经离心分离（3000r.min-1）分取石蜡层。

[0023] 对剩余油层加水两次，每次9ml，摇动均匀，经离心分离（4000r.min-1）3分钟，将分出的水层弃去，即得川芎挥发油，标号挥发油3。

[0024] 实施例4
一种川芎挥发油的提取和分离方法，包含以下步骤：
（1）采用蒸馏-萃取耦合技术提取川芎挥发油
取川芎药材300g，粉碎后置于提取装置中，加水2400ml，在挥发油油水分离器中加入液体石蜡3.5ml，用水蒸气蒸馏法提取挥发油5小时，收集并得到挥发油与液体石蜡的混合液。

[0025] （2）采用液-液萃取技术分离川芎挥发油
在步骤（1）得到的挥发油与液体石蜡的混合液中加入无水乙醇5ml，摇动均匀，经离心分离（3000r.min-1）分取石蜡层。

[0026] 对剩余油层加水两次，每次5ml，摇动均匀，经离心分离（3000r.min-1）3分钟，将分出的水层弃去，即得川芎挥发油，标号挥发油4。

[0027] 实施例5
一种川芎挥发油的提取和分离方法，包含以下步骤：
（1）采用蒸馏-萃取耦合技术提取川芎挥发油
（同实施例1）。

[0028] （2）采用液-液萃取技术分离川芎挥发油
在步骤（1）得到的挥发油与液体石蜡的混合液中加入无水乙醇3ml，摇动均匀，经离心分离（3000r.min-1）分取石蜡层。

[0029] 对剩余油层加20%氯化钠水溶液两次，每次2ml，摇动均匀，经离心分离（3000r. min-1）3分钟，将分出的氯化钠水溶液层弃去，即得川芎挥发油，标号挥发油5。

[0030] 实施例6
一种川芎挥发油的提取和分离方法，包含以下步骤：
（1）采用蒸馏-萃取耦合技术提取川芎挥发油
取川芎药材300g，粉碎后置于提取装置中，加水1800ml，将凡士林置热水浴中加热，待融化后将凡士林液体1ml加入挥发油油水分离器中，用水蒸气蒸馏法提取挥发油5小时，收集并得到挥发油与凡士林的混合液。

[0031] （2）采用液-液萃取技术分离川芎挥发油
在步骤（1）得到的挥发油与凡士林的混合液中加入浓度为50%乙醇3ml，摇动均匀，经离心分离（3000r.min-1）分取凡士林层。

[0032] 对剩余油层加20%氯化钠水溶液两次，每次2ml，摇动均匀，经离心分离（3000r. min-1）3分钟，将分出的氯化钠水溶液层弃去，即得川芎挥发油，标号挥发油6。

[0033] 比较例1
一种川芎挥发油的提取和分离方法，采用传统的水蒸气蒸馏法提取川芎挥发油。

[0034] 取与实施例1等量同批次的川芎药材300g，粉碎后置于提取装置中，加水1800ml，用水蒸气蒸馏法提取挥发油5小时，得到挥发油，标号挥发油7。

[0035] 对挥发油的检测
（一）采用UV法测定川芎挥发油中总内酯的含量
对照品溶液的制备：取Z-藁本内酯对照品适量，用乙醇配置成30 的溶液，作为对照品溶液。

[0036] 供试品溶液的制备：分别将标号为1、2、3、4、5、6、7的川芎挥发油置于10ml容量瓶中，用乙醇定容，稀释1万倍后，作为供试品溶液。

[0037] 测定方法：
分别取供试品溶液和对照品溶液，乙醇做空白，用紫外分光光度法于波长322nm下测定吸收度，外标法计算挥发油中总内酯类的含量。

测定结果见表1。

[0038] （二）采用GC法测定川芎挥发油中Z-藁本内酯的含量
实验仪器：Agilent7890A气相色谱仪，Agilent G4513A自动进样器。

[0039] 色谱条件：AT-5 30m×0.32mm石英毛细管柱（GRACE公司），FID检测器，检测器温度250℃，程序升温，初始温度90℃，以1.5℃·min-1升温至100℃，然后以15 ℃/min升温至250℃，保持3min；载气为氮气，进样量2。

[0040] 对照品溶液的制备：取Z-藁本内酯对照品适量，精密称定，用乙醇配置成0.3mg/ ml的溶液，作为对照品溶液。

[0041] 供试品溶液的制备：分别将标号为1、2、3、4、5、6、7的川芎挥发油置于10ml容量瓶中，用乙醇定容，稀释100倍后，作为供试品溶液。

用GC法检测，用外标法计算挥发油中Z-藁本内酯的含量。

测定结果见表1。

[0042] 表1. 对标号为1-7川芎挥发油的测定结果（n=5）。

[0043] 测定结果表明：
（1）用水蒸气蒸馏法提取的川芎挥发油（标号7）中总内酯类含量按每克生药中的总内酯类的量计算为0.97mg/g，挥发油总量为1.8ml。

[0044] （2）用蒸馏萃取耦合法提取的川芎挥发油中内酯类含量按每克生药中的总内酯类的量计算分别为1.14mg/g（标号1）、1.25mg/g（标号2）、1.18mg/g（标号3）、1.22mg/g（标号4）、1.16mg/g（标号5）、1.23mg/g（标号6）。

[0045] （3）用本发明的方法提取的川芎挥发油与用传统的水蒸气蒸馏法提取的川芎挥发油相比，不仅总内酯类含量的百分率能增加23%，Z-藁本内酯含量的百分率能增加30%以上，总油量的百分率也能增加60%以上。

[0046] 实施例7
一种川芎挥发油的提取和分离方法，包含以下步骤：
（1）采用蒸馏-萃取耦合技术提取川芎挥发油
取川芎药材10kg，粉碎后置于提取装置中，加水60L，将羊毛脂置热水浴中加热，待融化后将羊毛脂液体30ml加入挥发油油水分离器中，用水蒸气蒸馏法提取挥发油5小时，收集并得到挥发油与羊毛脂的混合液。

[0047] （2）采用液-液萃取技术分离川芎挥发油
在步骤（1）得到的挥发油与羊毛脂的混合液中加入无水乙醇100ml，摇动均匀，经离心分离（3000r.min-1）分取油层。

[0048] 对油层加水两次，每次60ml，摇动均匀，经离心分离（3000r.min-1）3分钟，将分出的水层弃去，得到川芎挥发油96ml。

UV法测定川芎挥发油总内酯类含量为1.08mg/g，GC法测定川芎挥发油中Z-藁本内酯的含量为0.92mg/g。