血流感染实验室诊断培训课件
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血流感染实验室诊断新方法(共65张PPT)
完善的屏障体系（皮肤、粘膜、纤毛、粘液等）、皮肤脂肪酸积聚、PH高
或低、氧张力、正常菌群营养和细胞膜结合位竞争、酶及酸等；
● 次级防御：
补体、溶菌酶、血液与淋巴液中噬菌素、吞噬细胞、抗体等体液免疫与细 胞免疫； ……
第7页，共65页。
微生物与人体感染
微生物感染中，血流感染常造成严重的后果，死亡率达到32%-54%， 及早明确诊断，便于合理用药和分析提示预后…
血量充足患者：先采厌氧瓶，后采需氧瓶
血液
腹腔液
腹膜透析液
滑液
…… 血培养查病原菌对诊断以下疾病很重要: 三种代谢途径产生CO2
其他 5% 优质血培养瓶要素 之三
病原体因素：超级细菌、耐药菌株 皮肤、内胶塞消毒要充分挥发干； 密封环 10038例ICU患者有4501例发生感染(44.
下呼吸道感染
血流感染 12%
……
第25页，共65页。
血培养检测的意义
根据培养结果：
❖ 选择正确的抗感染治疗方案
调整经验治疗方案 ❖ 判断感染性疾病的类型
❖ 评价疗效及预后 ❖ 正确采取感染控制措施
▪ 是否隔离 ▪ 减少院内感染
血液及无菌体液 是最有意义的病 原学检测标本。
第26页，共65页。
血培养范围—所有“无菌”体液标本
第8页，共65页。
二 血流感染与诊断金标准
第9页，共65页。
血流感染
泛指是指病原菌及其毒素侵入血流所引起的一类临床综合征。病程 中常有炎症介质的激活和释放，引起高热、寒战、心动过速
呼吸急促、皮疹和神志改变等一系列临床症状，严重者可引
起休克、DIC和多器官功能衰竭，死亡率较高。
血败血症（septicemia）
SPS: 0.35%含量的SPS能中和血液中的补体，提高检 出率；
或低、氧张力、正常菌群营养和细胞膜结合位竞争、酶及酸等；
● 次级防御：
补体、溶菌酶、血液与淋巴液中噬菌素、吞噬细胞、抗体等体液免疫与细 胞免疫； ……
第7页，共65页。
微生物与人体感染
微生物感染中，血流感染常造成严重的后果，死亡率达到32%-54%， 及早明确诊断，便于合理用药和分析提示预后…
血量充足患者：先采厌氧瓶，后采需氧瓶
血液
腹腔液
腹膜透析液
滑液
…… 血培养查病原菌对诊断以下疾病很重要: 三种代谢途径产生CO2
其他 5% 优质血培养瓶要素 之三
病原体因素：超级细菌、耐药菌株 皮肤、内胶塞消毒要充分挥发干； 密封环 10038例ICU患者有4501例发生感染(44.
下呼吸道感染
血流感染 12%
……
第25页，共65页。
血培养检测的意义
根据培养结果：
❖ 选择正确的抗感染治疗方案
调整经验治疗方案 ❖ 判断感染性疾病的类型
❖ 评价疗效及预后 ❖ 正确采取感染控制措施
▪ 是否隔离 ▪ 减少院内感染
血液及无菌体液 是最有意义的病 原学检测标本。
第26页，共65页。
血培养范围—所有“无菌”体液标本
第8页，共65页。
二 血流感染与诊断金标准
第9页，共65页。
血流感染
泛指是指病原菌及其毒素侵入血流所引起的一类临床综合征。病程 中常有炎症介质的激活和释放，引起高热、寒战、心动过速
呼吸急促、皮疹和神志改变等一系列临床症状，严重者可引
起休克、DIC和多器官功能衰竭，死亡率较高。
血败血症（septicemia）
SPS: 0.35%含量的SPS能中和血液中的补体，提高检 出率；
血流感染的实验室诊断(可直接使用).ppt
最新.
4
（二）血流感染的类型
• 菌血症（bacteremia）：细菌侵入血流，尚未大 量繁殖且未引发临床症状，往往是一过性的。
• 败血症（septicemia）：细菌进入血液大量繁殖， 分泌毒素或代谢产物，产生严重的临床症状。
• 脓毒败血症（pyemia）：细菌进入血液大量繁殖， 分泌毒素或代谢产物，产生严重的临床症状，常伴 有多发性脓肿或败血性休克。
最新.
26
（三）阳性检出时间
• 阳性检出时间与血标本中含菌量呈反比关系。
• 阳性报警出现时间小于24h，一般为血流感染 大于48h，多为污染
最新.
27
（四）重复培养结果
• 与病人静脉导管培养或其他部位标本的培养结果 相比较，2次以上分离细菌的菌种与药敏谱相同时， 考虑血
最新.
12
（一）标本采集
• 寒战后体温高峰前 细菌含量最高。
• 血液细菌含量随着 体温从最高峰逐渐 下降而越来越少。
• 血液采样的最佳时 间是在寒战后和发 热高峰前，此时阳 性检出率最高。
最新.
13
（一）标本采集
采血量 成人采血量为5～10ml / 瓶，分别采取需氧瓶和厌氧瓶，双部位抽血。 儿童采血量为3～5ml / 瓶，采取儿童瓶。
20
• 阴性曲线
最新.
21
• 假阳性曲线
最新.
22
五、如何判断是否污染？
最新.
23
五、如何判断是否污染？
（一）阳性检出瓶数 （二）细菌种类 （三）阳性检出时间 （四）重复培养结果
最新.
24
（一）阳性检出瓶数
• 两瓶血培养，检出一瓶，考虑污染 • 两瓶血培养，检出两瓶，即使是凝固
血流感染实验室诊断课件
加拿大CANWORD监测20022009
Diag Microbiolo Infect Dis. 2011; 69: 307
加拿大CANWORD监测2002-2009
Diag Microbiolo Infect Dis. 2011; 69: 307
美国49医院BSI病原谱
CID. 2004, 39: 309-317
• 标准三：年龄<1岁的病人具备下列症状或体征中的至少一项，发热 （>38 ⁰C ），低温（<37 ⁰C ），呼吸暂停、脉搏徐缓，并具有下列之 一（同上3点略）
临床血流感染（Clinical Sepsis）
具有下列二条件之一者： • 具有非其它已知原因所引起的发烧、血压过低（收缩压≤90mmHg或收 缩压低于平常超过40mmHg），少尿（每小时尿量低于30ml）等临床 症状任何一项，且符合下列所有条件者：
• 如多次培养阳性，可能为条件致病菌，需结 合临床分析
26
为什么需氧+厌氧？
血流感染
• 医院获得性血流感染
– 原发血流感染
• 实验室证实血流感染（Laboratory-confirmed Bloodstream Infection, LCBI） • 临床血流感染（Clinical Sepsis）
– 继发血流感染：血培养分离出有意义微生物， 而且此微生物与另一部位之院内感染有关。唯 不包括血管或血管内导管装置所引起之血流感 染。
PUMCH2012年46株BSI草绿色溶 血链球菌药敏结果
2011CHIF-NET489株BSI酵母菌
2011CHIF-NET念珠菌对氟康唑的敏感性
2011CHIF-NET念珠菌对伏立康唑的 敏感性
2011CHIF-NET其他酵母菌对氟康唑的敏感性
2023版血液培养技术用于血流感染诊断临床实践专家共识解读ppt课件
2023版血液培养技术用于血流感 染诊断临床实践专家共识解读
汇报人：xxx 2023-1-03
目 录
• 共识背景与目的 • 共识内容概述 • 共识详细解读 • 共识实施建议与挑战 • 未来展望与研究方向
01 共识背景与目的
血流感染现状及挑战
血流感染发病率
血流感染是一种常见的严重感染类型 ，发病率较高，且呈上升趋势。
提高患者及家属认知度与配合度
宣传教育
通过开展讲座、发放宣传资料等形式，向患者及家属 普及血流感染相关知识，提高认知度。
心理疏导
对患者进行心理疏导，减轻其焦虑和恐惧情绪，提高 治疗依从性。
家属参与
鼓励家属积极参与患者护理过程，提供情感支持和生 活照顾，减轻患者负担。
优化抗菌药物使用与管理政策
严格执行抗菌药物使用指南
根据共识和指南，规范抗菌药物的使用种类 、剂量和疗程，降低耐药风险。
加强抗菌药物监管
定期对医院抗菌药物使用情况进行监测和评 估，确保药物使用的合理性和规范性。
完善抗菌药物管理政策
建立抗菌药物分级管理制度，加强处方审核 和点评，促进抗菌药物合理使用。
05 未来展望与研究方向
新型血液培养技术应用前景
病原体多样性
导致血流感染的病原体种类繁多，包 括细菌、真菌、病毒等，给诊断和治 疗带来挑战。
耐药性问题
随着抗菌药物的广泛使用，耐药菌株 不断增多，给血流感染的治疗带来困 难。
临床诊断需求
血流感染的早期诊断和病原体鉴定对 于制定治疗方案和改善预后具有重要 意义。
血液培养技术应用与发展
血液培养技术原理
通过制定共识，规范血液培养技术的临床应用，提高血流感染的诊 断准确性和及时性。
促进抗菌药物合理使用
汇报人：xxx 2023-1-03
目 录
• 共识背景与目的 • 共识内容概述 • 共识详细解读 • 共识实施建议与挑战 • 未来展望与研究方向
01 共识背景与目的
血流感染现状及挑战
血流感染发病率
血流感染是一种常见的严重感染类型 ，发病率较高，且呈上升趋势。
提高患者及家属认知度与配合度
宣传教育
通过开展讲座、发放宣传资料等形式，向患者及家属 普及血流感染相关知识，提高认知度。
心理疏导
对患者进行心理疏导，减轻其焦虑和恐惧情绪，提高 治疗依从性。
家属参与
鼓励家属积极参与患者护理过程，提供情感支持和生 活照顾，减轻患者负担。
优化抗菌药物使用与管理政策
严格执行抗菌药物使用指南
根据共识和指南，规范抗菌药物的使用种类 、剂量和疗程，降低耐药风险。
加强抗菌药物监管
定期对医院抗菌药物使用情况进行监测和评 估，确保药物使用的合理性和规范性。
完善抗菌药物管理政策
建立抗菌药物分级管理制度，加强处方审核 和点评，促进抗菌药物合理使用。
05 未来展望与研究方向
新型血液培养技术应用前景
病原体多样性
导致血流感染的病原体种类繁多，包 括细菌、真菌、病毒等，给诊断和治 疗带来挑战。
耐药性问题
随着抗菌药物的广泛使用，耐药菌株 不断增多，给血流感染的治疗带来困 难。
临床诊断需求
血流感染的早期诊断和病原体鉴定对 于制定治疗方案和改善预后具有重要 意义。
血液培养技术应用与发展
血液培养技术原理
通过制定共识，规范血液培养技术的临床应用，提高血流感染的诊 断准确性和及时性。
促进抗菌药物合理使用
导管相关血流感染的实验室诊断课件
❖ 真菌引起的导管相关血行感染的死亡率更高。
Mermel LA, Farr BM, Sherertz RJ et al.Guidelines for the management
of intravascular catheter related infections. Infect Control Hosp
导管相关血流感染的实验室诊断
Maki 滚动法
导管相关血流感染的实验室诊断
导管尖阳性培养结果
导管相关血流感染的实验室诊断
检测方法
保留导管 ✓定量培养 (CVC & 外周血) ✓阳性报警时间 (CVC & 外周血)
#1
#2
导管相关血流感染的实验室诊断
致病菌
导管相关血流感染的实验室诊断
致病菌
❖ 常见的致病菌凝固酶阴性的葡萄球菌、金黄色葡 萄球菌、肠球菌，和白色念珠菌。
导管相关血流感染的实验室诊断
检测方法
❖移走导管
✓ Maki Roll (半定量) ✓超声波降解和稀释 (定量) ✓通过管腔抽吸 (定量)
❖保留导管
✓定量培养 (CVC & 外周血) ✓达到阳性的时间 (CVC & 外周血)
导管相关血流感染的实验室诊断
哪部分用于培养
导管相关血流感染的实验室诊断
导管相关血流感染（CRBSI） 的病原学诊断
America
600
-
2006-2007
Y.G.Kwak et at.10
Korea
96
-
2007-2008
Thongpiyapoom et at. 12
Thailand
1
1 422
2000-2002
Mermel LA, Farr BM, Sherertz RJ et al.Guidelines for the management
of intravascular catheter related infections. Infect Control Hosp
导管相关血流感染的实验室诊断
Maki 滚动法
导管相关血流感染的实验室诊断
导管尖阳性培养结果
导管相关血流感染的实验室诊断
检测方法
保留导管 ✓定量培养 (CVC & 外周血) ✓阳性报警时间 (CVC & 外周血)
#1
#2
导管相关血流感染的实验室诊断
致病菌
导管相关血流感染的实验室诊断
致病菌
❖ 常见的致病菌凝固酶阴性的葡萄球菌、金黄色葡 萄球菌、肠球菌，和白色念珠菌。
导管相关血流感染的实验室诊断
检测方法
❖移走导管
✓ Maki Roll (半定量) ✓超声波降解和稀释 (定量) ✓通过管腔抽吸 (定量)
❖保留导管
✓定量培养 (CVC & 外周血) ✓达到阳性的时间 (CVC & 外周血)
导管相关血流感染的实验室诊断
哪部分用于培养
导管相关血流感染的实验室诊断
导管相关血流感染（CRBSI） 的病原学诊断
America
600
-
2006-2007
Y.G.Kwak et at.10
Korea
96
-
2007-2008
Thongpiyapoom et at. 12
Thailand
1
1 422
2000-2002
血流感染实验室诊断.pptx
血培养污染菌
• 在多次血培养中单次培养下列细菌阳性 • 凝固酶阴性葡萄球菌 • 棒状杆菌 • 微球菌 • 丙酸杆菌 • 芽孢杆菌
• 如多次培养阳性，可能为条件致病菌，需 结合临床分析
26
第27页/共70页
为什么需氧+厌氧？
两种组合均能检测
非条件致病菌 Mayo Clinic
Pathogen No.
or <4 G/L or >10% 未成熟中性粒细胞 • 32%患者有1瓶以上CNS阳性，BSI68 %，污染12% (p <0.001) • 没有SIRS症状：BSI 5%，污染29% (p <0.001)
Clin Microbiol Infect. 2012 online
第32页/共70页
单瓶血培养CNS的BSI和污染患者区 别
OR=1.23
OR=0.93
Schuyler Halverson, et al. JCM. 2013 online
第39页/共70页
抗菌药物治疗与血流感染死亡率
死亡率
Chest 115 (2): 1999 第40页/共70页
血培养三级报告制度
血培养 阳性
终报告
40
第41页/共70页
血培养结果回报对治疗的影响
第44页/共70页
阳性血培养－基于PCR的检测
• PCR特异性检测
• 病原特异性PCR
• 特定耐药基因检测：葡萄球菌mecA, 肠球菌van • 细菌载量：肺炎链球菌自溶毒A基因lytA拷贝数
• 广谱检测：PCR扩增特定靶位
• 多态性分析 • 测序 • 后续基因检测 • 种特异性real-time PCR
• 血流感染（bloodstream infection, BSI）：败血症和菌血症 目前统称为血流感染。
血流感染PPT课件
◦ 体温、心率、呼吸频率、白细胞等标准符合2条 ◦ 太过宽泛——强调基础（炎性介质或微生物），更改标准
（Sepsis 3.0）
Sepsis 1.0：感染+SIRS≥2条 Sepsis 2.0：Sepsis1.0+新21条标准 Sepsis定义的修改
◦ 对Sepsis的认识逐渐深入 ◦ 在各地研究中更加可靠 ◦ 在临床实践中更容易实现
萄球菌） 近年来肠球菌增多 念珠菌血流感染增多，90年代为医院获得性感染第4位，占
ICU第3位，为80年代的2~5倍 分枝杆菌增多，以尿分枝杆菌多见，多见于免疫缺陷人群
◦ HIV阳性者血流感染，42%结核分枝杆菌阳性
厌氧菌/混合感染呈下降趋势
血流感染的定义 引起血流感染主要病原菌及其变迁 引起血流感染的诱发因素 血流感染的诊断及治疗
◦ 补液无法纠正的低血压 ◦ +血乳酸＞2mmol/L
按全身感染部位分
◦ 原发性血流感染 ◦ 继发性血流感染
按全身伴随状况分
◦ 复杂性血流感染 ◦ 非复杂性血流感染
按感染场所分
◦ 社区获得性血流感染 ◦ 医院获得性血流感染
非复杂性血流感染定义
◦ 血培养阳性并符合以下情况：
可排除心内膜炎 无修复植入物 初次血培养阳性后2~4天重复检查血培养阴线 初次有效治疗后72小时内热退 无迁徙病灶的依据
3.5
肺炎链球菌
4.4
3.8
2.9
化脓性链球菌
4.3
6.5
6.1
肠杆菌属 沙雷菌
3.7
5.5
4.2
1.6
4.1（不动杆菌） 2.5（不动杆菌）
*1997-2002 SENTRY program.Diagn Microbial Infect Dis 2004,50:59-69
（Sepsis 3.0）
Sepsis 1.0：感染+SIRS≥2条 Sepsis 2.0：Sepsis1.0+新21条标准 Sepsis定义的修改
◦ 对Sepsis的认识逐渐深入 ◦ 在各地研究中更加可靠 ◦ 在临床实践中更容易实现
萄球菌） 近年来肠球菌增多 念珠菌血流感染增多，90年代为医院获得性感染第4位，占
ICU第3位，为80年代的2~5倍 分枝杆菌增多，以尿分枝杆菌多见，多见于免疫缺陷人群
◦ HIV阳性者血流感染，42%结核分枝杆菌阳性
厌氧菌/混合感染呈下降趋势
血流感染的定义 引起血流感染主要病原菌及其变迁 引起血流感染的诱发因素 血流感染的诊断及治疗
◦ 补液无法纠正的低血压 ◦ +血乳酸＞2mmol/L
按全身感染部位分
◦ 原发性血流感染 ◦ 继发性血流感染
按全身伴随状况分
◦ 复杂性血流感染 ◦ 非复杂性血流感染
按感染场所分
◦ 社区获得性血流感染 ◦ 医院获得性血流感染
非复杂性血流感染定义
◦ 血培养阳性并符合以下情况：
可排除心内膜炎 无修复植入物 初次血培养阳性后2~4天重复检查血培养阴线 初次有效治疗后72小时内热退 无迁徙病灶的依据
3.5
肺炎链球菌
4.4
3.8
2.9
化脓性链球菌
4.3
6.5
6.1
肠杆菌属 沙雷菌
3.7
5.5
4.2
1.6
4.1（不动杆菌） 2.5（不动杆菌）
*1997-2002 SENTRY program.Diagn Microbial Infect Dis 2004,50:59-69
血流感染的实验室诊断课件
PPT学习交流
12
（一）标本采集
• 寒战后体温高峰前 细菌含量最高。
• 血液细菌含量随着 体温从最高峰逐渐 下降而越来越少。
• 血液采样的最佳时 间是在寒战后和发 热高峰前，此时阳 性检出率最高。
PPT学习交流
13
（一）标本采集
采血量 成人采血量为5～10ml / 瓶，分别采取需氧瓶和厌氧瓶，双部位抽血。 儿童采血量为3～5ml / 瓶，采取儿童瓶。
• 两瓶血培养，检出一瓶，考虑污染 • 两瓶血培养，检出两瓶，即使是凝固酶阴性
的葡萄球菌，也应考虑为致病菌
PPT学习交流
25
（二）细菌种类
• 检出金黄色葡萄球菌、肺炎克雷伯菌、大肠埃希 菌及其他肠杆科细菌、铜绿假单胞菌、白色念珠 菌时，90%以上是致病菌。
• 检出化脓性链球菌、无乳链球菌、产单核细胞李 斯特菌、脑膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌、流感嗜血 杆菌、新生隐球菌及其他假丝酵母菌，污染的可 能性更低。
PPT学习交流
9
二、自动化血培养系统
• 仪器培养孔底的 光电探测器测量 反射光变化并按 相应公式计算。
• 判读公式： 加速度法 速率法 起始阈值法
PPT学习交流
10
三、标本采集和运送
PPT学习交流
11
（一）标本采集
• 采集时间 1.尽可能在抗菌药物使用前； 2.对已经使用抗菌药物的病人，最好在下次用药 前采集； 3.寒战和发热初起时采血可提高培养阳性率，心 内膜炎（持续性菌血症）例外； 4.怀疑血流感染时应尽早采血，不要强调体温超 过39℃才抽血，而错过时机。
PPT学习交流
4
（二）血流感染的类型
• 菌血症（bacteremia）：细菌侵入血流，尚未大量 繁殖且未引发临床症状，往往是一过性的。
血流感染的实验室诊断
6
（三）血培养的现状
• 不正确采样 • 污染问题
皮肤定植菌群是血培养污染的最常见细 菌。
• 阳性检出率低 • 检验周期长
编辑课件
7
二、全自动血培养系统
编辑课件
8
二、自动化血培养系统
我院使用的是BacT / ALERT 3D 全自动细 菌、分枝杆菌培养系
统
工作原理：
细菌在培养基中代谢 基质时产生CO2,并 水解成H+， H+透过 瓶底滤过膜，瓶底乳 胶感应器颜色由墨绿 色变成黄色。
血流感染的实验室诊断
编辑课件
1
1 血流感染概述 2 自动化血培养系统 3 标本采集和运送 4 阳性报警后处理方法 5 如何判断是否污染
编辑课件
2
一、血流感染概述
编辑课件
3
（一）血流感染的定义
• 血流感染（bloodstream infections,BSI ）是指各种病原微生物侵入血循环，释放 毒素和代谢产物，并诱导细胞因子释放， 对机体所有脏器造成损害，严重者可导致 休克、多脏器衰竭、弥散性血管内凝血， 甚至死亡，是一种严重的全身感染性疾病 。
编辑课件
28
编辑课件
29
编辑课件
9
二、自动化血培养系统
• 仪器培养孔底的 光电探测器测量 反射光变化并按 相应公式计算。
• 判读公式： 加速度法 速率法 起始阈值法
编辑课件
10
三、标本采集和运送
编辑课件
11
（一）标本采集
• 采集时间 1.尽可能在抗菌药物使用前； 2.对已经使用抗菌药物的病人，最好在下次用药 前采集； 3.寒战和发热初起时采血可提高培养阳性率，心 内膜炎（持续性菌血症）例外； 4.怀疑血流感染时应尽早采血，不要强调体温超 过39℃才抽血，而错过时机。
血液培养技术用于血流感染诊断临床实践专家共识PPT课件
负责血液培养技术的具体操作和结果分析，需要 具备相关的专业知识和技能。
3
医院感染控制人员
负责医院感染的监测、预防和控制，需要关注血 流感染的发病情况、病原菌分布和耐药性等信息 ，以制定有效的防控措施。
02 血流感染概述
定义与流行病学
定义
血流感染是指各种病原微生物通过血 液循环途径侵入人体，在血液中生长 、繁殖并释放毒素和代谢产物，从而 引起全身性感染的一种疾病。
原理介绍
血液培养技术定义
01
通过采集患者血液样本，在体外适宜条件下进行培养，以检测
血液中的病原微生物。
病原微生物检测
02
利用不同的培养基和条件，分离和鉴定血液中的细菌、真菌等
病原微生物。
自动化血液培养系统
03
采用现代生物技术，如荧光法、电阻法等，提高检测速度和准
确性。
操作流程
01
02
03
04
采集血液样本
临床表现与诊断依据
临床表现
血流感染患者可出现发热、寒战、乏力等全身症状，以及感 染部位相关的局部症状。严重者可出现感染性休克和多器官 功能衰竭。
诊断依据
血流感染的诊断主要依据血培养结果，结合患者的临床表现 、实验室检查和影像学检查进行综合判断。血培养阳性是确 诊血流感染的重要依据。
03 血液培养技术原理及方法培养基选择
根据预计检测的病原微生物种 类选择合适的培养基。
接种与培养
将血液样本接种于培养基上， 置于适宜条件下进行培养。
观察与记录
定期观察培养结果，记录病原 微生物生长情况。
结果解读与报告规范
01
02
03
结果解读
根据病原微生物种类、数 量及生长情况，判断血流 感染类型及严重程度。
3
医院感染控制人员
负责医院感染的监测、预防和控制，需要关注血 流感染的发病情况、病原菌分布和耐药性等信息 ，以制定有效的防控措施。
02 血流感染概述
定义与流行病学
定义
血流感染是指各种病原微生物通过血 液循环途径侵入人体，在血液中生长 、繁殖并释放毒素和代谢产物，从而 引起全身性感染的一种疾病。
原理介绍
血液培养技术定义
01
通过采集患者血液样本，在体外适宜条件下进行培养，以检测
血液中的病原微生物。
病原微生物检测
02
利用不同的培养基和条件，分离和鉴定血液中的细菌、真菌等
病原微生物。
自动化血液培养系统
03
采用现代生物技术，如荧光法、电阻法等，提高检测速度和准
确性。
操作流程
01
02
03
04
采集血液样本
临床表现与诊断依据
临床表现
血流感染患者可出现发热、寒战、乏力等全身症状，以及感 染部位相关的局部症状。严重者可出现感染性休克和多器官 功能衰竭。
诊断依据
血流感染的诊断主要依据血培养结果，结合患者的临床表现 、实验室检查和影像学检查进行综合判断。血培养阳性是确 诊血流感染的重要依据。
03 血液培养技术原理及方法培养基选择
根据预计检测的病原微生物种 类选择合适的培养基。
接种与培养
将血液样本接种于培养基上， 置于适宜条件下进行培养。
观察与记录
定期观察培养结果，记录病原 微生物生长情况。
结果解读与报告规范
01
02
03
结果解读
根据病原微生物种类、数 量及生长情况，判断血流 感染类型及严重程度。
血流感染与血培养 PPT课件
外科ICU常见感染的部位
下呼吸道6%
手术切口15%
肺炎33%
胃肠道4%
心血管4%
眼耳鼻喉3% 皮肤软组织3%
血流13%
尿路18%
Richards M, et al. Epidemiology, prevalence, and sites of infections in intensive care units. Seminars in Respiratory and Critical Care Medicine. 2003;24(1):3-22
送检方法：不保留情况
从独立的外周静脉无菌采集2套血培养 无菌状态下取出导管并剪下5cm导管尖端或近心
端交付实验室进行Maki半定量平板滚动培养或 者定量培养（Following Vortex或超声降解）
的45% ICU的医院感染率比一般病房高5～10倍 ICU的耐药菌分离率高，感染难治
Richards M, et al. Epidemiology, prevalence, and sites of infections in intensive care units. Seminars in Respiratory and Critical Care Medicine. 2003;24(1):3-22
完整的血培养过程
医师开出医嘱 护理人员收集送检样本 实验室检测、分离并鉴定导致血流感染的
微生物 三级报告：为临床医生提供抗菌药物敏感
性试验结果
国内血培养现状 —阳性检出率低10%（国外约为15％）
原因何在？
血流中含菌量低 血培养的临床实践
血液中抗菌物质
欠规范！！
抗生素的应用
第一套取血量 ml
血流感染诊断的金标准正确的血培养53页PPT
❖ 知识就是财富 ❖ 丰富你的人生
71、既然我已经踏上这条道路，那么，任何东西都不应妨碍我沿着这条路走下去。——康德 72、家庭成为快乐的种子在外也不致成为障碍物但在旅行之际却是夜间的伴侣。——西塞罗 73、坚持意志伟大的事业需要始终不渝的精神。——伏尔泰 74、路漫漫其修道远，吾将上下而求索。——屈原 75、内外相应，言行相称。—设而常关。 32、鼓腹无所思。朝起暮归眠。 33、倾壶绝余沥，窥灶不见烟。
34、春秋满四泽，夏云多奇峰，秋月 扬明辉 ，冬岭 秀孤松 。 35、丈夫志四海，我愿不知老。
谢谢你的阅读
71、既然我已经踏上这条道路，那么，任何东西都不应妨碍我沿着这条路走下去。——康德 72、家庭成为快乐的种子在外也不致成为障碍物但在旅行之际却是夜间的伴侣。——西塞罗 73、坚持意志伟大的事业需要始终不渝的精神。——伏尔泰 74、路漫漫其修道远，吾将上下而求索。——屈原 75、内外相应，言行相称。—设而常关。 32、鼓腹无所思。朝起暮归眠。 33、倾壶绝余沥，窥灶不见烟。
34、春秋满四泽，夏云多奇峰，秋月 扬明辉 ，冬岭 秀孤松 。 35、丈夫志四海，我愿不知老。
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2/4/2021
血流感染实验室诊断
10
美国49医院BSI病原谱
2/4/2021
CID血. 2流0感0染4,实3验9室: 3诊0断9-317
11
PUMCH2012年834血培养分离株
2/4/2021
血流感染实验室诊断
12
PUMCH2012年144株BSI大肠埃希菌 药敏结果
ESBL 60.2%
2/4/2021
内容
• 什么是血流感染？ • 血流感染流行病学特点 • 血培养流程优化
– 提高阳性率 – 分析培养结果 – 减少污染
• 分子生物学方法检测血流感染
– 基于PCR的技术 – MALDI-TOF MS – PNA-FISH
2/4/2021
血流感染实验室诊断
1
概念
• 感染＝炎症+病原体 • 全身炎症反应综合征（SIRS）
2/4/2021
血流感染实验室诊断
5
临床血流感染（Clinical Sepsis）
具有下列二条件之一者：
• 具有非其它已知原因所引起的发烧、血压过低（收缩压≤90mmHg或 收缩压低于平常超过40mmHg），少尿（每小时尿量低于30ml）等临 床症状任何一项，且符合下列所有条件者：
– 未做血培养，或血培养阴性或血液抗原反应呈阴性者 – 其它部位无明显感染者 – 医生针对此感染中毒症状给予适当抗菌药物治疗
– 体温>38⁰C或<36 ⁰C – 心率>90次/分 – 呼吸频率>20次/分，或PaCO2<32mmHg – 白细胞>12×109/L或<4×109/L，或幼稚细胞>10%
• 脓毒血症（sepsis）＝感染+SIRS，血培养可以阳性或阴性 • 重度脓毒血症（severe sepsis）＝sepsis+脏器功能障碍、组
• 标准二：病人至少具有下列症状和体征之一：发热（>38 ⁰C ），寒颤 或低血压，并致病符合下列之一：
– 1.从两次或两次以上不同部位抽血的标本中培养出皮肤寄生菌（如类白喉 杆菌、芽孢杆菌、丙酸杆菌、凝固酶阴性葡萄球菌或微球菌）。
– 2.至少一次从带血管内导管的病人血标本中培养出皮肤寄生菌群（如类白 喉杆菌、芽孢杆菌、丙酸杆菌、凝固酶阴性葡萄球菌或微球菌），并且 主管医生开始了适当的抗菌药物治疗。
• BSI发病率逐年增加 • 凝固酶阴性葡萄球菌、肠球菌、真菌血流
感染发病率逐年上升，革兰阴性菌下降 • 耐药菌比例逐年增加 • 社区获得与医院获得血流感染病原谱存在
差异 • 院内BSI患者病死率高
2/4/2021
血流感染实验室诊断
7
美国脓毒血症流行病学
+600% +300% +300%
2/4/2021
Martin et血al流, N感E染J实M验2室0诊03断;348:1546
8
加拿大CANWORD监测2002-2009
Diag Microbiolo Infect Dis. 2011; 69: 307
2/4/2021
血流感染实验室诊断
9
加拿大CANWORD监测2002-2009
Diag Microbiolo Infect Dis. 2011; 69: 307
• 临床血流感染（Clinical Sepsis）
– 继发血流感染：血培养分离出有意义微生物， 而且此微生物与另一部位之院内感染有关。唯 不包括血管或血管内导管装置所引起之血流感 染。
• 社区获得性血流感染
2/4/2021
血流感染实验室诊断
4
实验室证实血流感染（LCBI）
• 标准一：从一次或多次血标本中培养出一种一致的致病菌，而且培养 出的病原体与其它部位的感染无关。
• 血流感染（bloodstream infection, BSI）：败血症 和菌血症目前统称为血流感染。
2/4/2021
血流感染实验室诊断
3
血流感染
• 医院获得性血流感染
– 原发血流感染
• 实验室证实血流感染（Laboratory-confirmed Bloodstream Infection, LCBI）
血流感染实验室诊断
13
PUMCH2012年67株BSI肺炎克雷伯菌 药敏结果
ESBL 34.4%
2/4/2021
血流感染实验室诊断
14
PUMCH2012年61株BSI鲍曼不动杆菌 药敏结果
2/4/2021
血流感染实验室诊断
15
PUMCH2012年76株BSI金黄色葡萄球 菌药敏结果
2/4/2021
织灌注不良和低血压
• 感染性休克（septic shock）
2/4/2021
血流感染实验室诊断
2
概念
• 败血症（septicemia）：病原菌及其毒素侵入血流 所引起的临床综合征，是一种严重的全身感染。 病原菌主要是细菌，也可为真菌、分枝杆菌等。
• 菌血症（bacteremia）：细菌在血流中短暂出现的 现象，一般无明显毒血症状，在国外文献中常与 败血症通用。
• 1岁以下婴儿 ，具有非其它书籍原因引起的发烧、体温过低、呼吸中 止或心跳过缓等临床症状任何一项，且符合下列所有条件者：
– 未做血培养，或血培养阴性或血液抗原反应呈阴性者 – 其它部位无明显感染者 – 医生针对此感染中毒症状给予适当抗菌药物治疗
2/4/2021
血流感染实/2021
血流感染实验室诊断
20
2011CHIF-NET其他酵母菌对氟康唑的敏感性
2/4/2021
血流感染实验室诊断
21
2011CHIF-NET其他酵母菌对伏立康唑的 敏感性
2/4/2021
血流感染实验室诊断
22
采血量是影响血培养阳性率的 独立相关因素
• CLSI M47-A：每位患者采集2~3套血培养 （40~60ml）
血流感染实验室诊断
16
PUMCH2012年46株BSI草绿色溶血链 球菌药敏结果
2/4/2021
血流感染实验室诊断
17
2011CHIF-NET489株BSI酵母菌
2/4/2021
血流感染实验室诊断
18
2011CHIF-NET念珠菌对氟康唑的敏感性
2/4/2021
血流感染实验室诊断
19
2011CHIF-NET念珠菌对伏立康唑的 敏感性
– 3.血中抗原检测阳性（如流感嗜血杆菌、肺炎链球菌、脑膜炎奈瑟菌或B 群链球菌）。与实验室阳性结果一致的症状和体征与其它部位的感染无 关。
• 标准三：年龄<1岁的病人具备下列症状或体征中的至少一项，发热 （>38 ⁰C ），低温（<37 ⁰C ），呼吸暂停、脉搏徐缓，并具有下列之 一（同上3点略）