透明质酸海洋胶原肽粉中β-胡萝卜素的测定
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Ｂ一胡萝 卜素标准 品 （中国食 品药 品检定 研究院 ，
ｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅＴＭ Ｓｈｉｅｌｄ ＲＰ１８；ｍｏｂｉｌｅｐｈａｓｅ，ｍｅｔｈａｎｏｌ：ａｃｅｔｏｎｉｔｒｉｌｅ＝９０：１０ ｖｏｌｕｍｅ ｒａｔｉｏ）；ｔｅｓｔｅｄ ｗｉｔｈ ｔｈｅ ＰＤＡｄｅ— ｔｅｃｔｏｒ．Ｒｅｓｕｌｔ ｓｈｏｗｅｄ ｔ ｈａｔ ｔｈｅ ｌｉｎｅａｒ ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ ｗａｓ ｇｏｏｄ ｉｎ ｔｈｅ ｒａｎｇｅ ｏｆ ０－５０ 咖 Ｌ ｆ ｏｒ ｃａｒｏｔｅｎｏｉｄｓ，（Ｒ ＞ ０．９９９）．Ｔｈｅ ｒｅｃｏｖｅｒｙ ｏｆ ｃａｒｏｔｅｎｏｉｄｓ ｗａｓ １００．０％（ＲＳＤ＝２．３％ ，ｎ＝６）．Ｔｈｉｓ ｍｅｔｈｏｄ ｃａｎ ｂｅ ｕｓｅｄ ｆ ｏｒ ｄｅｔｅｃｔｉｎｇ
摘 要 ：建立透明质酸海洋胶原肽粉 中 １ ３－胡萝 卜紊的含量测定方法。样品经淀粉酶处理后 ，用 乙醇和三氯 甲烷提取 ， 离心，取上清液水浴蒸干，残渣用 乙醇溶解后转移至氧化铝柱进行层析纯化。采用 ＷａｔｅｒｓＸＢｒｉｄｇｅＴＭＳｈｉｅｌｄＲＰ１８色谱 柱， 以甲醇：乙腈＝９０：１０（－ｆ￣ ，Ｉ：Ｅ）为流动相 ，ＰＤＡ检测 器检测。结果表 明，在 ０－５０ 咖 Ｌ范围内 ３－胡萝 卜素呈线性关系（Ｒ ０．９９９），回收率为 １００．０％（ＲＳＤ＝２．３％，ｎ－６）。该含量测定方法可用于以 ８一胡萝 卜紊为原料 的保健食品的检测。 关键 词 ：３－胡 萝 卜素 ；ＨＰＬＣ；含 量
ｈｅａｌｔｈ ｃａｒｅ ｆｏ０ｄ ｗｉｔｈ ｂｅｔａ ｃａｒｏｔｅｎｅ ａｓ ｒａｗ ｍ ａｔｅｒｉａｌｓ． Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：８一ｃａｒｏｔｅБайду номын сангаасｅ；ＨＰＬＣ；ｃｏｎｔｅｎｔ
类胡萝 卜素是 四萜类化合物 。在众多类胡萝 卜成 分之 中 ，Ｂ一胡萝 卜素作 为维生素 Ａ的前体 ，早 已备受 临床 医药界 的关注 。近年来随着类胡萝 卜素 的应用与 研究 在临床 医学 、临床药理 、食品工业 、及 化妆 品工业 的迅 猛发展 ，特别 是 ９０年代 以来 ，有关专 家对其作 用 机制 在流行病学 、保健预 防疾病 的作用方 面进行 了广 泛和深入 的研究探讨 ，并取得 了相 当的成果『１１。Ｂ一胡萝 卜素不仅是 人体 内维生素 Ａ的重要 来源 ，而且 其本身 对人 体也 具有 很重要 的生 理功 能 ，它可 以预 防 、延 缓 和 治疗某 些疾 病 ，尤 其是 癌症 ，同时也 能提 高机体 的 免疫 功能翻。Ｂ一胡萝 卜素还作 为食 品添加剂 和营养增 补 剂 ，被联 合 国粮 农 组织 （ＦＡＯ）和 世 界卫 生组 织 （ＷＨＯ）食品添加剂联合专家委员会推荐 ，被认 为 Ａ类 优 秀和有 营养 的食 品添加 剂［３１。近年来 国内对 其关注
（Ｂｅｉｊｉｎｇ ＴｏｎｇＲｅｎＴａｎｇ Ｈｅａｌｔｈ—Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｃｏ．，Ｌｔｄ．，Ｂｅｉｊｉｎｇ １０００８５，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ａ ｐｒａｃｔｉｃａｌ ｍｅｔｈｏｄ ｆｏｒ ｄｅｔｅｒｍｉｎｉｎｇ ｔｈｅ ｃｏｎｔｅｎｔ ｏｆ ｃａｒｏｔｅｎｏｉｄｓ ｉｎ ｈｙａｌｕｒｏｎｉｃ ａｃｉｄ ｍ ａｒｉｎｅ ｃｏｌｌａｇｅｎ ｐｅｐｔｉｄｅ ｐｏｗｄｅｒ ｗａｓ ｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄ．Ａｆｔｅｒ ｔｈｅ ｓａｍｐｌｅｓ ｗｅｒｅ ｐｒｏｃｅｓｓｅｄ ｂｙ ａｍｙｌａｓｅ ，ｅｘｔｒａｃｔｅｄ ｗｉｔｈ ｅｔｈａｎｏｌ ａｎｄ ｃｈｌｏｒｏｆｏｒｍ ，ｃｅｎｔｒｉｆｕｇａｌ，ａｎｄ ｔｈｅ ｅｘｔｒａｃｔ ｗａｓ ｔｏ ｄｒｙ ｉｎ ａ ｗａｔｅｒ ｂａｔｈ，ｔｈｅｎ ｔｈｅ ｒｅｓｉｄｕｅ ａｆｔｅｒ ｄｉｓｓｏｌｖｅｄ ｗｉｔｈ ｅｔｈａｎｏｌ ａｎｄ ｔ ｒａｎｓｆｅｒｒｅｄ ｔｏ ｔｈｅ ａｌｕｍｉｎａ ｃｏｌｕｍｎ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ．Ｕｓｉｎｇ ｔｈｅ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒ ａｐｈｉｃ ｃｏｌｕｍｎ ｏｆ Ｗ ａ－
Ｄｅｔｅｒｍ ｉｎｉｎｇ ｔｈｅ Ｃｏｎｔｅｎｔ ｏｆ Ｃａｒｏｔｅｎｏｉｄｓ ｉｎ Ｈ ｙａｌｕｒｏｎｉ ｃ Ａ ｃｉｄ Ｍ ａｒｉｎｅ Ｃｏｌｌａｇｅｎ Ｐｅｐｔｉｄｅ Ｐｏｗｄｅｒ Ｗ ＡＮＧ Ｈａｉ－ｄｏｎｇ，ＪＩＡＮＧ Ｓｈｕｉ－ｈｏｎｇ，ＺＨＡ Ｓｈｅｎｇ－ｈｕａ，ＺＨＡＮＧ Ｈｏｎｇ
基金项 目：国家 ８６３计划项 目（２０１４ＡＡ０２２１０９） 作 者简介 ：王 海东 （１９８７一 ），男 （汉 ），助 理工程师 ，学士 ，研 究方 向 食品药品质量研 究。
越来越 高 ，其研究 和探讨也 十分活跃 。 目前一些 添加 了 Ｂ一胡萝 卜素成分 的保 健食 品为
了保证该成分 的稳定性 ，对其进行 了包埋处理 ，当采用 国标法 ＧＢ／Ｔ ５００９．８３—２００３（食品 中胡萝 卜素 的测定》第 一 法进行测定 时 ，结果 比添加量 明显偏低 ，针对这一现 象 ，该文在 国标法基础上 ，增加 了样品去包埋前处理过 程 ，并对修改后 的方法进行 了全面的方法学验证 。
１ 材料与方法 １．１ 仪 器
２６９５—２９９８高效液相 色谱仪 ：美 国 Ｗａｔｅｒｓ公 司 ； ＣＰＡ２２５Ｄ电子天平 ：德国 Ｓａｒｔｏｒｉｕｓ公司 ；３—１５离心机 ： 德 国 Ｓｉｇｍａ公司 ；ＫＱ３２００ＤＥ数控超 声波清洗器 ：昆山 市超声仪器有 限公司 ；ＤＺＫＷ—Ｄ－４电热恒温水浴锅 ：北 京永光 明医疗仪器厂 。 １．２ 试剂
２０１６年 ７月 第 ３７卷第 １３期
－＝＝ ９６
食品研究与开发
Ｆｏｏｄ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ａｎｄ Ｄｅｖｅｉｏｐｍｅｎ
ＤＯＩ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００５－６５２１．２０１６．１３．０２３
检 测分 析
透明质酸海洋胶原肽粉中 Ｂ一胡萝 卜素的测定
王海 东 ，姜水红 ，查圣华 ，张宏 （北京 同仁堂健康药业股份有 限公 司，北京 １０００８５）
ｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅＴＭ Ｓｈｉｅｌｄ ＲＰ１８；ｍｏｂｉｌｅｐｈａｓｅ，ｍｅｔｈａｎｏｌ：ａｃｅｔｏｎｉｔｒｉｌｅ＝９０：１０ ｖｏｌｕｍｅ ｒａｔｉｏ）；ｔｅｓｔｅｄ ｗｉｔｈ ｔｈｅ ＰＤＡｄｅ— ｔｅｃｔｏｒ．Ｒｅｓｕｌｔ ｓｈｏｗｅｄ ｔ ｈａｔ ｔｈｅ ｌｉｎｅａｒ ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ ｗａｓ ｇｏｏｄ ｉｎ ｔｈｅ ｒａｎｇｅ ｏｆ ０－５０ 咖 Ｌ ｆ ｏｒ ｃａｒｏｔｅｎｏｉｄｓ，（Ｒ ＞ ０．９９９）．Ｔｈｅ ｒｅｃｏｖｅｒｙ ｏｆ ｃａｒｏｔｅｎｏｉｄｓ ｗａｓ １００．０％（ＲＳＤ＝２．３％ ，ｎ＝６）．Ｔｈｉｓ ｍｅｔｈｏｄ ｃａｎ ｂｅ ｕｓｅｄ ｆ ｏｒ ｄｅｔｅｃｔｉｎｇ
摘 要 ：建立透明质酸海洋胶原肽粉 中 １ ３－胡萝 卜紊的含量测定方法。样品经淀粉酶处理后 ，用 乙醇和三氯 甲烷提取 ， 离心，取上清液水浴蒸干，残渣用 乙醇溶解后转移至氧化铝柱进行层析纯化。采用 ＷａｔｅｒｓＸＢｒｉｄｇｅＴＭＳｈｉｅｌｄＲＰ１８色谱 柱， 以甲醇：乙腈＝９０：１０（－ｆ￣ ，Ｉ：Ｅ）为流动相 ，ＰＤＡ检测 器检测。结果表 明，在 ０－５０ 咖 Ｌ范围内 ３－胡萝 卜素呈线性关系（Ｒ ０．９９９），回收率为 １００．０％（ＲＳＤ＝２．３％，ｎ－６）。该含量测定方法可用于以 ８一胡萝 卜紊为原料 的保健食品的检测。 关键 词 ：３－胡 萝 卜素 ；ＨＰＬＣ；含 量
ｈｅａｌｔｈ ｃａｒｅ ｆｏ０ｄ ｗｉｔｈ ｂｅｔａ ｃａｒｏｔｅｎｅ ａｓ ｒａｗ ｍ ａｔｅｒｉａｌｓ． Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：８一ｃａｒｏｔｅБайду номын сангаасｅ；ＨＰＬＣ；ｃｏｎｔｅｎｔ
类胡萝 卜素是 四萜类化合物 。在众多类胡萝 卜成 分之 中 ，Ｂ一胡萝 卜素作 为维生素 Ａ的前体 ，早 已备受 临床 医药界 的关注 。近年来随着类胡萝 卜素 的应用与 研究 在临床 医学 、临床药理 、食品工业 、及 化妆 品工业 的迅 猛发展 ，特别 是 ９０年代 以来 ，有关专 家对其作 用 机制 在流行病学 、保健预 防疾病 的作用方 面进行 了广 泛和深入 的研究探讨 ，并取得 了相 当的成果『１１。Ｂ一胡萝 卜素不仅是 人体 内维生素 Ａ的重要 来源 ，而且 其本身 对人 体也 具有 很重要 的生 理功 能 ，它可 以预 防 、延 缓 和 治疗某 些疾 病 ，尤 其是 癌症 ，同时也 能提 高机体 的 免疫 功能翻。Ｂ一胡萝 卜素还作 为食 品添加剂 和营养增 补 剂 ，被联 合 国粮 农 组织 （ＦＡＯ）和 世 界卫 生组 织 （ＷＨＯ）食品添加剂联合专家委员会推荐 ，被认 为 Ａ类 优 秀和有 营养 的食 品添加 剂［３１。近年来 国内对 其关注
（Ｂｅｉｊｉｎｇ ＴｏｎｇＲｅｎＴａｎｇ Ｈｅａｌｔｈ—Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｃｏ．，Ｌｔｄ．，Ｂｅｉｊｉｎｇ １０００８５，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ａ ｐｒａｃｔｉｃａｌ ｍｅｔｈｏｄ ｆｏｒ ｄｅｔｅｒｍｉｎｉｎｇ ｔｈｅ ｃｏｎｔｅｎｔ ｏｆ ｃａｒｏｔｅｎｏｉｄｓ ｉｎ ｈｙａｌｕｒｏｎｉｃ ａｃｉｄ ｍ ａｒｉｎｅ ｃｏｌｌａｇｅｎ ｐｅｐｔｉｄｅ ｐｏｗｄｅｒ ｗａｓ ｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄ．Ａｆｔｅｒ ｔｈｅ ｓａｍｐｌｅｓ ｗｅｒｅ ｐｒｏｃｅｓｓｅｄ ｂｙ ａｍｙｌａｓｅ ，ｅｘｔｒａｃｔｅｄ ｗｉｔｈ ｅｔｈａｎｏｌ ａｎｄ ｃｈｌｏｒｏｆｏｒｍ ，ｃｅｎｔｒｉｆｕｇａｌ，ａｎｄ ｔｈｅ ｅｘｔｒａｃｔ ｗａｓ ｔｏ ｄｒｙ ｉｎ ａ ｗａｔｅｒ ｂａｔｈ，ｔｈｅｎ ｔｈｅ ｒｅｓｉｄｕｅ ａｆｔｅｒ ｄｉｓｓｏｌｖｅｄ ｗｉｔｈ ｅｔｈａｎｏｌ ａｎｄ ｔ ｒａｎｓｆｅｒｒｅｄ ｔｏ ｔｈｅ ａｌｕｍｉｎａ ｃｏｌｕｍｎ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ．Ｕｓｉｎｇ ｔｈｅ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒ ａｐｈｉｃ ｃｏｌｕｍｎ ｏｆ Ｗ ａ－
Ｄｅｔｅｒｍ ｉｎｉｎｇ ｔｈｅ Ｃｏｎｔｅｎｔ ｏｆ Ｃａｒｏｔｅｎｏｉｄｓ ｉｎ Ｈ ｙａｌｕｒｏｎｉ ｃ Ａ ｃｉｄ Ｍ ａｒｉｎｅ Ｃｏｌｌａｇｅｎ Ｐｅｐｔｉｄｅ Ｐｏｗｄｅｒ Ｗ ＡＮＧ Ｈａｉ－ｄｏｎｇ，ＪＩＡＮＧ Ｓｈｕｉ－ｈｏｎｇ，ＺＨＡ Ｓｈｅｎｇ－ｈｕａ，ＺＨＡＮＧ Ｈｏｎｇ
基金项 目：国家 ８６３计划项 目（２０１４ＡＡ０２２１０９） 作 者简介 ：王 海东 （１９８７一 ），男 （汉 ），助 理工程师 ，学士 ，研 究方 向 食品药品质量研 究。
越来越 高 ，其研究 和探讨也 十分活跃 。 目前一些 添加 了 Ｂ一胡萝 卜素成分 的保 健食 品为
了保证该成分 的稳定性 ，对其进行 了包埋处理 ，当采用 国标法 ＧＢ／Ｔ ５００９．８３—２００３（食品 中胡萝 卜素 的测定》第 一 法进行测定 时 ，结果 比添加量 明显偏低 ，针对这一现 象 ，该文在 国标法基础上 ，增加 了样品去包埋前处理过 程 ，并对修改后 的方法进行 了全面的方法学验证 。
１ 材料与方法 １．１ 仪 器
２６９５—２９９８高效液相 色谱仪 ：美 国 Ｗａｔｅｒｓ公 司 ； ＣＰＡ２２５Ｄ电子天平 ：德国 Ｓａｒｔｏｒｉｕｓ公司 ；３—１５离心机 ： 德 国 Ｓｉｇｍａ公司 ；ＫＱ３２００ＤＥ数控超 声波清洗器 ：昆山 市超声仪器有 限公司 ；ＤＺＫＷ—Ｄ－４电热恒温水浴锅 ：北 京永光 明医疗仪器厂 。 １．２ 试剂
２０１６年 ７月 第 ３７卷第 １３期
－＝＝ ９６
食品研究与开发
Ｆｏｏｄ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ａｎｄ Ｄｅｖｅｉｏｐｍｅｎ
ＤＯＩ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００５－６５２１．２０１６．１３．０２３
检 测分 析
透明质酸海洋胶原肽粉中 Ｂ一胡萝 卜素的测定
王海 东 ，姜水红 ，查圣华 ，张宏 （北京 同仁堂健康药业股份有 限公 司，北京 １０００８５）