顶空气相色谱法测定布洛芬缓释胶囊中乙醇残留量

顶空气相色谱法测定布洛芬缓释胶囊中乙醇残留量
目的建立顶空气相色谱法测定布洛芬缓释胶囊中乙醇残留量。

方法采用Agilent HP-FFAP（30 m×0.320 m，0.25 μm）毛细管柱为色谱柱，柱温为40℃，进样口温度为150 ℃，FID检测器温度为250 ℃，顶空瓶平衡温度为85 ℃，平衡时间为30 min，进样量1 mL，载气为氮气，流速2.0 mL/min。

结果乙醇在0.05036～2.0144 mg/mL范围内呈良好线性关系（r=0.9997，n=6），平均回收率（n=9）为100.9%（RSD为0.24%）。

结论本法简便、准确，重复性好，专属性强，灵敏度高，可用于布洛芬缓释胶囊中乙醇残留量的测定。

[Abstract] Objective To determine the residual ethanol in ibuprofen sustained release capsule by headspace gas chromatography.Methods Agilent HP-FFAP（30 m×0.320 m，0.25 μm）was used.The column temperature was 40℃.The injection port temperature was 150℃.The FID detector temperature was 250℃.The equilibrium temperature of the headspace gas bottle was 85℃.The equilibrium time was 30 minutes.The injection volume was 1 mL.The Carrier gas was nitrogen.The flow rate was 1.0 mL/min. Results A good linear correlation of ethanol was observed within the range of 0.05036-2.0144 mg/mL（r=0.9997，n=6）. The average recovery was 100.9% with RSD 0.24%（n=9）. Conclusion The method is simple，accurate and repeatable，with strong selectivity and high sensitivity.It can be applied to the determination of of residual ethanol in ibuprofen sustained release capsule.
[Key words] Headspace GC；Ibuprofen sustained release capsule；Residual ethanol；Quality control
布洛芬缓释胶囊由于其缓释机制使其具有良好的解热、镇痛及抗炎作用[1]。

近年来随着临床的广泛应用，其不良反应时有报道，如胃肠道反应、语言障碍、眩晕、皮疹、过敏性休克、哮喘严重发作等[2-4]。

由于在布洛芬缓释微丸的制备工艺中，缓释粘合剂配制中用到95%乙醇[5]，而中华人民共和国药典二部中规定乙醇属于第三类溶剂[6]，因此有必要对其进行控制。

本研究采用顶空气相色谱法，以丙酮为内标物，内标法对布洛芬缓释胶囊中乙醇残留量进行测定，为制剂的质量控制提供实验依据。

1 仪器与试药
1.1 仪器
Agilent 7890A GC System气相色谱仪，Agilent 7694E Headspace Sampler顶空自动进样器，Agilent GC ChemStation工作站，Sartorius BP221S型电子分析天平。

1.2 试药
布洛芬缓释胶囊（市售品，批号20110106，20111021，20111022，规格：0.3 g），布洛芬对照品（中国食品药品检定研究院，100179-200303，规格：100 mg），无水乙醇（色谱纯，Merck公司），丙酮（色谱纯，Merck公司），水为超纯水。

2 方法与结果
2.1 内标溶液的制备
精密称取丙酮0.2 g，置100 mL量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀。

精密量取上述溶液5 mL，置1000 mL量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得内标溶液。

2.2 对照品溶液的制备
精密称取无水乙醇1 g，置100 mL量瓶中，加内标溶液溶解并稀释至刻度，摇匀。

精密量取上述溶液5 mL，置100 mL量瓶中，加内标溶液稀释至刻度，摇匀。

精密量取上述溶液5 mL，置顶空瓶中，密封，即得对照品溶液。

2.3 供试品溶液的制备
取布洛芬缓释胶囊20粒，取内容物置乳钵中，研细。

精密称取上述细粉5 g，置100 mL量瓶中，加内标溶液70 mL，振摇10 min使乙醇溶解，加内标溶液稀释至刻度，摇匀，滤过。

精密量取上述溶液5 mL，置顶空瓶中，密封，即得供试品溶液。

2.4 阴性对照溶液的制备
精密称取布洛芬对照品0.3 g，置10 mL量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，滤过。

精密量取上述溶液5 mL，置顶空瓶中，密封，即得阴性对照溶液。

2.5 色谱条件
色谱柱：Agilent HP-FFAP（30 m×0.320 m，0.25μm）毛细管柱；柱温为40 ℃；进样口温度为150 ℃；检测器温度为250 ℃；顶空瓶平衡温度为85 ℃；平衡时间为30 min；定量环温度为105 ℃；传输管温度为120 ℃；载气为氮气，流速2.0 mL/min；分流比20︰1；进样量1 mL。

取对照品溶液、供试品溶液、阴性对照溶液，分别顶空进样，记录色谱图，见图1。

理论塔板数按乙醇峰计，均不低于5000；丙酮峰与乙醇峰之间的分离度符合要求；阴性对照溶液对测定无干扰。

A
B
C
1.丙酮；
2.乙醇
图1 阴性对照溶液（A）、对照品溶液（B）、供试品溶液（C）色谱图
2.6 线性关系考察
精密称取无水乙醇1.0072 g，置100 mL量瓶中，加内标溶液溶解并稀释至刻度，摇匀，作为对照品储备液。

精密量取对照品储备液，用内标溶液稀释成含乙醇浓度分别为0.050 36，0.100 72，0.201 44，0.402 88，1.007 20，2.014 40 mg/mL 的溶液，按上述色谱条件进样分析，记录色谱图。

以乙醇浓度为横坐标，乙醇峰面积与丙酮峰面积的比值为纵坐标进行线性回归，得标准曲线的回归方程：Y=30.95X+0.1294（r=0.9997，n=6）。

结果表明乙醇在0.050 36～2.0144 mg/mL 浓度范围内线性关系良好。

2.7 检出限、定量限考察
取“2.6项下”浓度为0.050 36 mg/mL的溶液继续稀释，按上述色谱条件测定，得乙醇的检出限浓度为0.3μg/mL（S/N=3），定量限浓度为1μg/mL（S/N=10）。

2.8 精密度试验
取同一对照品溶液，连续进样6次，记录色谱图。

计算乙醇峰面积与丙酮峰面积的比值，RSD=0.67%（n=6），结果表明该方法精密度良好。

2.9 重复性试验
取同一批号的样品6份（批号20110106），按“2.3”项下方法制备供试品溶液，进样，内标法计算乙醇残留量。

结果6份供试品乙醇残留量，RSD=1.21%（n=6）。

2.10 稳定性试验
取同一供试品溶液，分别于0，1，2，4，6，8，24 h进样，记录色谱图。

内标法计算乙醇残留量，RSD=0.35%，表明在24 h内溶液稳定。

2.11 加样回收试验
精密称取9份已知含量的样品（批号：20110106）细粉各5 g，置100 mL 量瓶中，分别精密加入“2.6”项下对照品储备液1.2，1.5，1.8 mL，加内标溶液70 mL，振摇10 min使乙醇溶解，加内标溶液稀释至刻度，摇匀，滤过。

分别精密量取上述溶液5 mL，置顶空瓶中，密封，分别制得低、中、高浓度的供试品溶液。

进样，记录色谱图。

计算加样回收率，结果见表1。

平均加样回收率为100.9%，RSD=0.24%。

2.12 乙醇残留量测定取布洛芬缓释胶囊样品3批（批号20110106，20111021，20111022），按“2.3”项下方法制备供试品溶液，进样，内标法计算乙醇残留量。

结果3批样品中乙醇残留量分别为0.31%，0.27%，0.28%。

3 讨论
国家食品药品监督管理总局审核、通过了，该制剂21个批准文号；也就是说，国内有20余家，生产企业可以生产布洛芬缓释胶囊；其中包括中美史克制药公司、珠海联邦制药等国内外生产规模较大的龙头制药企业，也包括一些只有几个批准文号小的制药企业；生产技术水平参差不齐；所以急待需要一个行之有效的检查方法考查该制剂在生产过程中，工艺所带来的乙醇残留量，从而提高该类制剂的安全性、有效性。

乙醇作为一种有效的溶剂、洗涤剂、萃取剂、粘合剂以及合成原料等，在制药工业中有着非常广泛的用途。

2010年版中华人民共和国药典二部将乙醇规定为第三类溶剂，药品GMP或其他质量标准要求限制使用，因此本文建立一个通用的乙醇残留检测的方法。

有文献报道用直接进样气相色谱法检测药品中乙醇残留的方法[7-8]，该方法的缺点是药品制剂中的辅料同乙醇一起进入仪器分析，辅料峰容易对乙醇峰造成干扰，气相色谱仪及色谱柱也会受到损害；本文建立的方法可以分离、分析；彻底消除了辅料对乙醇峰及内标物峰的干扰，专属性更强、结果更加准确。

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