一种治疗癌症的药物组合物[发明专利]

(10)申请公布号 (43)申请公布日 2010.12.22*CN101920015A*
(21)申请号 201010257127.3
(22)申请日 2010.08.13
201010185153.X 2010.05.25 CN
A61K 39/395(2006.01)
A61P 35/00(2006.01)
A61K 31/4706(2006.01)
(71)申请人中国人民解放军第二军医大学
地址200433 上海市杨浦区翔殷路800号
(72)发明人卫立辛 郭献灵 李丁 宋建瑞
吴孟超
(74)专利代理机构上海德昭知识产权代理有限
公司 31204
代理人丁振英
(54)发明名称
一种治疗癌症的药物组合物
(57)摘要
本发明涉及医药技术领域，是一种由抗血管
生成药物安维汀和自噬抑制剂氯喹组成的治疗癌
症的药物组合物，临用时按安维汀和氯喹各自的
给药剂量混合而成，它们给药剂量按体重计算分
别为：安维汀7.6mg/kg ；
氯喹60mg/kg 。

动物实验结果表明，本发明药物组合物能够明显抑制皮肤
癌、肝癌细胞在小鼠体内的生长，抑制肿瘤效果显
著高于单独使用安维汀或氯喹，说明安维汀和氯
喹具有协同抑制肿瘤生长的作用，因此可用于治
疗肿瘤。

本发明药物组合物制备方法简单，使用方
便，治疗肿瘤的效果好。

(66)本国优先权数据(51)Int.Cl.
(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请权利要求书 1 页 说明书 3 页 附图 3 页CN 101920015 A
C N 101920015 A
1.一种治疗癌症的药物组合物，由抗血管生成药物和自噬抑制剂组成，所说的抗血管生成药物为安维汀；自噬抑制剂为氯喹，临用时将安维汀和氯喹按各自的给药剂量混合而成。

2.按权利要求1所述的一种治疗癌症的药物组合物，其特征在于各组分的给药剂量按体重计算分别为：
安维汀 7.6mg/kg
氯喹 60mg/kg。

一种治疗癌症的药物组合物
技术领域
[0001] 本发明涉及医药技术领域，是一种治疗癌症的药物组合物。

背景技术
[0002] 恶性肿瘤是人类生命健康的头号杀手。

肿瘤需要功能性的血管网络提供氧气、养料并清除代谢产物。

肿瘤除了通过与宿主血管融合而获得部分血管外，还必须通过形成新生血管网构建自己的血管系统，这样才能持续地生长和发展。

如果没有血管系统提供氧气和养料，实体瘤的增长不会超过1mm3。

鉴于其在肿瘤发生、发展中的重要作用，肿瘤血管已成为抗肿瘤治疗的一个重要靶点。

[0003] 血管内皮生长因子(fvascular endothelial growth fact or，VEGF)可直接作用于血管内皮细胞，刺激其发生有丝分裂。

VEGF的过度表达已被证实与肿瘤的进展相关，且在不同类型的肿瘤，如鼻咽癌和多发性骨髓瘤中均是预后不良的相关分子指标。

此外，在结直肠癌、胃癌、胰腺癌、乳腺癌、前列腺癌、肺癌和黑色素瘤中也起着重要作用。

VEGF是目前所知作用最强的促血管生长因子，还是最强的增加血管通透性的因子，它主要与内皮细胞上的两种受体Fh-1、Flk-2结合发挥促进内皮细胞的分裂增殖、迁移和血管重建的作用。

由于VEGF在血管新生中发挥主导性的作用，因此多数研究将VEGF或其受体作为治疗的靶点。

[0004] 尽管抗血管生成药物已取得一定的成功，但仍面临许多问题。

与其他多数治疗方案一样，在临床试验及动物肿瘤模型中抗血管生成药物很少达到持续完全的疗效，几乎都会出现药物抵抗现象，尤其是在动物肿瘤模型中抗VEGFR治疗方案出现初期有效、后期无效的状况。

抗血管生成药物发生药物抵抗的具体机制尚不清楚，可能与抗血管生成药物的持续作用使肿瘤产生持续性低氧和营养缺乏有关，低氧和营养缺失均能刺激自噬启动，使肿瘤细胞通过自噬对胞内物质的降解和循环利用而改变新陈代谢，从而对应激作出适应性反应而得以生存。

研究证实抑制自噬能提高营养缺乏和乏氧导致的细胞凋亡。

因此自噬的激活为肿瘤在低氧和营养缺失情况下作出的适应性改变(如重新产生各种血管生成因子，促进血管生成)赢得了时间。

安维汀(Avastin)是一种重组单克隆抗VEGF抗体，由瑞士制药商罗氏公司(ROCHE)研发，于2004年3月获得了美国F DA批准上市，可与VEGF各种亚型结合，能抑制VEGF介导的肿瘤血管生成，所以是一种抗血管生成药物。

氯喹是一种抗疟疾药，目前被证实是一种自噬抑制剂。

但至今未见将安维汀和氯喹组成药物组合物用于治疗癌症的报道。

发明内容
[0005] 本发明提供一种治疗癌症的药物组合物，由抗血管生成药物和自噬抑制剂组成，所说的抗血管生成药物为安维汀；自噬抑制剂为氯喹。

药物组合物是临用时按安维汀和氯喹各自的给药剂量混合而成，它们给药剂量按体重计算分别为：
[0006] 安维汀 7.6mg/kg
[0007] 氯喹 60mg/kg
[0008] 使用时将安维汀和氯喹按给药剂量混合，用生理盐水稀释到200μl，然后按常规通过腹膜内注射给药。

[0009] 动物实验结果表明，本发明药物组合物能够明显抑制皮肤癌、肝癌细胞在小鼠体内的生长，种植瘤体积及重量减少显著，抑制肿瘤效果明显高于单独使用安维汀或氯喹。

[0010] 本发明药物组合物制备方法简单，使用方便，治疗肿瘤的效果好。

附图说明
[0011] 图1.本发明药物组合物对皮肤癌细胞种植瘤小鼠体重的影响比较图。

[0012] 图2.本发明药物组合物抑制小鼠皮肤癌细胞种植瘤的生长比较图。

[0013] 图3.本发明药物组合物抑制小鼠皮肤癌细胞种植瘤的增殖比较图。

[0014] 图4.本发明药物组合物对肝癌细胞种植瘤小鼠体重的影响比较图。

[0015] 图5.本发明药物组合物抑制小鼠肝癌细胞种植瘤生长比较图。

[0016] 图6.本发明药物组合物抑制小鼠肝癌细胞种植瘤增殖比较图。

具体实施方式
[0017] 现结合实施例和附图对本发明作详细描述。

[0018] 实施例1.制备本发明药物组合物
[0019] 安维汀(Roche公司，批号S2*******)，用生理盐水配制成一定浓度的安维汀溶液；
[0020] 氯喹(SIGMA公司.批号C6628-25G)，用生理盐水配制成一定浓度的氯喹溶液；[0021] 根据体重按给药剂量安维汀7.6mg/kg+氯喹60mg/kg将安维汀溶液和氯喹溶液于临用前混合即成。

[0022] 动物实验
[0023] 实验1.本发明药物组合物对小鼠黑色素瘤疗效观察实验
[0024] 60只C57小鼠，由第二军医大学动物实验中心提供(下同)，雄性，平均体重20g，随机分成六组，每组10只，按常规腋下接种小鼠黑色素瘤细胞B16，接种量2X106个/200μl，接种9天后，种植瘤长至约150立方毫米，第10天开始给药处理。

[0025] 空白对照组：种植瘤成瘤后，小鼠不接受任何给药处理。

[0026] 生理盐水组：腹膜内注射生理盐水200μl，每天一次，连续注射10天；[0027] 安维汀组：按小鼠体重给药，安维汀给药剂量为7.6mg/kg，所需安维汀用生理盐水稀释到200μl，腹膜内注射，每天一次，连续给药10天。

[0028] 氯喹组：按小鼠体重给药，氯喹给药剂量为60mg/kg，所需氯喹用生理盐水稀释到200μl，每天一次，连续给药10天。

[0029] 本发明药物组合物组：按小鼠体重给药，安维汀剂量为7.6mg/kg，氯喹剂量为60mg/kg，所需药物组合物用生理盐水稀释到200μl，每天一次，按体重，连续给药10天。

[0030] 每次给药时，测量小鼠瘤体的体积大小(V＝1/2a×b2；其中V为肿瘤体积，a为肿瘤最短径长度，b为肿瘤最长径长度)，给药10天后，第11天处死C57小鼠，观测各组之间小鼠体重、种植瘤重量和体积的差异。

实验结果如图1～3所示。

[0031] 由图1可见，各组小鼠体重变化无明显差异，说明小鼠对本实验的不同给药方案
具有良好的耐受性。

[0032] 由图2可见，本发明组合物组能够显著抑制小鼠皮肤癌细胞移植瘤重量的增加，与空白对照组及生理盐水组相比有显著差异(P＜0.01)，空白对照组及生理盐水组的肿瘤重量为5克左右，而本发明组合物组的肿瘤重量为2克左右；本发明组合物组与单独使用氯喹组或安维汀组相比，抑制肿瘤重量增加的作用具有显著性差异(P＜0.05)，氯喹组或安维汀组肿瘤的重量分别为3.9克和3.8克左右，而本发明组合物组的肿瘤重量仅为2左右，差异显著。

这说明氯喹和安维汀具有协同抑制肿瘤生长的作用。

[0033] 由图3可见，在治疗周期中，伴随着时间的推移，本发明组合物能够显著减缓小鼠皮肤癌细胞移植瘤体积的增长，与空白对照组及生理盐水组比有显著差异(P＜0.01)；治疗结束时，空白对照组及生理盐水组的肿瘤体积为5000立方毫米左右，而本发明组合物组的肿瘤体积为2000立方毫米左右；而且本发明组合物组与氯喹组或安维汀组相比，同样具有显著性差异(P＜0.05)；氯喹组或安维汀组肿瘤的体积为4000立方毫米左右，而本发明组合物组的肿瘤体积仅为2000立方毫米，差异显著。

这说明本发明组合物中氯喹和安维汀具有协同抑制肿瘤生长的作用。

[0034] 实验2.本发明药物组合物对小鼠肝癌细胞瘤抑制效应实验
[0035] 60只C57小鼠，雄性，平均重量20g，随机分成六组，每组10只，按常规腋下接种小鼠肝癌细胞Hep1-6，接种量5X106个/300μl，接种10天后，种植瘤长至约150立方毫米，第11天开始给药处理。

[0036] 分组与给药同实验1，连续给药12天。

[0037] 每次给药时，测量瘤体体积大小(V＝1/2a×b2；其中V为肿瘤体积，a为肿瘤短径长度，b为肿瘤长径长度)，给药12天，第13天处死C57小鼠，观测各组小鼠的体重、瘤体体积和重量的差异。

[0038] 实验结果如图4～6所示。

[0039] 由图4可见，各组小鼠体重变化无明显差异，说明小鼠对本实验的不同给药方案具有良好的耐受性。

[0040] 由图5可见，本发明组合物能够显著抑制小鼠肝癌细胞移植瘤重量的增加，与空白对照组及生理盐水组比有显著差异(P＜0.05)，空白对照组及生理盐水组的肿瘤重量为1.5克左右，而本发明组合物组的肿瘤重量为0.5克左右；本发明组合物与氯喹组或安维汀组相比同样具有显著性差异(P＜0.05)，氯喹组或安维汀组肿瘤的重量分别为1.3克和1.2克左右，而本发明组合物组的肿瘤重量仅为0.5克左右，差异显著。

这说明氯喹和安维汀具有协同抑制肿瘤生长的作用。

[0041] 由图6可见，在治疗周期中，伴随着时间的推移，本发明组合物能够显著减缓小鼠肝癌细胞移植瘤体积的增长，与空白对照组及生理盐水组比有显著差异(P＜0.01)，治疗结束时，空白对照组及生理盐水组的肿瘤体积分别为1100和1000立方毫米左右，而本发明组合物组的肿瘤体积为500立方毫米左右；本发明组合物组与氯喹组和安维汀组相比，抑制肿瘤体积增长的作用同样差异显著(P＜0.05)，在治疗结束后，氯喹组和安维汀组肿瘤的体积分别为800和750立方毫米左右，而本发明组合物组的肿瘤体积仅为500立方毫米左右。

这说明本发明组合物中氯喹和安维汀具有协同抑制肿瘤生长的作用。

图1
图2
图3
图4
图5
图6。