雅培I2000FER方法学验证

雅培I2000FER方法学验证
2009年4月，因换检测仪器（由罗氏COBAS601电化学发光仪换成美国雅培I2000）而进行方法验证。

参考《方法验证程序》、《定量检测项目参考区间的建立与验证程序》等质量管理程序及相应项目SOP文件。

2009年4月上旬制定方法学验证计划，并收集实验设计中所需临床标本或高值标本，4月中旬开始项目实验，按照实验设计的要求，由各项目负责人按临床常规标本处理实验，之后收集数据并进行方法学统计和评价完成方法学验证，并形成纪录。

一．检测系统信息：
项目：铁蛋白（Ferritin）
仪器：ARCHITECT i2000
试剂及厂商：ARCHITECT i2000原装试剂（第2006第3401043号）
检测方法：采用化学发光微粒子免疫分析（Chemiluminesent Microparticle ImmunoAssay, CMIA）技术
项目负责人：姜小琴
二．厂商的相关参数：
厂商参数验证结果批内精密度
Mean(ng/ml) CV(%) Mean(ng/ml) CV(%)
ALL ≤9.00 18.44 3.80
天间精密度Mean(ng/ml) CV(%)
详见批间质控精密度数据表ALL ≤10.00
分析灵敏度<1.0ng/ml <1.0ng/ml
分析测量范围（AMR） 1.00-2000.00ng/ml 1.00-2000.00ng/ml 临床报告范围（CRR） 1.00-40000.00ng/ml 1.00-40000.00ng/ml
参考值区间男性为：21.81~274.66ng/ml；
女性为：4.63~204.00ng/ml
男性为：21.81~274.66ng/ml；
女性为：4.63~204.00ng/ml
三．验证过程
1．准确度（Accuracy）：
2009年4月6日参加CAP开展的室间质评，2009年5月28日回报统计结果，如下：
Test
Unit of Measure Peeroup
Evaluation and Comparative Method Statistics
Your No.of Limits of Acceptability Yuor Specimen Result Mean S.D. Labs S.DI. Lower Upper Grade
Ferritin
ng/ML I2000
K-01 25 25.3 1.4 95 -0.2 21 30 Acceptable
K-02 521 539.9 31.9 96 -0.6 444 636 Acceptable
K-03 10 11.3 0.8 96 -1.7 9 14 Acceptable
此次质评总成绩100%,当前性能解释:满意,累积性能解释:成功.故准确度合格。

2．精密度（Precision）：
2．1天间精密度：
取最近一个月的室内质控数据，列于下表：
水平1：
统计指标
月份例数（n）均值（X）SD CV％
4 27 54.6
5 1.45 2.65
检测数据
(ng/ml)
54.3454.4653.9554.8854.53
56.3857.4753.7257.0652.91
56.6754.8254.8755.7454.83
55.3554.3856.3753.68
54.8651.9152.0955.89
55.153.6753.2552.49
水平3：
统计指标
月份例数（n）均值（X）SD CV％
4 27 429.73 26.42 6.15
检测数据
(ng/ml)
417.58444.98443.14443.03378.16
437.55465.08454.93445.47395.83
438.52455.37410.69390.58396.69
466.33440.95458.3401.28
448.28429.65452.45384.19
419.24434.02452.47397.96
注：因室内质控均定期核查并由实验室主任及主任助理审核，以上批间精密度结果与厂商相
比或根据<1/3ALE(ALE=30%)判断均可接受。

2．2批内精密度：
选择尽量接近医学决定水平附近的病人样本进行检测，在较短时间内测定10个数据，测定
时带质控，且质控在控。

（检测日期：2009-04-15）统计所得数据，得：
统计指标Mean(ng/ml) SD CV(%)
18.44 0.70 3.80
检测数据(ng/ml)19.06 17.98 18.17 18.82 17.01 18.52 18.66 18.44 17.15 17.63
批内精密度小于允许限1/3ALE(ALE=30%)，合格。

3．线性范围（Linearity range）：
取病人高（X5= 1980.78ng/ml）、低（X1=2.55ng/ml）值样品按4L、3L+1H(300+100)、2L+2H(200+200)、1L+3H(100+300)、4H关系各自配置混合，重复测定三次，求出各自均值与预期值对应：（检测日期：2009-6-4）
配置测量均值Y 预期值X
4L 2.77 2.55
3L+1H 433.57497.1075
2L+2H 885.93991.665
1L+3H 1325.541486.223
4H 1864.341980.78
得直线回归Y=bX+a，若b在0.97-1.03范围内，a接近于0，则可直接判断线性范围在实验已涉及浓度；若b不在0.97-1.03范围内，a较大，舍去高或低值组数据，另作回归统计。

直至缩小的分析范围其回归方程中a和b的判断符合要求，则该范围为线性范围。

用直线回归对数据进行统计，得：Y=bX+ a，a=-22.972，b=0.9332
故线性范围为2.77~1864.34 ng/ml已涉及，由于没有找到1864.34-2000 ng/ml的标本，故没有验证全部范围，临床报告结果仍以厂家AMR为准。

4.分析灵敏度(Analytical Sensitivity)：
用去离子水作为零标准品重复测定10次，所测结果均小于试剂说明书提供的最低检测限。

（检测日期：2009-04-15）
结果如下：
检测次数 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 结果<1.0 <1.0 <1.0 <1.0 <1.0 <1.0 <1.0 <1.0 <1.0 <1.0 根据试剂说明书，该试剂灵敏度为<1.0ng/ml 。

本次实验灵敏度<1.0ng/ml ，与厂商参数相符。

5．临床可报告范围（Clinical reportable range，CRR）：
采用对倍稀释法，将一高浓度样本(1980.78ng/ml)稀释至倍（用去离子水稀释），分别为原倍、10倍、20倍、25倍；计算R值（R=检测值/预期值），当120≥%R≥80%为合格。

计算检测值和预测值的偏差，以1/2CLIA’88总允许误差范围（30%）为判断限。

符合该条件的最大稀释度为该项目的最大稀释倍数。

稀释材料：去离子水（检测日期：2009-6-4）
倍数原倍10 20 25
测量值1932.17 172.60 93.54 76.88
预期值1980.78 198.08 90.04 79.23 R 0.98 0.87 1.03 0.97 根据上表，该项目的最大稀释倍数为20倍（20ul血清+380ul去离子水）以上，建议采
用厂商提供的最适稀释比例1:20，临床可报告范围(CRR)为1.00~40000.00 ng/ml。

6.干扰物质(Interfering Substances)：
该方法不受黄疸（胆红红素<65mg/dl）、溶血（hemolysis）（血红蛋白<0.5g/dl）、脂血
（脂质3300mg/dl）和生物素<50ng/ml干扰，接受高剂量生物素(>5mg/天)治疗的病人，至少
要等最后一次摄入生物素8小时后才能采血。

不受类风湿因子干扰（2500U/ml）。

19种常用
药物经试验对本测定无干扰。

铁蛋白浓度高达100000u/ml也不出现钩状效应。

接受过小鼠
单抗治疗或体内诊断的病人可能会出现假阳性反应。

Elecsys铁蛋白测定结果应结合病人病史、临床其他检查结果综合起来进行诊断。

7．参考区间（Reference intervals）：
统计女性20份合格体检标本，男性20份合格体检标本，对该项目参考范围进行验证。

只允
许有10%的数据超出所验证的参考范围，否则需建立参考范围。

（检测日期：2009-04-28）
结果如下：
健康女性体检结果（ng/ml）健康男性体检结果（ng/ml）
测定时间条形码性别年龄结果条形码性别年龄结果
2009-4-28 120904210092 女28 43.44120904210052 男21 155.28 2009-4-28 120904210167 女29 39.08120904210055 男21 132.02 2009-4-28 120904210177 女26 93.42120904210074 男23 149.73 2009-4-28 120904210178 女53 135.66120904210059 男19 88.03 2009-4-28 120904210101 女21 70.29120904210053 男39 39.06 2009-4-28 120904210158 女37 59.86120904210068 男23 104.26 2009-4-28 120904210180 女57 132.28120904210067 男23 97.25 2009-4-28 120904210154 女28 87.4120904210075 男43 158.48 2009-4-28 120904210159 女30 8.54120904210057 男22 189.69 2009-4-28 120904210171 女30 110.58120904210061 男19 129.48 2009-4-28 120904210173 女31 7.02120904210064 男22 80.57 2009-4-28 120904210081 女24 8.02120904210077 男39 136.67 2009-4-28 120904210164 女36 43.38120904210066 男27 138.58 2009-4-28 120904210089 女30 10.66120904210063 男20 58.8 2009-4-28 120904210088 女28 96.81120904210070 男57 226.32 2009-4-28 120904210155 女27 91.87120904230048 男23 63.12 2009-4-28 120904210094 女30 72.65120904230041 男25 216.35 2009-4-28 120904210085 女31 66.79120904230036 男40 211.35 2009-4-28 120904210169 女31 20.02120904230034 男30 180.68 2009-4-28 120904210168 女27 97.75120904230046 男37 115.49
FER参考值女性为：4.63~204ng/ml 男性为：21.81~274.66ng/ml；经验证，所验证结果未有超出验证范围。

故参考区间通过验证。

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批准：
日期：。