注射用盐酸川芎嗪冻干制剂的冷冻干燥方法[发明专利]

(10)申请公布号
(43)申请公布日 (21)申请号 201510507904.8
(22)申请日 2015.08.18
A61K 9/19(2006.01)
A61K 31/4965(2006.01)
A61P 9/10(2006.01)
A61P 7/02(2006.01)
A61P 9/14(2006.01)
(71)申请人北京四环科宝制药有限公司
地址100070 北京市丰台区丰台科技园区海
鹰路11号
(72)发明人谢亚 张建立 赵龙 陈浩
黄淑坤 盛爱武 李明洁 王玉霞
蔡晓曦 刘栋 张婉玉
(74)专利代理机构北京市浩天知识产权代理事
务所(普通合伙) 11276
代理人刘云贵
(54)发明名称
注射用盐酸川芎嗪冻干制剂的冷冻干燥方法
(57)摘要
本发明提供一种注射用盐酸川芎嗪冻干制剂
冷冻干燥方法，其特征在于，该方法包括如下顺序
的步骤a-c ：步骤a，预冻；步骤b，0℃以下的升
华，去除83％以上的水分；和步骤c，0℃～30℃的
升华过程，时间不能超过2小时。

本发明方法既能
有效解决快速冻结过程中裂瓶问题，而且能够控
制盐酸川芎嗪在冷冻真空干燥过程中挥发量，保
持含量稳定，提高升华速率。

(51)Int.Cl.
(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请权利要求书1页 说明书11页CN 105078907 A 2015.11.25
C N 105078907
A
1.一种注射用盐酸川芎嗪冻干制剂冷冻干燥方法，其特征在于，该方法包括如下顺序的步骤a-c：
步骤a，预冻；
步骤b，0℃以下的升华，去除83％以上的水分；
步骤c，0℃～30℃的升华，升华后保持温度恒定时间不能超过2小时。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤a预冻过程包括先快速降温、然后升温、再降温的过程，该过程重复1～3次。

3.如权利要求2所述的方法，其特征在于，所述步骤a在一次降温、升温再降温的过程中，首次降温过程为温度由50℃至20℃之间降至-30℃至-50℃之间，降温速率为0.2～1℃/min；升温过程为温度由-30℃至-50℃之间升温至升至-24℃，升温速率为1～2℃/ min；第二次降温过程为温度由-24℃降至-30℃至-50℃之间，降温速率为0.2～1℃/min。

4.如权利要求3所述的方法，其特征在于，所述步骤a升温后保温20～40min，第二次降温后保温180～300min。

5.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤b过程中去除90％以上的水分。

6.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤b过程中加入惰性气体。

7.如权利要求5所述的方法，其特征在于，所述步骤b升华过程包括如下步骤：以步骤a的终点温度为起点，先以1～2℃/min的速度升温至-20℃，保温30～40min，继续以2～5℃/min的速度升温至-10℃，保温10～12h，最后以0.01～0.1℃/min的速度升温至-6℃，升华结束。

8.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤c为0℃～25℃的升华，保温时间不能超过2小时，该过程不加入惰性气体。

9.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述盐酸川芎嗪冻干制剂在冷冻干燥先前包括如下制备过程：
步骤1，取盐酸川芎嗪和辅料，加入注射用水，搅拌均匀；
步骤2，将步骤1制得的溶液过滤，得到中间体，调节pH至酸性，除菌，灌装。

10.如权利要求9所述的方法，其特征在于，步骤1所述辅料选自氢氧化钠、盐酸、甘露醇、糖苷、乳糖、碳酸钠、碳酸氢钠中一种或几种；注射用水的温度为50～70℃；步骤2调节pH值至2.0～3.0。

注射用盐酸川芎嗪冻干制剂的冷冻干燥方法
技术领域
[0001] 本发明涉及一种注射用盐酸川芎嗪冻干制剂的冷冻干燥方法，属于医药制剂领域。

背景技术
[0002] 注射用盐酸川芎嗪具有抗血小板聚集，并对已聚集的血小板有解聚作用。

此外本品尚有扩张小动脉、改善微循环和增加脑血流量，从而产生抗血栓和溶血栓的作用。

临床上用于治疗缺血性心脑血管病如脑供血不足、脑血栓形成、脑栓塞及其它缺血性血管疾病如冠状动脉粥样硬化性心脏病、脉管炎等。

[0003] 盐酸川芎嗪最先是从中药川芎中提取具有活血化瘀功能的有效成分，为一种生物碱单体的盐酸盐，其化学结构为四甲基吡嗪，现已经实现人工合成，川芎嗪具有对已聚集的血小板有解聚作用。

能够扩张小动脉、改善微循环和增加冠脉、脑血流量，提高心肌耐缺氧能力等，盐酸川芎嗪在中国药典中类别为血管扩张药。

[0004] 盐酸川芎嗪疗效确切、安全，在上世纪八十年代先后有片剂和注射液上市，广泛用于临床，治疗各种缺血性心脑血管疾病，能够改善微循环、改善血液流变学等，另外还具有治疗肾衰、妊娠高症、眼底病等多方面的作用。

[0005] 中国药典在1977版就已收载了盐酸川芎嗪的原料及小容量注射剂；规格为2ml；40mg，随着冷冻干干燥工艺的逐渐成熟，冻干制剂的优点越来越突出，注射用盐酸川芎嗪冷冻干燥工艺能够更好的保障产品稳定性。

因此冷冻干燥技术在盐酸川芎嗪制剂上产得到广泛的应用。

发明内容
[0006] 本发明的一个目的是提供注射用盐酸川芎嗪冻干制剂的冷冻干燥方法。

[0007] 本发明的第二个目的在于提供注射用盐酸川芎嗪冻干制剂的制备方法。

[0008] 本发明的目的是通过如下技术方案实现的：
[0009] 一种注射用盐酸川芎嗪冻干制剂冷冻干燥方法，该方法包括如下顺序的步骤a-c：
[0010] 步骤a，预冻；
[0011] 步骤b，0℃以下的升华，去除83％以上的水分；
[0012] 步骤c，0℃～30℃的升华，保温时间不能超过2小时。

[0013] 进一步，所述步骤a预冻过程包括快速降温及升温及保持温度恒定的步骤；更进一步，所述步骤a预冻过程包括先快速降温，然后升温，再降温的过程，该过程重复1～3次；其中优选，在一次降温、升温再降温的过程中，首次降温过程为温度由50℃至20℃之间降至-30℃至-50℃之间，降温速率为0.2～1℃/min；升温过程为温度由-30℃至-50℃之间升温至升至-24℃，升温速率为1～2℃/min；第二次降温过程为温度由-24℃降至-30℃至-50℃之间，降温速率为0.2～1℃/min，更进一步优选升温后保温20～40min，第二次
降温后保温180～300min。

[0014] 进一步，步骤b过程中要去除90％以上的水分；
[0015] 进一步，步骤b升华过程加入惰性气体；
[0016] 进一步，步骤b包括以预冻步骤的温度为起点的多次升温及保持温度恒定的步骤，也可以包括再降温的过程；更进一步优选为，先以1～2℃/min的速度的升温至-20℃，保温30～40min，再以2～5℃/min的速度升温至-10℃，保温10～12h，最后以0.01～0.1℃/min的速度升温至-6℃，升华结束。

其中，步骤b真空度为10～30pa；所述惰性气体可以为氮气。

[0017] 进一步，步骤c为0℃～25℃的升华，保温时间不能超过1小时；
[0018] 进一步，步骤c不加入惰性气体。

[0019] 所述盐酸川芎嗪冻干制剂在冷冻干燥先前包括如下制备过程：
[0020] 步骤1，取盐酸川芎嗪和辅料，加入注射用水，搅拌均匀；
[0021] 步骤2，将步骤1制得的溶液过滤，得到中间体，调节pH至酸性，除菌，灌装。

[0022] 一种注射用盐酸川芎嗪冻干制剂的制备方法，该方法包括如下步骤：
[0023] 步骤1，取盐酸川芎嗪和辅料，加入注射用水，搅拌均匀；
[0024] 步骤2，将步骤1制得的溶液过滤，得到中间体，调节pH至酸性，除菌，灌装；和[0025] 步骤3，步骤2灌装后进行冷冻干燥，制得注射用盐酸川芎嗪冻干制剂；[0026] 其中冷冻干燥该包括如下顺序的步骤a-c：
[0027] 步骤a，预冻；
[0028] 步骤b，0℃以下的升华，去除83％以上的水分；
[0029] 步骤c，0℃～30℃的升华，保温时间不能超过2小时；
[0030] 进一步，所述步骤a预冻过程包括快速降温及升温及保持温度恒定的步骤；更进一步，所述步骤a预冻过程包括先快速降温，然后升温，再降温的过程，该过程重复1～3次；其中优选，在一次降温、升温再降温的过程中，首次降温过程为温度由50℃至20℃之间降至-30℃至-50℃之间，降温速率为0.2～1℃/min；升温过程为温度由-30℃至-50℃之间升温至升至-24℃，升温速率为1～2℃/min；第二次降温过程为温度由-24℃降至-30℃至-50℃之间，降温速率为0.2～1℃/min，更进一步优选升温后保温20～40min，第二次降温后保温180～300min。

[0031] 进一步，步骤b过程中要去除90％以上的水分；
[0032] 进一步，所述步骤b升华过程加入惰性气体；
[0033] 进一步，步骤b包括以预冻步骤的温度为起点的多次升温及保持温度恒定的步骤，也可以包括再降温的过程；更进一步优选为，先以1～2℃/min的速度的升温至-20℃，保温30～40min，再以2～5℃/min的速度升温至-10℃，保温10～12h，最后以0.01～0.1℃/min的速度升温至-6℃，升华结束。

其中，步骤b真空度为10～30pa；所述惰性气体可以为氮气。

[0034] 进一步，步骤c为0℃--25℃的升华，保温时间不能超过2小时；
[0035] 进一步，步骤c不加入惰性气体。

[0036] 进一步，步骤1所述辅料选自氢氧化钠、盐酸、甘露醇、糖苷、乳糖、碳酸钠、碳酸氢钠中一种或几种；
[0037] 进一步，步骤1加入注射用水的温度为50～70℃；更进一步，为55～65℃；[0038] 进一步，步骤2经过药用炭进行，步骤2药用炭的用量为0.1～0.5％(W/V)；调节pH值至2.0～3.0。

[0039] 本发明的有益效果在于：①预冻过程采用反复降温、升温再降温的工艺并控制降温速率，其形成的特定冰晶结构较之单纯的快速降温的冰晶要大一些，待上部冰晶升华后留下较大的通道，有利于下部升华水汽的溢出，提高整个一次升华速率，较好、较快的去除水分；且该步骤能有效地改变溶质及溶媒冰晶结构、使制品失去刚性、解决快速冻结过程中裂瓶问题；②由于盐酸川芎嗪具有挥发性，在冷冻真空干燥过程中易挥发，导致含量下降，本发明特定的升华和干燥步骤能够控制盐酸川芎嗪在冷冻真空干燥过程中挥发量，保持含量稳定；③升华过程加入惰性气体，掺气过程形成对流，克服真空条件下无对流热交换的缺点，使热分布更均匀，能够提高升华速率，增加产品均一性和稳定性。

[0040] 本发明冷冻干燥方法同样适用于在冷冻干燥过程易发生裂瓶以及由于挥发性导致含量下降的的药物。

[0041] 实验例1预冻工艺考察
[0042] 1、实验目的：考察冷冻干燥过程中的预冻过程
[0043] 2、实验方法：
[0044] (1)注射用盐酸川芎嗪冻干粉针样品制备过程：取实施例1制备的灌装、半压塞产品单元三批，标记为样品1、2、3，分别置于冷冻干燥机中，进行冷冻干燥，待冻干结束后，部分充氮气，微真空下全压塞，出箱后轧盖密封，得注射用盐酸川芎嗪冻干粉针。

[0045] (2)预冻过程：本发明冷冻干燥包括三个步骤，步骤a预冻过程、步骤b升华过程、步骤c干燥过程。

本实验考察步骤a的不同控温方案影响终产品的情况(样品1、2、3分别按方案一、二、三进行预冻)；步骤b、c条件保持不变。

步骤b为升华过程：使用惰性气体掺气，真空度控制20pa；控温程序为：15分钟内，温度从-40℃升高-20℃，保温40分钟；5分钟内，温度从-20℃升至-10℃，保温12小时；120分钟内，温度从-10℃升至-6℃，升华结束；步骤c为干燥过程：停止掺惰性气体，30分钟内温度从-6℃升至25℃，保温60分钟，干燥结束。

[0046] 步骤a预冻过程：
[0047] 方案一：105分钟内，由常温降至-40℃；保温240分钟；
[0048] 方案二：30分钟内，由常温降至-40℃；15分钟内，由-40℃升至-24℃，保温30分钟；30分钟内，温度降至-40℃，保温240分钟；
[0049] 方案三：105分钟内，由常温降至-40℃；15分钟内，由-40℃升至-24℃，保温30分钟；30分钟内，温度降至-40℃，保温240分钟。

[0050] 各样品于步骤b结束后测定水分和盐酸川芎嗪含量，并于步骤c结束后测定水分和盐酸川芎嗪含量以及冻干制剂成型效果。

实验结果见表1。

[0051] 3、实验结果：
[0052] 见表1。

[0053] 表1不同预冻过程对产品质量的影响
[0054]
[0055] 上述实验结果表明：
[0056] 方案一：500支样品有20支裂瓶，产品含量符合规定，其水分在5％～10％不符合规定；
[0057] 方案二：500支样品有2支裂瓶，产品含量符合规定，其水分在3％～5％符合规定；
[0058] 方案三：500支样品无裂瓶，含量符合规定，其水分在1％～3％符合规定。

[0059] 结果表明方案三能更快、更多的去除水分，且更好的保障了无裂瓶情况。

[0060] 实验例2升华工艺考察
[0061] 1、实验目的：考察冷冻干燥过程中的升华过程条件
[0062] 2、实验方法：
[0063] (1)取实施例1、2、3制备的灌装、半压塞产品单元各2批，标记为样品1～6，分别置于冷冻干燥机中，进行冷冻干燥，待冻干结束后，部分充氮气，微真空下全压塞，出箱后轧盖密封，得注射用盐酸川芎嗪冻干粉针。

[0064] (2)升华过程：本发明冷冻干燥包括三个步骤，步骤a预冻过程、步骤b升华过程、步骤c干燥过程。

本实验考察步骤b升华过程的不同条件影响终产品的情况(样品1～6分别按方案一～六进行升华)；步骤a、c条件保持不变。

步骤a预冻过程：105分钟内，由常温降至-40℃；15分钟内，由-40℃升至-24℃，保温30分钟；90分钟内，温度降至-40℃，保温240分钟；步骤c干燥过程：停止掺惰性气体，以步骤b终点温度为起点30分钟内升至25℃，保温60分钟。

[0065] 步骤b升华过程：
[0066] 方案一：-30℃以下的一次升华过程：使用惰性气体掺气，真空度控制20pa；控温程序为：15分钟内，温度从-40℃升高-30℃，保温40分钟；5分钟内，温度从-30℃升至-10℃，保温12小时；120分钟内，温度从-10℃升至-6℃，至水印从上到瓶底完全消失，升华结束。

[0067] 方案二：-20℃以下的一次升华过程：使用惰性气体掺气，真空度控制20pa；控温程序为：15分钟内，温度从-40℃升高-20℃，保温40分钟；5分钟内，温度从-20℃升至-10℃，保温12小时；120分钟内，温度从-10℃升至-6℃，至水印从上到瓶底完全消失，升华结束。

[0068] 方案三：-10℃以下的一次升华过程：使用惰性气体掺气，真空度控制20pa；控温程序为：15分钟内，温度从-40℃升高-10℃，保温12小时；120分钟内，温度从-10℃升至-6℃，至水印从上到瓶底完全消失，升华结束。

[0069] 方案四：5℃以下的一次升华过程：使用惰性气体掺气，真空度控制20pa；控温程
序为：15分钟内，温度从-40℃升高5℃，保温12小时；120分钟内，温度从5℃升至10℃，至水印从上到瓶底完全消失，升华结束。

[0070] 方案五：10℃以下的一次升华过程：使用惰性气体掺气，真空度控制20pa；控温程序为：15分钟内，温度从-40℃升高10℃，保温12小时；120分钟内，温度从10℃升至15℃，至水印从上到瓶底完全消失，升华结束；步骤3为干燥过程。

[0071] 方案六：15℃以下的一次升华过程：使用惰性气体掺气，真空度控制20pa；控温程序为：15分钟内，温度从-40℃升高15℃，保温12小时；120分钟内，温度从15℃升至20℃，至水印从上到瓶底完全消失，升华结束。

[0072] 各样品于步骤b结束后测定水分和盐酸川芎嗪含量，并于步骤c结束后测定水分和盐酸川芎嗪含量以及冻干制剂成型效果。

[0073] 3实验结果
[0074] 见表2。

[0075] 表2不同升华过程对产品质量的影响
[0076]
[0077] 上述实验结果表明：步骤b控制一次升华温度在0℃以下、去除83％以上水分能够保证最终产品含水量和含量符合质量要求。

[0078] 实验例3干燥工艺考察
[0079] 1、实验目的：考察冷冻干燥过程中的干燥过程条件
[0080] 2、实验方法：
[0081] (1)取实施例1、2、3制备的灌装、半压塞产品单元各2批，标记为样品1～6，分别
置于冷冻干燥机中，进行冷冻干燥，待冻干结束后，部分充氮气，微真空下全压塞，出箱后轧盖密封，得注射用盐酸川芎嗪冻干粉针。

[0082] (2)干燥过程：本发明冷冻干燥包括三个步骤，步骤a预冻过程、步骤b升华过程、步骤c干燥过程。

本实验考察步骤c干燥过程的不同条件影响终产品的情况(样品1～6分别按方案一～六进行干燥)；步骤a、b条件保持不变。

步骤a预冻过程：105分钟内，由常温降至-40℃；15分钟内，由-40℃升至-24℃，保温30分钟；90分钟内，温度降至-40℃，保温240分钟；步骤b为升华过程：使用惰性气体掺气，真空度控制20pa；控温程序为：15分钟内，温度从-40℃升高-20℃，保温40分钟；5分钟内，温度从-20℃升至-10℃，保温12小时；120分钟内，温度从-10℃升至-6℃，升华结束。

[0083] 步骤c干燥过程：
[0084] 方案一：从-6℃升至25℃，保温60分钟；
[0085] 方案二：从-6℃升至25℃，保温90分钟；
[0086] 方案三：从-6℃升至25℃，保温120分钟；
[0087] 方案四：从-6℃升至30℃，保温90分钟；
[0088] 方案五：从-6℃升至30℃，保温120分钟；
[0089] 方案六：从-6℃升至35℃，保温140分钟。

[0090] 各样品于步骤c结束后测定水分和盐酸川芎嗪含量。

[0091] 3、实验结果
[0092] 见表3。

[0093] 表3不同干燥过程对产品质量的影响
[0094]
含量水分
样品1105％2％～3％
样品2103％2％～3％
样品399％1％～2％
样品497％1％～2％
样品593％﹤1％
样品675％﹤1％
[0095] 上述结果表明：控制产品水分和含量时需要严格控制干燥过程终点温度及保温时间；当终点温度低于30℃、保温时间不超过两小时时能保障产品质量。

具体实施方式
[0096] 实施例1
[0097] 处方：
[0098]
[0099] 制备方法：
[0100] 步骤1：按处方量准确称取盐酸川芎嗪和辅料，取适量注射用加入容器中控制水温60℃，先加入辅料完全溶解，然后再加入原料盐酸川芎嗪溶解完全，补加一定量的的注射用水至总量，搅拌均匀；
[0101] 步骤2：向步骤1制得的溶液中加入0.1％(W/V)药用炭，于50℃条件下搅拌吸附20分钟，经过1.0μm钛棒过滤器与0.5μm预过滤器过滤，得中间体；取溶液测定pH值(测定浓度以盐酸川芎嗪计8mg/ml)，用0.1mol/L的HCl溶液调节溶液pH值至2.0，再用除菌滤器对中间体进行除菌过滤(滤膜孔径为0.22um)，然后按无菌工艺进行灌装、半压塞。

[0102] 实施例2
[0103] 处方：
[0104]
[0105] 制备方法：
[0106] 步骤1：按处方量准确称取盐酸川芎嗪和辅料，取适量注射用加入容器中控制水温65℃，先加入辅料完全溶解，然后再加入原料盐酸川芎嗪溶解完全，补加一定量的的注射用水至总量，搅拌均匀；
[0107] 步骤2：向步骤1制得的溶液中加入0.3％(W/V)药用炭，于55℃条件下搅拌吸附20分钟，经过1.0μm钛棒过滤器与0.5μm预过滤器过滤，得中间体；取溶液测定pH值(测定浓度以盐酸川芎嗪计8mg/ml)，用0.1mol/L的HCl溶液调节溶液pH值至3.0，再用除菌滤器对中间体进行除菌过滤(滤膜孔径为0.22um)，然后按无菌工艺进行灌装、半压塞。

[0108] 实施例3
[0109] 处方：
[0110]
[0111] 制备方法：
[0112] 步骤1：按处方量准确称取盐酸川芎嗪和辅料，取适量注射用加入容器中控制水温70℃，先加入辅料完全溶解，然后再加入原料盐酸川芎嗪溶解完全，补加一定量的的注射用水至总量，搅拌均匀；
[0113] 步骤2：向步骤1制得的溶液中加入0.5％(W/V)药用炭，于45℃条件下搅拌吸附20分钟，经过1.0μm钛棒过滤器与0.5μm预过滤器过滤，得中间体；取溶液测定pH值(测定浓度以盐酸川芎嗪计8mg/ml)，用0.1mol/L的HCl溶液调节溶液pH值至2.5，再用除菌滤器对中间体进行除菌过滤(滤膜孔径为0.22um)，然后按无菌工艺进行灌装、半压塞。

[0114] 实施例4
[0115] 处方：
[0116]
[0117] 制备方法同实施例1。

[0118] 实施例5
[0119] 将实施例1-4经无菌工艺灌装、半压塞的产品单元置于冷冻干燥机中，进行冷冻干燥，所述冷冻干燥工艺包括如下步骤：
[0120] 步骤a，预冻过程：
[0121] 105分钟内，由常温降至-40℃；
[0122] 15分钟内，由-40℃升至-24℃，保温30分钟；
[0123] 90分钟内，温度降至-40℃，保温240分钟；
[0124] 步骤b，升华过程：使用惰性气体掺气，真空度控制20pa；控温程序为：[0125] 15分钟内，温度从-40℃升高-20℃，保温40分钟；
[0126] 5分钟内，温度从-20℃升至-10℃，保温12小时；
[0127] 120分钟内，温度从-10℃升至-6℃，升华结束；
[0128] 步骤c，干燥过程：停止掺惰性气体，30分钟内温度从-6℃升至25℃，保温60分钟，干燥结束。

[0129] 实施例6
[0130] 将实施例1-4经无菌工艺灌装、半压塞的产品单元置于冷冻干燥机中，进行冷冻干燥，所述冷冻干燥工艺包括如下步骤：
[0131] 步骤a，预冻过程：控温程序为：
[0132] 60分钟内，由常温降至-40℃；
[0133] 50分钟内，由-40℃升至-24℃，保温30分钟；
[0134] 140分钟内，温度降至-40℃，保温240分钟；
[0135] 步骤b，升华过程：使用惰性气体掺气，真空度控制10pa；控温程序为：[0136] 15分钟内，温度从-40℃升高-20℃，保温40分钟；
[0137] 5分钟内，温度从-20℃升至-10℃，保温12小时；
[0138] 120分钟内，温度从-10℃升至-6℃，升华结束；
[0139] 步骤c，干燥过程：停止掺惰性气体，10分钟内温度从-6℃升至25℃，保温90分钟，干燥结束。

[0140] 实施例7
[0141] 将实施例1-4经无菌工艺灌装、半压塞的产品单元置于冷冻干燥机中，进行冷冻干燥，所述冷冻干燥工艺包括如下步骤：
[0142] 步骤a，预冻过程：控温程序为：
[0143] 90分钟内，由常温降至-40℃；
[0144] 30分钟内，由-40℃升至-24℃，保温30分钟；
[0145] 60分钟内，温度降至-40℃，保温240分钟；
[0146] 步骤b，升华过程：使用惰性气体掺气，真空度控制10pa；控温程序为：[0147] 15分钟内，温度从-40℃升高-10℃，保温12小时；
[0148] 120分钟内，温度从-10℃升至-6℃，保温12小时，升华结束；
[0149] 步骤c，干燥过程：停止掺惰性气体，60分钟内温度从-6℃升至30℃，保温60分钟，干燥结束。

[0150] 实施例8
[0151] 将实施例1-4经无菌工艺灌装、半压塞的产品单元置于冷冻干燥机中，进行冷冻干燥，所述冷冻干燥工艺包括如下步骤：
[0152] 步骤a，预冻过程：控温程序为：
[0153] 140分钟内，由常温降至-40℃；
[0154] 40分钟内，由-40℃升至-24℃，保温30分钟；
[0155] 105分钟内，温度降至-40℃，保温240分钟；
[0156] 步骤b，升华过程：使用惰性气体掺气，真空度控制10pa；控温程序为：[0157] 30分钟内，温度从-40℃升高-20℃，保温40分钟；
[0158] 10分钟内，温度从-20℃升至-10℃，保温12小时；
[0159] 140分钟内，温度从-10℃升至-6℃，升华结束；
[0160] 步骤c，干燥过程：停止掺惰性气体，50分钟内温度从-6℃升至25℃，保温120分钟，干燥结束。

[0161] 实施例9
[0162] 将实施例1-4经无菌工艺灌装、半压塞的产品单元置于冷冻干燥机中，进行冷冻
干燥，所述冷冻干燥工艺包括如下步骤：
[0163] 步骤a，预冻过程：控温程序为：
[0164] 70分钟内，由常温降至-40℃；
[0165] 60分钟内，由-40℃升至-24℃，保温30分钟；
[0166] 120分钟内，温度降至-40℃，保温240分钟；
[0167] 步骤b，升华过程：使用惰性气体掺气，真空度控制10pa；控温程序为：[0168] 60分钟内，温度从-40℃升高-20℃，保温40分钟；
[0169] 25分钟内，温度从-20℃升至-10℃，保温12小时；
[0170] 80分钟内，温度从-10℃升至-6℃，升华结束；
[0171] 步骤c，干燥过程：停止掺惰性气体，20分钟内温度从-6℃升至25℃，保温60分钟，干燥结束。

[0172] 实施例10
[0173] 将实施例5-9冷冻干燥后的产品，部分充氮气，微真空下全压塞，出箱后轧盖密封，得注射用盐酸川芎嗪冻干粉针。

[0174] 规格：80mg/支
[0175] 成品检验结果：按2010版中国药典第三增补版注射用盐酸川芎嗪质量标准进行检验。

[0176] 性状：为白色或类白色疏松块状物或粉末。

[0177] 鉴别：(1)取本品适量(约相当于盐酸川芎嗪40mg)，加水10ml溶解后，加碘化铋钾试液2滴，即产生橘红色沉淀。

[0178] (2)取本品，加水溶解并稀释制成每1ml中约含盐酸川芎嗪0.02mg的溶液，照紫外-可见分光光度法(中国药典2010年版二部附录ⅣA)测定，在295nm波长处有最大吸收。

[0179] (3)在含量测定项下记录的色谱图中，供试品溶液主峰的保留时间与对照品溶液主峰的保留时间一致。

[0180] (4)本品的水溶液显氯化物的鉴别反应(中国药典2010年版二部附录Ⅲ)。

[0181] 溶液的澄清度与颜色：取本品5瓶，分别加水10ml溶解，溶液应澄清无色。

[0182] 检查：pH值2.3～2.5；
[0183] 含量：为标示量的98％～102％；
[0184] 其他指标均符合有关规定。

[0185] 效果实验：
[0186] 比较本发明“反复预冻、二次升华”的冷冻干燥方法与现有技术冷冻干燥方法的效果。

[0187] 实验组：采用本发明实施例1制备的半压塞产品，分别按实施例5～9的冻干方法进行冻干。

[0188] 对照组1：冷冻干燥方法：由室温降至-55℃，保温1小时；抽真空达到8.0×10-2mbar，升温速度为5℃/h，升温至-15℃时，维持此温度6h；以5℃/h速度升温至20℃时，保温5h。

[0189] 对照组2：冷冻干燥方法：由室温降至-55℃，保温1小时；抽真空达到
8.0×10-2mbar，升温速度为5℃/h，升温至-5℃时，维持此温度10h；以5℃/h速度升温至35℃时，保温2h。

[0190] 各组实验数为500，统计冷冻干燥过程中裂瓶数并计算成品盐酸川芎嗪含量。

结果见下表。

[0191]
产品实验数裂瓶数盐酸川芎嗪含量
本发明实施例5500无102％
本发明实施例6500无100％
本发明实施例7500无101％
本发明实施例8500无98％
本发明实施例9500无102％
对照组15001087％
对照组25002090％
[0192] 实验结果表明，本发明方法解决了现有技术冷冻干燥过程中易出现裂瓶的问题，并且能够有效控制盐酸川芎嗪在冷冻真空干燥过程中挥发量，保持含量稳定。