一种富硒水稻品种的筛选方法[发明专利]

(19)中华人民共和国国家知识产权局
(12)发明专利申请
(10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201810433294.5
(22)申请日 2018.05.08
(71)申请人 江西省农业科学院农产品质量安全
与标准研究所
地址 330200 江西省南昌市南莲路602号
(72)发明人 张标金　史华新　陈庆隆　戴廷灿　
周瑶敏　魏益华　
(74)专利代理机构 北京三聚阳光知识产权代理
有限公司 11250
代理人 李静
(51)Int.Cl.
A01H 1/04(2006.01)
(54)发明名称
一种富硒水稻品种的筛选方法
(57)摘要
本发明属于农业种质资源筛选技术领域，具
体涉及一种富硒水稻品种的筛选方法。

该方法先通过室内培养进行初筛，降低了后续田间筛选试
验的盲目性；以豫南黑籼糯作为对照材料，使得
筛选过程简单易行。

室内筛选过程中使用含硒培
养基，为水稻苗提供均一稳定的硒源，能够大幅
提高品种筛选的准确性，同时在种子发芽生长初
期就开始培养，可主要由种子本身为幼苗提供营
养，培养基配制相对简易，
筛选方法易于应用。

权利要求书1页 说明书5页CN 108739366 A 2018.11.06
C N 108739366
A
1.一种富硒水稻品种的筛选方法，其特征在于，包括以下步骤：
初筛：选择待筛选水稻品种的籽粒饱满、健康的种子，以豫南黑籼糯为对照，催芽，种子露白后播种于含硒培养基中，培养5-8天后，检测叶片中的硒含量，与对照进行比对，筛选出富硒水稻初选品种；
复筛：将富硒水稻初选品种和豫南黑籼糯分别在土壤硒含量低、中等、高的三组田块中进行种植，各组田间水肥管理保持一致，成熟后检测每个品种收获的糙米的硒含量，三组田块中收获糙米的硒含量均高于或等于相应田块豫南黑籼糯糙米的硒含量的水稻品种即为富硒水稻品种。

2.根据权利要求1所述的富硒水稻品种的筛选方法，其特征在于，所述初筛步骤中，种子用70-75％乙醇消毒1-2分钟，再用2-3％次氯酸钠浸种消毒25-35分钟，无菌水冲洗4-5次。

3.根据权利要求1所述的富硒水稻品种的筛选方法，其特征在于，所述初筛步骤中，催芽的温度为28-30℃。

4.根据权利要求1所述的富硒水稻品种的筛选方法，其特征在于，所述含硒培养基包括以下成分：亚硒酸钠0.1-1.5mg/L、黄腐殖酸0.1-1mg/L、琼脂6-8g/L。

5.根据权利要求4所述的富硒水稻品种的筛选方法，其特征在于，其特征在于，所述含硒培养基包括以下成分：亚硒酸钠0.5mg/L、黄腐殖酸0.5mg/L、琼脂7g/L。

6.根据权利要求1所述的富硒水稻品种的筛选方法，其特征在于，所述初筛步骤中培养的条件为：湿度70-90％，白天光照强度100-120μmol/m 2S，光照时间10-12小时，白天温度30-32℃，晚上温度25-27℃。

7.根据权利要求1-6任一项所述的富硒水稻品种的筛选方法，其特征在于，所述复筛步骤中，土壤硒含量低的田块为硒含量＜0.3mg/kg。

8.根据权利要求6所述的富硒水稻品种的筛选方法，其特征在于，所述复筛步骤中，土壤硒含量高的田块为硒含量＞0.7mg/kg。

9.根据权利要求6所述的富硒水稻品种的筛选方法，其特征在于，所述复筛步骤中，土壤硒含量中等的田块硒含量为0.3-0.7mg/kg。

权　利　要　求　书1/1页CN 108739366 A
一种富硒水稻品种的筛选方法
技术领域
[0001]本发明属于农业种质资源筛选技术领域，具体涉及一种富硒水稻品种的筛选方法。

背景技术
[0002]硒(Se)作为生态环境中重要的一种微量元素，具有抗衰老、抗癌和解毒等多种作用，被世界卫生组织和中华医学会定为二十一世纪继碘、锌后必补的第三大微量营养保健元素。

中国预防医学中心卫生所推荐的安全进硒量40-240μg/人/日，调查报告显示，目前成人的硒摄入量约为26.63μg/日，因此还需进一步提高硒摄入量。

[0003]水稻是我国主要粮食作物，通过提高稻米硒含量，从饮食方面增加人体摄硒量是一种比较理想的补硒途径。

水稻属于非聚硒植物类型中含硒量低的种类，但是其累积硒的基因型差异非常明显，如李正文等研究了江苏省几十个水稻品种籽粒对太湖地区乌栅土中的吸收积累，表明籽粒中硒含量极差达3.6倍；而蒋彬对239份水稻种质的硒积累差异研究结果显示，稻米硒含量在1.15-43.84μg/kg之间，不同水稻基因型稻米中硒含量差异极为显著。

因此，筛选和利用富硒水稻种质资源提高稻米硒积累量是可行的。

[0004]例如，中国专利文献CN104871844A，公开了一种水稻品种资源富硒性能的筛选方法，该方法通过以下5个步骤来实现：1)选定鉴定的田块；2)种植鉴定水稻品种材料；3)收获种植的鉴定水稻品种材料；4)检测各个鉴定田块中鉴定水稻品种材料的硒含量；5)分析比较各个鉴定田块中的鉴定水稻品种材料的硒含量，将不同鉴定田块中相同鉴定水稻品种材料的硒含量进行比较，计算出其均值、最大值、最小值；比较硒含量的均值、最大值、最小值，得出结论。

该方法利用田间自然环境进行富硒水稻的筛选，然而自然生产环境比较复杂，很难保证水稻材料种植的完全均一性，其结果的准确性较差；要获得准确鉴定结果只有多年多点筛选，导致周期长，费时费力。

因此，如何能够高效准确的对水稻富硒能力进行鉴定，筛选出高富硒的水稻种质资源目前是一个技术难题。

发明内容
[0005]因此，本发明要解决的技术问题在于克服现有技术中的水稻种质资源筛选过程中准确率不高，周期长的缺陷，从而提供一种富硒水稻品种的筛选方法。

[0006]为解决上述技术问题，本发明采用如下技术方案：
[0007]一种富硒水稻品种的筛选方法，包括以下步骤：
[0008]初筛：选择待筛选水稻品种的籽粒饱满、健康的种子，以豫南黑籼糯为对照，催芽，种子露白后播种于含硒培养基中，培养5-8天后，检测叶片中的硒含量，与对照进行比对，筛选出富硒水稻初选品种；
[0009]复筛：将富硒水稻初选品种和豫南黑籼糯分别在土壤硒含量低、中等、高的三组田块中进行种植，各组田间水肥管理保持一致，成熟后检测每个品种收获的糙米的硒含量，三组田块中收获糙米的硒含量均高于或等于相应田块豫南黑籼糯糙米的硒含量的水稻品种
即为富硒水稻品种。

[0010]进一步地，所述初筛步骤中，种子用70-75％乙醇消毒1-2分钟，再用2-3％次氯酸钠浸种消毒25-35分钟，无菌水冲洗4-5次。

[0011]进一步地，所述初筛步骤中，催芽的温度为28-30℃。

[0012]进一步地，所述含硒培养基包括以下成分：亚硒酸钠0.1-1.5mg/L、黄腐殖酸0.1-1mg/L、琼脂6-8g/L。

[0013]进一步地，其特征在于，所述含硒培养基包括以下成分：亚硒酸钠0.5mg/L、黄腐殖酸0.5mg/L、琼脂7g/L。

[0014]进一步地，所述初筛步骤中培养的条件为：湿度70-90％，白天光照强度100-120μmol/m2S，光照时间10-12小时，白天温度30-32℃，晚上温度25-27℃。

[0015]进一步地，所述复筛步骤中，土壤硒含量低的田块为硒含量＜0.3mg/kg。

[0016]进一步地，所述复筛步骤中，土壤硒含量高的田块为硒含量＞0.7mg/kg。

[0017]进一步地，所述复筛步骤中，土壤硒含量中等的田块硒含量为0.3-0.7mg/kg。

[0018]本发明技术方案，具有如下优点：
[0019] 1.本发明提供的富硒水稻品种的筛选方法，先通过室内培养进行初筛，降低了后续田间筛选试验的盲目性；以豫南黑籼糯作为对照材料，使得筛选过程简单易行；培养过程中使用含硒培养基，为水稻苗提供均一稳定的硒源，能够大幅提高品种筛选的准确性，同时在种子发芽生长初期就开始培养，可主要由种子本身为幼苗提供营养，培养基配制相对简易，筛选方法易于应用；选用土壤硒含量低、中等、高的三组田块中进行田间种植筛选，使得筛选结果更准确。

具体实施方式
[0020]本发明实施例中选用的水稻品种均可从市售途径购买得到。

所用试剂，没有特殊说明的，也均可为市售商品，当然也可通过自行制备得到，不同来源的试剂对本发明的技术方案不会造成实质性的影响。

[0021]实施例1
[0022]本实施例提供一种富硒水稻品种的筛选方法，包括以下具体步骤：
[0023]1)选择待筛选水稻品种的籽粒饱满、健康的黄花占、中早35、IR19735、扬稻6号、乌严粳、湘晚籼12号的种子，以豫南黑籼糯为对照，用70％乙醇消毒2分钟，再用2％次氯酸钠浸种消毒35分钟，无菌水冲洗4次，30℃催芽，种子露白后播种于事先配置了含硒培养基的培养皿中，每个培养皿播100粒。

[0024]其中，含硒培养基由以下成分组成：亚硒酸钠1.5mg/L、黄腐殖酸0.1mg/L、琼脂8g/ L，用无菌蒸馏水配制。

[0025]2)将培养皿置于植物光照培养箱中，湿度70-90％，白天光照强度100-120μmol/ m2S，光照时间10小时，白天温度30-32℃，晚上温度25-27℃。

[0026]3)培养5天，水稻苗生长至二叶期时取出培养皿水稻苗，取下叶片，检测每个品种叶片的硒含量，以豫南黑籼糯为对照，比较各水稻叶片的硒含量，硒含量大于或等于豫南黑籼糯的水稻品种IR19735、乌严粳为富硒水稻初选品种。

[0027]4)将富硒水稻初选品种分别在土壤硒含量低、中、高的三种田块中进行种植，其
中，土壤硒含量低、中、高的三种田块的硒含量分别为0.25mg/kg、0.4mg/kg、0.75mg/kg。

每个品种在同一种田块种植三个小区，小区随机分布，按常规方法肥水管理方法进行田间管理且保持同一田块水肥管理的均一性。

成熟后检测每个品种糙米的硒含量，筛选出三种田块所收获糙米硒含量都高于或等于相应田块豫南黑籼糯糙米的水稻品种IR19735、乌严粳即为富硒水稻品种。

[0028]表1实施例1中各水稻叶片和糙米中的硒含量
[0029]
[0030]实施例2
[0031]本实施例提供一种富硒水稻品种的筛选方法，包括以下具体步骤：
[0032]1)选择待筛选水稻品种的籽粒饱满、健康的巨胚1号、湘晚籼13号、黑帅、明恢63、美香新占、早糯、赣香占的种子，以豫南黑籼糯为对照，用75％乙醇消毒1分钟，再用3％次氯酸钠浸种消毒25分钟，无菌水冲洗5次，28℃催芽，种子露白后播种于事先配置了含硒培养基的培养皿中，每个培养皿播120粒。

[0033]其中，含硒培养基由以下成分组成：亚硒酸钠0.1mg/L、黄腐殖酸1mg/L、琼脂6g/L，用无菌蒸馏水配制。

[0034]2)将培养皿置于植物光照培养箱中，湿度70-90％，白天光照强度100-120μmol/ m2S，光照时间12小时，白天温度30-32℃，晚上温度25-27℃。

[0035]3)培养8天，水稻苗生长至二叶期时取出培养皿水稻苗，取下叶片，检测每个品种叶片的硒含量，以豫南黑籼糯为对照，比较各水稻叶片的硒含量，硒含量大于或等于豫南黑籼糯的水稻品种黑帅、早糯、赣香占为富硒水稻初选品种。

[0036]4)将富硒水稻初选品种分别在土壤硒含量低、中、高的三种田块中进行种植，其中，土壤硒含量低、中、高的三种田块的硒含量分别为0.2mg/kg、0.5mg/kg、0.9mg/kg。

每个品种在同一种田块种植三个小区，小区随机分布，按常规方法肥水管理方法进行田间管理且保持同一田块水肥管理的均一性。

成熟后检测每个品种糙米的硒含量，筛选出三种田块
所收获糙米硒含量都高于或等于相应田块豫南黑籼糯糙米的水稻品种黑帅、早糯即为富硒水稻品种。

[0037]表2实施例2中各水稻叶片和糙米中的硒含量
[0038]
[0039]实施例3
[0040]本实施例提供一种富硒水稻品种的筛选方法，包括以下具体步骤：
[0041]1)选择待筛选水稻品种的籽粒饱满、健康的蜀恢527、R216、黑占96、金泰软占、黑帅、春恢350、赤室的种子，以豫南黑籼糯为对照，用73％乙醇消毒2分钟，再用2.5％次氯酸钠浸种消毒30分钟，无菌水冲洗5次，29℃催芽，种子露白后播种于事先配置了含硒培养基的培养皿中，每个培养皿播110粒。

[0042]其中，含硒培养基由以下成分组成：亚硒酸钠1mg/L、黄腐殖酸0.5mg/L、琼脂7g/L，用无菌蒸馏水配制。

[0043]2)将培养皿置于植物光照培养箱中，湿度70-90％，白天光照强度100-120μmol/ m2S，光照时间11小时，白天温度30-32℃，晚上温度25-27℃。

[0044]3)培养6天，水稻苗生长至二叶期时取出培养皿水稻苗，取下叶片，检测每个品种叶片的硒含量，以豫南黑籼糯为对照，比较各水稻叶片的硒含量，硒含量大于或等于豫南黑籼糯的水稻品种黑占96、黑帅、赤室为富硒水稻初选品种。

[0045]4)将富硒水稻初选品种分别在土壤硒含量低、中、高的三种田块中进行种植，其中，土壤硒含量低、中、高的三种田块的硒含量分别为0.1mg/kg、0.6mg/kg、1.2mg/kg。

每个品种在同一种田块种植三个小区，小区随机分布，按常规方法肥水管理方法进行田间管理且保持同一田块水肥管理的均一性。

成熟后检测每个品种糙米的硒含量，筛选出三种田块所收获糙米硒含量都高于或等于相应田块豫南黑籼糯糙米的水稻品种黑占96、黑帅、赤室
即为富硒水稻品种。

[0046]表3各水稻叶片和糙米中的硒含量
[0047]
[0048]验证试验
[0049]将上述实施例中筛选出的富硒水稻品种，在田间进行种植，每个品种种植三个小区，小区随机分布，按常规方法肥水管理方法进行田间管理且保持同一田块水肥管理的均一性，成熟后检测每个品种糙米的硒含量。

具体结果见表4。

[0050]表4各品种田间种植收获糙米的硒含量
[0051]
[0052]从上表中的数据可知，通过本发明实施例筛选出来的富硒水稻品种，在田间种植实验中，收获糙米的硒含量均高于对照豫南黑籼糯，可见，本发明的技术方案筛选结果准确，并且效率高。

[0053]显然，上述实施例仅仅是为清楚地说明所作的举例，而并非对实施方式的限定。

对于所属领域的普通技术人员来说，在上述说明的基础上还可以做出其它不同形式的变化或变动。

这里无需也无法对所有的实施方式予以穷举。

而由此所引申出的显而易见的变化或变动仍处于本发明创造的保护范围之中。