CKMB定量测定-检验科免疫室作业指导书

CKMB 定量测定

1.原理

抗原或抗体包被的微粒子，是由多孔高分子粒子制成，具有很好的亲水性，悬浮性极佳，微粒子可与玻璃纤维不可逆结合，从而提高了反应的特异性。标本与微粒子以一定比例混合，标本中被检物质与微粒子上包被的抗体进行一定时间的反应，以反应终了后，反应液的一部分被移到玻璃纤维上，洗去未反应的被检物质与其它的不要成份，加入基质液，基质液被碱性磷酸所分解生成 Methylumbelliferone 。当该物受荧光照射后就产生荧光，测定荧光强度的分化率，从而决定被测物质的浓度。

2.标本采集：

2.1标本采集前病人准备：受检者应空腹。

2.2标本种类：血清或血浆。

2.3标本要求：采集血清样本，取被检者静脉血，用无菌取血针抽取病人静脉血 3ml，收集干燥试管中，室温放置不超过 8 小时， 2000 转/分离心 20分钟备用 .采集血浆样本，用无菌取血针取被检者静脉血 3ml ，收集于含有 EDTA作抗凝剂的试管中，室温放置不超过 8 小时， 2000转/分离心20 分钟备用。

3.标本储存：待测样本室温不超过 8 小时， 4-8℃不超过72 小时， -20℃可长期保存，避免反复冻融。

4.标本运输：室温运输。

5.标本拒收标准：细菌污染，严重溶血或脂血标本不能作测定。

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6.试剂：

6.1试剂名称： CK-MB诊断试剂盒。

6.2试剂生产厂家：美国雅培制药有限公司

6.3包装规格： 100Test/kit

6.4试剂盒组成： CK-MB诊断试剂。

6.5试剂储存条件及有效期：试剂盒贮存 2-8℃条件，有效期12 个月。

7.仪器设备

7.1仪器名

称：AXSYM免疫自动分析仪

7.2仪器厂

家：美国雅培公司

7.3仪器型

号：AXSYMTm型

7.4仪器校

准：本仪器校准由厂家工程师负责校准。

8.操作步骤

8.1 样本处理：取待测样本血清或血浆置于样本杯中（不能有纤维

蛋白，不能有气泡）。

8.2仪器准备：检查纤维杯，反应杯数量满足实验需要，废物桶和废液桶是否连接好，仪器的光路是否正常，环境温度是否符合要求，打印机的连接。

8.3试剂准备与检查：从冰箱取 1 号液放入仪器，检查所有试剂和缓冲液量是否足够，是否在有效期内。

8.4定标

8.4.1定标步骤：输入主标正曲线（工厂定标），从MAINMENU 选择 STOREDRESUL，T选S 择 CALIBRATIONREVIE，

W选择 F4-NEWLOT，选择 F4-SCAN用条码阅读器扫主标正曲线或用键盘手工输入条码数据，选择 F6-SAVE储存主标正曲线数据。

8.4.2定标申请：从 MAINMENU中选择 ORDERLIS，T选择

F4-CAL，选择项目 CK-MB，输入样品架位置，输入标准品的批号和有效期，选择 F6-ADD确认，选择 F1-EXIT追回。

8.4.3定标运行：检查试剂盒和消耗品，检查库存，按 RUN 运行。

8.5质控：质控品分高、中、低三种。

8.5.1 质控定义：从 MAINMENU 中选择 CONFIGURATIO，N选择 CONTRO，L 选择 CK-MB 项目，输入质控名（每个质控名带一个质控水平，高、中、低），选择 F2-ADDCONTRO，L选择F6-CONTROLDETAI，LS 选择数据区域（2SD范围），输入质控信息，按ENTER键，选择 F6-SAVE 保存质控信息。

8.5.2质控申请：从 MAINMENU选择 ORDERLIS，T选择 F5-CONTR，L 选择项目 CK-MB，输入样品架位置，选择分析的质控品水平，高、中、低，选择 F6-ADD确认，按 F1 追加MAINMENU.

8.5.3质控运行：检查试剂，消耗和库存，按 RUN键运行。

8.5.4质控浏览

8.5.4.1质控结果浏览：从 MAINMENU选择 STOREDRESUL，T 选S 择 VIEWSTOREDQCRESU，L选TS择浏览 CK-MB质控结果，选择 F6-DETAIL。S

8.5.4.2质控图浏览：从 MAINMENU 选择 LEVERY-JENNINGS，QC选择项目 CK-MB，选择质控水平，选择 F5-GRAPH浏览。

8.5.5 质控要求：所有质控水平必须控制在 2SD范围内。

9.标本检测常规操作：

9.1申请病人样品测试

9.1.1 单个病人样品申请：从 MAINMENU 选择 ORDERLIS，T 选择 F6-PATIEN，T输入样品架位置编号和样品编号，可选择输入病人编号、病人姓名、病人说明等资料。选择 CK-MB 项目，可选择是否急诊项目，选择 F6-ADD确认。

9.1.2样品批处理申请：从 MAINMENUT 选择 ORDERLIS，T 选择 F6-PATIEN，T 选择 F2-BATCH，输入起始样品等的位置，输入起始样品编号，输入测试的样品数，选择项目 CK-MB，选择 F6-ADD确认。

9.2检测结果查看：从 MAINMENU 选择 STOREDRESUL，TS选择PATIENTREPO，RT选择要查看的编号，选择 F6-DETAIL。S

9.3检测结果打印和保存：清单打印和详情单打印，结果硬盘保存，软盘保存，传输到 PC电脑保存。

10.结果计算：利用点对点数据产生方法来产生标准曲线利用率 A 的方法来产生主标准曲线，并根据标准曲线计算最终样品浓度。

11.参考范围： 0-10.4ng/ml

12.临床意义：

12.1CK-MB在心梗后 4-6 小时开始增高， 12-24 小时达高峰，恢复时间是 24-48 小时。

12.2肌营养不良，多发性肌炎，皮肌炎，混合性结缔组织病等可引起 CK-MB 升高。

13.操作性能： FlexibleProtocolTMProcessing技术为免疫检测程序的最优化步骤，此技术被运用于样本处理，试剂处理，吸样处理和分析处理等整个检测过程中，检测程序各步骤被处理或完全独立的分析基元，不同的分析技术，步骤和过程可在同一台仪器上同时进行，使整个分析表现（如灵敏度，特异性，精密度，准确性等）达到最佳状态，同时使分析过程成为真正的随机连读分析步序，达到最快出结果的速度。14.超出范围结果处理：检测样本中 CK-MB值在 300ng/ml 范围内可直接报告，如结果大于 300ng/ml ，可做相应的稀释后重测。

15.方法局限性：检测样本不能溶血，脂血或黄疸血，不同批量试剂不能混用，必须使用原厂试剂。

16.当检验系统（仪器）不能工作时，所采取的补救措施：当检验系统（仪器）不能工作时，可联系厂家代理商，进行紧急维修，如一时不能修好，如别实验室有同类仪器可到别的仪器上测试，如别的实验室无同类仪器，可改用其它方法进行检测（如酶联免疫法）。

17.参考文献：