微生物实验6

科研论文内容P57
标题
摘要
引言 材料与方法 结果 讨论 参考文献
医学微生物学实验 综合性实验一
脓汁和粪便标本中病原菌的检测（六）
药敏实验结果分析 糖发酵、动力实验结果分析 玻片凝集试验
细菌综合性实验总结
实验报告撰写 洗刷
常用器材摆放顺序：电源插座→试管架→酒精灯→ 污物盘。 试管架上器材：按接种针、接种环、油性笔和打火 机的顺序，分别放置在试管架中间两行，靠近电源 插座一侧，使用以后必须放回原处，依次摆整齐。
载玻片1张
痢疾血清，生 理盐水各15ul
粉红色菌苔 与血清混匀
粉红色菌苔 与盐水混匀
安全警告
气溶胶粒径＞100um沉降很快,＜50um在0.4s内扩
本次实验操作，可产生几十个微生物气溶胶颗粒。
散开,＜5um通过呼吸道直接到达肺泡。 Pike博士对实验室感染统计分析结果发现，不明 原因的感染高达82%，大多数是气溶胶在空气中 扩散引起的。 实验时应坐着，在酒精灯半径20厘米范围内操作， 保持安静、有序，尽量少说话、少走动，以免感 染病原菌。
用于细菌的抗原分析、鉴定及分型，也可应用已知 细菌检查未知血清的抗体。 诊断血清与待检测细菌混合→细菌凝集→阳性→报 告：检出××细菌。


玻片凝集试验原理
凝集反应的机制是由于抗原与其相应抗体间
存在着相对应的极性基。极性基的相互吸附， 使抗原外周的水化膜除去，由亲水溶胶变成 憎水溶胶。 电解质具有降低电位的作用，使抗原颗粒间 的排斥力消除，从而产生了凝集现象。
综合性实验一 实验总结
采用平板划线分离法，从浓汁标本中分离出
黄色和白色两种菌落。显微镜下，这两株细 菌均为G+球菌，排列不规则，呈葡萄串状， 是典型的葡萄球菌；结合菌落颜色，这两株 葡萄球菌分别是金黄色葡萄球菌和白色葡萄 球菌。通过血浆凝固酶试验鉴别，金黄色葡 萄球菌是致病菌。
用伊红美蓝平板，从粪便标本分离出紫黑色具有
实验室器材 整齐有序
敏感，对链霉素中度敏感。 G-粉红色和紫黑色细菌对青霉素耐药，对链 霉素敏感。 G+球菌和G-杆菌对广谱抗菌素庆大霉素都敏感。
糖发酵、动力试验结果判断
反应现象 培养基变色无气泡 培养基变色有气泡 培养基不变色 结果描述 分解×糖产酸不产气 分解×糖产酸又产气 不分解×糖 符号 ＋
⊕
－
细菌扩散生长,培基混浊 沿接种线生长,培基清澈透明
常见肠道致病菌的检查程序P48： 粪便 → SS琼脂、伊红美蓝平板培养 → 挑取可疑菌落 ↑ ↓ 血清学鉴定 血、骨髓 → 增菌培养 双糖铁培养基 染色镜检 生化反应
《脓汁和粪便标本中病原菌的检测》
年级专业 学号 姓名


实验目的 实验器材 方法与步骤 结果与讨论。 实验报告以小组的实验结果为基础。 主要是从2种标本获得4种菌的实验结果。 讨论是对实验结果的分析，应客观、严谨，围绕主题，突 出重点。 结论应该明确，脓汁标本检测到什么病原菌？粪便标本检 测到什么病原菌？ 结果不正确也要分析原因。
+/-多数阳性， -/+多数阴性， √不确定。
常见肠道感染细菌主要生化反应特征
葡萄糖 乳糖 半固体（动力） 大肠埃希菌 ⊕ ⊕ + 痢疾志贺菌 + 伤寒沙门菌 + + 霍乱弧菌 +★ + 幽门螺杆菌 不分解糖类 + 变形杆菌 ⊕ + ★产酸能迅速杀死该菌。
细菌生化反应结果分析
标本
脓汁和粪便标本细菌检测结果分析 血浆 痢疾 菌落 形态 葡 乳 半 青 链 庆 凝固酶 血清 黄色 G+球 + + + +
结论 金黄色 葡萄球菌
脓汁 白色 G+球 + + +
白色 葡萄球菌 大肠 埃希菌
福氏 志贺菌
紫黑 G－杆
⊕ ⊕ +
-
+
+
粪便 粉红 G－杆 + + + +
思考题




一项科学实验，不论它的结果多么惊人，只有到它发表 出来时才算完成。因此对科学工作者来说，他不仅必须 “研究”科学，而且必须把科研成果“写”出来。要写 好一篇科学论文，作者必须准确地知道他要写的是什么 以及为什么要这么写。

科学论文是叙述原始研究结果而写成并发表的报告。具 体地说，一篇公认的原始科学论文，必须是首次公布的， 它应提供足够的资料，以使同行们能够： (1)评价观察到的结果； (2)重复实验； (3)评价推理过程，而且原始科学论文还必须能为人 们所接受，基本上可供科学界永久地、不受限制地利 用，要有严密的思维特性、逻辑性、清晰性和准确性。
医学微生物学实验 综合性实验一
脓汁和粪便标本中病原菌的检测（六）
药敏实验结果分析 糖发酵、动力实验结果分析 玻片凝集试验
细菌综合性实验总结
实验报告撰写 洗刷
常用药敏试验纸片判断标准P21
抗菌药物 纸片含药量
抑菌圈直径(mm) 耐药 中度敏感 敏感 ≤28 ≤11 ≤12 12～14 13～14 15～18 13～17 13～16 ≥29 ≥15 ≥15 ≥19 ≥18 ≥17
青霉素G(葡萄球菌) 10单位 链霉素 10微克 庆大霉素 10微克 四环素 30微克 氯霉素 30微克 磺胺 300微克
≤14 ≤12 ≤12
药敏实验结果分析 青霉素 黄色细菌 白色细菌 紫黑细菌 粉红细菌 注：耐药－，中度敏感±，敏感＋。 链霉素 庆大霉素
抗菌素药敏试验纸片法结果
G+金黄色葡萄球菌和白色葡萄球菌对青霉素
细菌有鞭毛 细菌无鞭毛
＋ －
肠道杆菌科各菌属生化反应鉴别表
葡萄糖 埃希菌属 ⊕ 志贺菌属 + 沙门菌属 ⊕/+ 霍乱弧菌 + 变形杆菌属 ⊕ ★ +产酸或阳性， 乳糖 麦芽糖 甘露醇 蔗糖 半固体 ⊕ ⊕ ⊕ √ + √ √ +/- -/+ ⊕ ⊕ + + + + + √ √ + ⊕产酸产气，-阴性，
组号
甲、乙→紫黑 ↓ ①葡萄糖 ②乳糖
半固体
丙、丁→粉红 ↓ ③葡萄糖 ④乳糖
半固体
1
2 3
⊕
4 5 6 7 8 9 10
结果
实结果错误可能性
纯培养时，菌落挑错了。
无菌操作不严格，污染杂菌。 接种时未协调好，接种错误。
玻片凝集试验

在适量电解质存在的情况下，颗粒性抗原(细菌)与 特异性抗体混合，如果比例合适，则出现肉眼可见 的凝集块，称为凝集反应。
如何撰写科研论文P57
不论人们是否完全赞成“要么发表、要么销毁”
的格言，但毫无疑问，科学研究的目的就是要把 研究成果发表出来。一般来说，评价科学工作者 的工作，主要不是看他们在实验室内灵巧的操作， 也不是看他们在广阔或狭窄的科学领域内掌握知 识的多少，也不是看他们的智能或魅力，而主要 是根据他们所发表的文章来估量。他们可能由此 而成名，或仍然默默无闻。因此，写出能充分展 示自己工作、引起同行注意的论文是一个科研工 作者必备的素质。
如果细菌生化反应结果不佳，原因何在? 报告纸片法药敏试验结果，是否符合你所鉴 定的细菌的药敏特性? 玻片凝集试验观察完毕，应将载玻片立即放 入消毒缸内，为什么? 怎么设计一个实验，对伤寒沙门菌进行分离 和鉴定?
常见病原性球菌的检查程序P47：
直接涂片、革兰染色、镜检 脓汁、痰、咽部分泌物 观察菌落性状、溶血性、色素 血琼脂平板培养 涂片染色镜检 挑取可疑菌落 生化反应 ↑ 纯培养 动物实验 药敏实验 血液、穿刺液 → 肉汤增菌培养 → 培养液涂片染色境检
玻片凝集反wenku.baidu.com实验步骤
取洁净干燥的载片一片，分试验与对照区。
滴加生理盐水15ul，置于对照区中心；滴加诊断
血清15ul，置于试验区中心。 用接种环取菌苔，分别研磨乳化于盐水或血清内， 混合均匀。 将玻片反复摆动、充分混匀，凝集速度更快、结 果更清楚。 观察是否有凝集块出现，如有则记为阳性，没有 则记为阴性。
金属光泽的菌落和粉红色半透明菌落。紫黑色菌 落是能分解乳糖的大肠埃希菌。粉红色菌落是不 能分解乳糖的致病菌。显微镜下，它们都是G-杆 菌，散在排列，从形态上不能鉴别是什么细菌。 经糖发酵试验，半固体动力试验，血清学试验结 果鉴定，它们分别是大肠埃希菌和痢疾志贺菌。 金黄色葡萄球菌和痢疾志贺菌，这两株致病菌分 别做了药敏试验，G+的金黄色葡萄球菌对青霉素 敏感，G-的痢疾杆菌对链霉素敏感；庆大霉素对 G+和G-菌都敏感。