生物高中选修课件专题动物细胞融合与单克隆抗体

电融合法
在高压电场作用下，使动 物细胞膜发生可逆性击穿 ，从而促进细胞融合。
融合细胞筛选与鉴定
筛选方法
通过选择性培养基、荧光标记、免疫学方法等筛选融合细胞。
鉴定方法
利用PCR、Southern blot、Western blot等技术对融合细胞的基因组、转录组 和蛋白质组进行鉴定，确认其身份和特性。同时，还可以通过观察细胞形态、检 测细胞生长曲线和代谢活性等方法对融合细胞进行生物学特性的鉴定。
意义
细胞融合技术可用于生产杂交瘤细胞 、制备单克隆抗体、研究细胞分化和 发育机制等，在医学、生物学和生物 工程等领域具有广泛应用价值。
动物细胞融合方法
01
02
03
病毒诱导法
利用病毒作为融合剂，将 动物细胞融合在一起。常 用的病毒有仙台病毒、疱 疹病毒等。
化学法
使用化学物质如聚乙二醇 （PEG）等作为融合剂， 诱导动物细胞融合。
即B细胞表面的抗体，用于 识别并结合特异性抗原。
B细胞功能
参与体液免疫应答，分泌 抗体清除抗原。
杂交瘤技术原理
细胞融合技术
01
将B细胞与骨髓瘤细胞融合，形成杂交瘤细胞。
杂交瘤细胞特点
02
既具有B细胞分泌特异性抗体的能力，又具有骨髓瘤细胞无限增
殖的特性。
单克隆抗体筛选与培养
03
通过筛选获得单一抗原特异性的杂交瘤细胞株，进行大规模培
药物研发
单克隆抗体可以作为药物研发 的靶点或载体，用于开发新的 治疗药物或疫苗。
生物医学研究
单克隆抗体可用于研究生物分 子的结构和功能，揭示生命活
动的本质和规律。
05 动物细胞融合与 单克隆抗体技术 挑战及前景
技术挑战及解决方法
01
细胞融合效率低
动物细胞融合过程中，由于细胞间的差异和排斥反应，导致融合效率低
细胞融合操作步骤
细胞预处理
将骨髓瘤细胞和脾细胞分别进行 预处理，如去除培养基、洗涤细
胞等。
融合剂处理
将预处理后的细胞与融合剂混合 ，处理一定时间，使细胞发生融
合。
融合后处理
去除融合剂，将融合后的细胞培 养在适当的培养基中，观察细胞
生长情况。
融合效果检测及评价
形态学观察
观察融合后细胞的形态 变化，如出现双核或多
核细胞等。
生长特性检测
检测融合后细胞的生长 速度、倍增时间等生长
特性。
染色体检测
对融合后细胞进行染色 体检测，分析染色体的
数量和形态变化。
抗体检测
检测融合后细胞是否产 生预期的抗体，如单克
隆抗体等。
04 单克隆抗体生产 与应用
杂交瘤细胞培养与筛选
杂交瘤细胞培养
将小鼠骨髓瘤细胞与免疫B细胞融合，形成杂交瘤细胞，在选择 性培养基中进行培养。
低抗体的免疫原性、开发人源化抗体以及采用免疫耐受技术等。
领域前沿动态介绍
细胞融合新技术
近年来，研究者们开发了一系列新的细胞融合技术，如微流控芯片技术、光遗传学技术等 ，这些技术具有更高的融合效率和更好的可控性。
单克隆抗体人源化
为了降低单克隆抗体的免疫原性，研究者们正在致力于开发人源化抗体技术，即利用基因 工程技术将抗体的恒定区替换为人源序列，从而降低抗体的免疫原性。
养制备单克隆抗体。
03 动物细胞融合实 验设计
实验材料准备
细胞株选择
选择生长状态良好、融合率高的 细胞株，如小鼠骨髓瘤细胞和脾
细胞。
培养基准备
准备适合细胞生长的培养基，如 RPMI-1640培养基，并添加必要 的生长因子和抗生素。
融合剂准备
常用的融合剂有聚乙二醇（PEG） 、灭活的病毒等，需根据实验需求 选择适当的融合剂。
抗体生产
将单克隆杂交瘤细胞进行扩大培 养，并收集上清液中的抗体。
免疫原制备
选择合适的抗原免疫小鼠，制备 免疫原。
抗体wk.baidu.com化
通过蛋白A或蛋白G亲和层析等方 法对抗体进行纯化。
单克隆抗体在医学领域应用
疾病诊断
单克隆抗体具有高特异性和高 灵敏度的特点，可用于疾病的
早期诊断和鉴别诊断。
免疫治疗
单克隆抗体可以针对肿瘤细胞 或病原体表面的特异性抗原进 行治疗，具有疗效显著、副作 用小的优点。
杂交瘤细胞筛选
通过HAT培养基筛选，去除未融合的细胞和自身融合的细胞，获 得能产生特异性抗体的杂交瘤细胞。
克隆化培养
将筛选得到的杂交瘤细胞进行克隆化培养，以获得单克隆抗体。
单克隆抗体生产流程
细胞融合
将小鼠骨髓瘤细胞与免疫B细胞融 合，形成杂交瘤细胞。
杂交瘤细胞筛选与克隆化
通过HAT培养基筛选和克隆化培 养，获得能产生特异性抗体的单 克隆杂交瘤细胞。
生物高中选修课件专题动物 细胞融合与单克隆抗体
汇报人：XX 20XX-01-29
目录
• 动物细胞融合概述 • 单克隆抗体技术基础 • 动物细胞融合实验设计 • 单克隆抗体生产与应用 • 动物细胞融合与单克隆抗体技术挑战及前
景
01 动物细胞融合概 述
细胞融合定义与意义
定义
细胞融合是指两个或多个细胞在特定 条件下融合形成一个细胞的过程。
随着精准医疗的发展，未来单克隆抗体药物将更加注重个性化治疗，即根据患者的基因 型和疾病特征定制个性化的治疗方案。
单克隆抗体与其他治疗手段的联合应用
未来，单克隆抗体将与其他治疗手段如化疗、放疗、基因治疗等联合应用，形成综合治 疗方案，提高治疗效果和患者生存率。
THANKS
感谢观看
下。解决方法包括优化融合条件、选择合适的融合剂以及利用基因工程
技术改造细胞等。
02
抗体产量不稳定
单克隆抗体生产过程中，抗体产量容易受到多种因素的影响，如细胞状
态、培养基成分等。解决方法包括优化细胞培养条件、改进抗体表达系
统以及采用高通量筛选技术等。
03
免疫原性问题
单克隆抗体作为异源蛋白，可能引发机体的免疫反应。解决方法包括降
单克隆抗体药物研发
随着单克隆抗体技术的不断发展，越来越多的单克隆抗体药物被研发出来并应用于临床治 疗，如肿瘤免疫治疗、自身免疫性疾病治疗等。
未来发展趋势预测
细胞融合技术的进一步优化
未来，随着细胞生物学和生物工程学的发展，细胞融合技术将得到进一步优化和改进， 提高融合效率和可控性。
单克隆抗体药物的个性化治疗
02 单克隆抗体技术 基础
抗体结构与功能
抗体基本结构
由两条重链和两条轻链组成，形成 “Y”字形结构。
抗体与抗原结合
通过可变区与抗原表位结合，发挥免 疫效应。
抗体功能区域
包括可变区和恒定区，可变区决定抗 体的特异性。
B淋巴细胞特点
B细胞起源与分化
起源于骨髓，经历多个分 化阶段成为成熟B细胞。
B细胞受体