大赛璐手性柱使用注意事项

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Part. 1-5
正相柱的冲洗与保存
实验完成后：如流动相中有酸性或碱性添加剂，先用不加添加剂的同 比例流动相冲洗柱子（20倍柱体积），再用出厂保存溶剂冲洗保存（ 20倍柱体积）。比如ADH柱实验用的流动相是正己烷：乙醇：二乙 胺=70:30:0.1，用完了以后先用正己烷：乙醇=70:30冲洗，最后用正 己烷：异丙醇=90:10冲洗保存。 柱子被污染：按照大赛璐《多糖涂覆型手性柱（正相流动相）冲洗方 法》进行冲洗 注意：醇的黏度大，注意冲洗时的流速； AYH不可以用100%异丙醇冲洗，否则柱效会下降，但这种损 伤是可修复的，用乙醇将异丙醇从柱子中置换出来即可恢复柱效。
B.仪器当前流动相中含有一些会破坏柱子的溶剂（如乙酸乙酯、二氯甲烷和四氢呋喃等） ，仪器先不接柱子，接上两通
1. 用异丙醇或乙醇冲洗所有管路 （至少60ml） -> 置换掉对柱子有损伤的溶剂 2. 用实验所需流动相冲洗所有管路（约30ml） -> 置换醇 C.仪器当前流动相是传统的非水流动相（如正己烷、异丙醇和乙醇），仪器先不接柱子， 接上两通，直接用实验所需流动相冲洗所有管路（约30ml）即可
CHIRALPAK® AD-3/AD-H/AD CHIRALPAK® AS-3/AS-H/AS CHIRALPAK® AY-3/AY-H CHIRALPAK® AZ-3/AZ-H CHIRALCEL® OD-3/OD-H/OD CHIRALCEL® OJ-3/OJ-H/OJ CHIRALCEL® OZ-3/OZ-H CHIRALCEL® OX-3/OX-H CHIRALCEL® OB-H/OB CHIRALCEL® OC-H/OC CHIRALCEL® OA CHIRALCEL® OG CHIRALCEL® OF CHIRALCEL® OK
Reverse Phase
CHIRALPAK® AD-3R/AD-RH CHIRALPAK® AS-3R/AS-RH CHIRALPAK® AY-3R/AY-RH CHIRALPAK® AZ-3R/AZ-RH CHIRALCEL® OD-3R/ODRH/OD-R CHIRALCEL® OJ-3R/OJ-RH CHIRALCEL® OZ-3R/OZ-RH CHIRALCEL® OX-3R/OX-RH
CHIRALFLASH® IA CHIRALFLASH® IC CHIRALFLASH® ID
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Part. 2-1
使用注意事项
pH： -pH范围 2-9 -当缓冲液pH=9.0时，推荐使用碳酸氢铵或硼酸钠缓冲液 温度: -温度范围 5-40℃，常用温度25℃，当缓冲液的pH大于7.0时，应在 5-25℃温度内使用
CHIRALPAK® AD-3/AD-H/AD CHIRALPAK® AS-3/AS-H/AS CHIRALPAK® AY-3/AY-H CHIRALPAK® AZ-3/AZ-H CHIRALCEL® OD-3/OD-H/OD CHIRALCEL® OJ-3/OJ-H/OJ CHIRALCEL® OZ-3/OZ-H CHIRALCEL® OX-3/OX-H CHIRALCEL® OB-H/OB CHIRALCEL® OC-H/OC CHIRALCEL® OA CHIRALCEL® OG CHIRALCEL® OF CHIRALCEL® OK
多糖键合型手性柱使用的是典型的烷烃醇体系参考前面多糖涂覆型正相手性柱的溶剂切换ac两种情况使用的是非传统正相流动相体系如不同的正相体系间不互溶选择与两种体系互溶性好的溶剂作过渡溶剂如之前体系是正己烷乙醇体系要使用甲基叔丁基醚甲醇体系可用甲基叔丁基醚乙醇作过渡溶剂
大赛璐手性柱使用注意事项
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内容
1. 2. 3. 4. 5. 6. 多糖涂覆型正相手性柱 多糖涂覆型反相手性柱 多糖键合型手性柱 蛋白质键合型手性柱 其他类型手性柱 异常修复
CROWNPAK® CR(+)/CR(-) CROWNPAK® CR-I(+)/CR-I(-) CHIRALPAK® QN-AX/QD-AX CHIRALPAK® WH/MA(+) CHIRALPAK® OP(+)/OT(+) CHIRALPAK® ZWIX(+)/(-)
Medium Pressure
进样阀与柱子之间 检测器 泵与进样阀之间 进样阀清洗液
定量环 所有溶剂入口
泵
柱子与检测器之间
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Part. 1-1
多糖涂覆型正相手性柱的溶剂切换
A.仪器当前流动相是水相流动相（如水/缓冲液-乙腈/甲醇等），仪器先不接柱子，接上两通 1. 用水冲洗仪器所有管路（至少60ml） -> 除去有机相和缓冲盐溶液 2. 用异丙醇或乙醇冲洗所有管路 （至少60ml） -> 置换水 3. 用实验所需流动相冲洗所有管路（约30ml） -> 置换醇
柱子被污染：按照大赛璐《多糖涂覆型手性柱（反相流动相）冲洗方 法》进行冲洗
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3.多糖键合型手性柱
Immobilized Type (iCHIRAL-6)
CHIRALPAK® CHIRALPAK® CHIRALPAK® CHIRALPAK® CHIRALPAK® CHIRALPAK® IA/IA-3 IB/IB-3 IC/IC-3 ID/ID-3 IE/IE-3 IF/IF-3
Protein-based
CHIRALPAK® AGP CHIRALPAK® HSA CHIRALPAK® CBH
Special
Reverse Phase
CHIRALPAK® AD-3R/AD-RH CHIRALPAK® AS-3R/AS-RH CHIRALPAK® AY-3R/AY-RH CHIRALPAK® AZ-3R/AZ-RH CHIRALCEL® OD-3R/ODRH/OD-R CHIRALCEL® OJ-3R/OJ-RH CHIRALCEL® OZ-3R/OZ-RH CHIRALCEL® OX-3R/OX-RH

若您遇到此类分析故障，请对照出厂报告重新确认柱子的性能或与大赛璐联系。
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Part. 1-3
常见使用故障—柱压
长期超压会引起柱头塌陷，反压上升，柱效下降 • 原因：
–流动相或样品溶液过滤不彻底，固体颗粒堵塞管路或柱头，会引起柱压过高。 –样品中成分在柱头析出或强烈吸附，会引起柱压升高。 –流速过快，会引起柱压过高，特别是当使用粘度高的溶剂（如IPA, EtOH，流速 应控制在0.1-0.3 ml/min）
CROWNPAK® CR(+)/CR(-) CROWNPAK® CR-I(+)/CR-I(-) CHIRALPAK® QN-AX/QD-AX CHIRALPAK® WH/MA(+) CHIRALPAK® OP(+)/OT(+) CHIRALPAK® ZWIX(+)/(-)
Medium Pressure
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Part. 1-2
常见使用故障—溶剂错误
涂覆型手性柱，当流动相或样品导入错误的溶剂(二氯甲烷、乙酸乙 酯、四氢呋喃、甲苯等)，柱子会马上被破坏，柱压剧增，分离突然 变差，重新恢复柱子性能的可能性很低。 正相手性柱，流动相和样品溶液不能使用水溶液，若不小心导入微 量水，柱子可能不会彻底受损，可以尝试用100%无水乙醇低流速将 水置换出来。
Protein-based
CHIRALPAK® AGP CHIRALPAK® HSA CHIRALPAK® CBH
Special
Reverse Phase
CHIRALPAK® AD-3R/AD-RH CHIRALPAK® AS-3R/AS-RH CHIRALPAK® AY-3R/AY-RH CHIRALPAK® AZ-3R/AZ-RH CHIRALCEL® OD-3R/ODRH/OD-R CHIRALCEL® OJ-3R/OJ-RH CHIRALCEL® OZ-3R/OZ-RH CHIRALCEL® OX-3R/OX-RH
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Part. 1-6
几个常见问题
Q1：甲醇、乙腈能不能用作流动相？ 可用100%甲醇或乙腈作流动相，但必须用异丙醇或乙醇完全置换掉 正己烷才可以。 Q2：手性柱可以倒接使用吗？ 只有在柱子出现问题后，正接冲洗无效，可考虑倒接冲洗；一直按 箭头方向使用有利于柱子的稳定性。 Q3：样品可以直接用甲醇溶解进样吗？ 对烷烃溶解度差的样品，可用醇先溶解，再用流动相稀释；如析出， 建议用键合型手性柱或反相手性柱分析。
Normal Phase
CHIRALPAK® AD-3/AD-H/AD CHIRALPAK® AS-3/AS-H/AS CHIRALPAK® AY-3/AY-H CHIRALPAK® AZ-3/AZ-H CHIRALCEL® OD-3/OD-H/OD CHIRALCEL® OJ-3/OJ-H/OJ CHIRALCEL® OZ-3/OZ-H CHIRALCEL® OX-3/OX-H CHIRALCEL® OB-H/OB CHIRALCEL® OC-H/OC CHIRALCEL® OA CHIRALCEL® OG CHIRALCEL® OF CHIRALCEL® OK
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2.多糖涂覆型反相手性柱
Immobilized Type
CHIRALPAK® CHIRALPAK® CHIRALPAK® CHIRALPAK® CHIRALPAK® CHIRALPAK® IA/IA-3 IB/IB-3 IC/IC-3 ID/ID-3 IE/IE-3 IF/IF-3
Normal Phase
流动相比例： -水相比例不能高于90% -当水相是高浓度缓冲盐溶液时，注意有机相的比例，防止有机相比 例过高导致盐析出
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Part. 2-2
反相柱的冲洗与保存
实验完成后：如流动相中有缓冲盐，先用纯水替换缓冲盐以和流动相 同比例的有机相一起冲洗柱子，置换出盐，再用出厂保存溶剂冲洗保 存。如OD-RH柱实验流动相是10mM乙酸铵溶液：甲醇=80:20，使 用完后先用水：甲醇=80:20冲洗，再用水：乙腈=60:40冲洗保存。
Normal Phase
CHIRALPAK® AD-3/AD-H/AD CHIRALPAK® AS-3/AS-H/AS CHIRALPAK® AY-3/AY-H CHIRALPAK® AZ-3/AZ-H CHIRALCEL® OD-3/OD-H/OD CHIRALCEL® OJ-3/OJ-H/OJ CHIRALCEL® OZ-3/OZ-H CHIRALCEL® OX-3/OX-H CHIRALCEL® OB-H/OB CHIRALCEL® OC-H/OC CHIRALCEL® OA CHIRALCEL® OG CHIRALCEL® OF CHIRALCEL® OK
Protein-based
CHIRALPAK® AGP CHIRALPAK® HSA CHIRALPAK® CBH
Special
CROWNPAK® CR(+)/CR(-) CROWNPAK® CR-I(+)/CR-I(-) CHIRALPAK® QN-AX/QD-AX CHIRALPAK® WH/MA(+) CHIRALPAK® OP(+)/OT(+) CHIRALPAK® ZWIX(+)/(-)
CHIRALFLASH® IA CHIRALFLASH® IC CHIRALFLASH® ID
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Part. 1-1
多糖涂覆型正相手性柱的溶剂切换
请在连接色谱柱前，按下述要点彻底做好溶剂切换 根据HPLC系统中不同的流动相，采用不同的冲洗方法清洗所有管路 ，示意图如下（注意放在溶剂瓶中的吸滤头部分）
Medium Pressure
CHIRALFLASH® IA CHIRALFLASH® IC CHIRALFLASH® ID
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1.多糖涂覆型正相手性柱
Immobilized Type
CHIRALPAK® CHIRALPAK® CHIRALPAK® CHIRALPAK® CHIRALPAK® CHIRALPAK® IA/IA-3 IB/IB-3 IC/IC-3 ID/ID-3 IE/IE-3 IF/IF-3
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Daicel 手性色谱柱一览表
Immobilized Type
CHIRALPAK® IA/IA-3 CHIRALPAK® IB/IB-3 CHIRALPAK® IC/IC-3 CHIRALPAK® ID/ID-3 CHIRALPAK® IE/IE-3 CHIRALPAK® IF/IF-3
Normal Phase
• 解决方法：
– 样品预处理 – 更换流动相时，或者刚把柱子刚接上仪器的时候，逐步增加流速 – 仪器设定保护柱压， 在使用中，10μm柱低于pa，5μm柱低于5Mpa， 3μm柱低于8Mpa可延长柱子使用寿命
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Part. 1-4
常见使用故障—“残留效应”
残留物在普通流动相中可长时间地稳定保留 • 解决方案: – 用醇洗涤可除去大部分的碱性残留物 – 用酸洗涤也可除去碱性残留物 – 用碱洗涤可除去酸性残留物