广西产石韦和柔软石韦抗炎镇痛作用研究

广西产石韦和柔软石韦抗炎镇痛作用研究
阮公梁;王柳萍;钟霞军;黄瑀莘;杨斌
【摘要】目的:比较广西产石韦和柔软石韦的抗炎镇痛疗效.方法:雄性昆明种小鼠
80只,随机分为8组:模型组(蒸馏水),阳性对照组(地塞米松0.01 mg/kg),石韦及柔软石韦给药高(40 g生药/kg)、中(20 g生药/kg)、低(10 g生药/kg)剂量组,每组
10只,各组小鼠灌胃给药,每天1次,连续7d,于末次给药后30 min,采用巴豆油混合物致小鼠耳廓肿胀及对角叉菜胶致足趾肿胀方法,观察石韦和柔软石韦对小鼠耳廓
肿胀及对角叉菜胶致足趾肿胀的影响;雌性及雌雄并用昆明种小鼠80只,随机分为8组:空白对照组(蒸馏水)、阳性对照组(阿司匹林0.2 g/kg),石韦及柔软石韦给药高、中、低剂量组,给药方法同上,于末次给药后30 min,采用小鼠热板试验和醋酸扭体
试验方法,观察石韦和柔软石韦对小鼠热板痛阈和扭体次数的影响.结果:与模型组比较,石韦和柔软石韦高、中剂量组均可明显减轻小鼠耳廓肿胀度和足趾肿胀度(P＜0.01或P＜0.05).石韦和柔软石韦比较,石韦高、中剂量组明显减轻足趾肿胀度(P＜0.01),石韦中剂量组明显减轻小鼠耳廓肿胀度(P＜0.05);与空白对照组比较,石韦和
柔软石韦高、中剂量组的痛阈值和痛阈提高百分率均有明显的提高(P ＜0.01或P
＜0.05),石韦和柔软石韦高、中、低剂量组明显减少小鼠扭体次数(P ＜0.01或P＜0.05).石韦和柔软石韦比较,石韦高、中剂量组明显提高小鼠热板痛阈值(P ＜0.01),石韦和柔软石韦对小鼠扭体次数无明显差异(P＞0.05).结论:石韦和柔软石韦均有明显的抗炎镇痛作用,石韦的抗炎镇痛作用强于柔软石韦.
【期刊名称】《广西医科大学学报》
【年(卷),期】2015(032)002
【总页数】4页(P182-185)
【关键词】石韦;柔软石韦;抗炎;镇痛
【作者】阮公梁;王柳萍;钟霞军;黄瑀莘;杨斌
【作者单位】广西医科大学药学院南宁 530021;广西中医药大学南宁530023;广西中医药大学南宁530023;广西医科大学药学院南宁 530021;广西医科大学药学院南宁 530021
【正文语种】中文
【中图分类】R-332
石韦属(Pyrrosia)植物是蕨类植物水龙骨科(Polypodiaceae)多年生常绿附生草本
植物，2010年版《中国药典》收载的石韦药材为水龙骨科植物庐山石韦Pyrrosio,sheareri(Bak.)Ching、石韦Pyrrosialingua(Thunb.)Farwell、有柄石韦Pyrrosiapetiolosa(Christ)Ching昀干燥叶。

在广西药材市场上常售的有石韦和柔软石韦，其中柔软石韦药典中并无收载，但两者在临床上常混用，用于治疗尿路感染，热淋，血淋，石淋，小便不通，淋沥涩痛，尿血，崩漏，肺热喘咳，尿路结石，颈淋巴结核，咳嗽及外伤出血等症[1，2]。

因此，比较广西产石韦和柔软石韦的药理作用，对指导临床合理使用这两种药材具有重要的现实意义。

1.1 动物：昆明种小鼠，雌雄兼用，体重(20±2)g，广西医科大学实验动物中心
提供，合格证号：2009-0002。

实验过程中依照动物伦理学要求进行，实验结束后，所有动物采用脊椎脱臼法处死。

1.2 药材：石韦和柔软石韦药材均采购于广西玉林市中药材专业市场，经广西中
医药大学廖月葵高级实验师鉴定，样品1为水龙骨科植物石韦
Pyrrosialingua(Thunb.)Farwell，样品2为水龙骨科植物柔软石韦Pyrrosiamollis(Kune)Ching)。

1.3 仪器：鼠耳打孔器，微量天平，SI-93自动双重纯水蒸馏器，数控超声波清
洗器KQ-500DB,水浴锅，智能热板仪等。

1.4 实验方法
1.4.1 受试物的制备：石韦及柔软石韦，每份称500 g药材粉末，用10倍量蒸
馏水浸渍过夜，超声30 min后过滤，滤渣用10倍量蒸馏水浸渍，超声30 min，过滤，滤渣用5倍量蒸馏水浸渍，超声30 min，过滤，合并3次滤液。

于水浴锅浓缩，温度维持在80 ℃，浓缩至250 mL，即2 g生药/mL，置冰箱储存。

1.4.2 抗炎实验
1.4.
2.1 受试物对巴豆油混合液致小鼠耳廓肿胀的影响[3]：体重为18～22 g雄
性昆明小鼠80只，随机分为8组，模型组(蒸馏水)，阳性对照组(地塞米松0.01
g/kg)，石韦及柔软石韦给药高(40 g生药/kg)、中(20 g生药/kg)、低(10 g生药/kg)剂量组，每组10只。

各组小鼠灌胃给药，每天1次，连续7 d，于末次给药
后30 min，右耳正反两面均匀涂予50 μL巴豆油混合液致炎，左耳不做任何处理，4 h后处死小鼠，剪下双耳用8 mm直径打孔器分别在同一部位打下圆耳片，天
平称重。

每鼠右耳重减去左耳重即为肿胀度。

1.4.
2.2 受试物对角叉菜胶致小鼠足趾肿胀的影响[3]：体重为18～22 g雄性昆
明小鼠80只，给药及分组同上，连续灌胃7 d，于末次给药30 min后，在每鼠
右足注射1%角叉菜胶30 μL，左足不做任何处理。

6 h后处死小鼠，沿踝关节剪
下左右足，天平称重，每鼠右足重减去左足重即为肿胀度。

1.4.3 镇痛实验
1.4.3.1 受试物对小鼠热板痛阈的影响[4]：将智能热板仪加热至(50.0±0.5) ℃。

选用雌性小鼠，依次将小鼠放在热板仪上，测定每鼠的痛阈(即痛反应潜伏期，指
小鼠从足接触热板到舔足所用的时间)。

选择痛反应潜伏期在5～30 s的小鼠为合
格鼠，剔除过敏(<5 s)或反应迟钝(>30 s)的个体。

24 h后进行实验，取合格小鼠
80只，随机分为8组，即空白对照组(蒸馏水)、阳性对照组(阿司匹林0.2 g/kg)、石韦及柔软石韦给药高、中、低剂量组，每组10只小鼠。

将小鼠置于(50.0±0.5) ℃的热板上，首先测定各组的基础痛阈，给药前测两次(间隔10 min)，取其平均值，连续灌胃给药7 d，每天1次，末次给药后30,60,90 min测定各鼠出现舔后足的
潜伏期。

超过60 s无反应者，痛阈按60 s计。

痛阈提高的百分率=(给药后的痛阈-基础痛阈)/基础痛阈×100%。

1.4.3.2 受试物对醋酸致小鼠扭体反应的影响[4]:取80只小鼠，雌雄兼用，随机
分为8个组，即空白对照组(蒸馏水)、阳性对照组(阿司匹林0.2 g/kg)、石韦及柔软石韦给药高、中、低剂量组，每组10只小鼠。

连续灌胃7 d，于末次给药后30 min，进行实验，每组小鼠均腹腔注射0.6%的醋酸0.2 mL，记录各组小鼠的扭体潜伏期(即从注射醋酸至扭体的时间)及在15 min内扭体的次数，若15 min内未
扭体，潜伏期按15 min记录。

抑制率=(蒸馏水组扭体均数-给药组扭体均数)/蒸
馏水组扭体均数×100%。

1.4.4 统计学方法：采用SPSS16.0软件对数据进行统计学处理。

检测结果以均
数±标准差±s)表示，多个样本均数比较采用单因素方差分析，以P<0.05为差异
具有统计学意义。

2.1 两种受试物的抗炎作用
2.1.1 石韦和柔软石韦受试物对巴豆油混合液致小鼠耳廓肿胀的影响：与模型组
比较，石韦和柔软石韦高、中剂量组均有显著差异(P<0.01或P<0.05)；石韦和柔软石韦各剂量组比较，石韦中剂量组与柔软石韦中剂量组有显著差异(P<0.05)，
结果表明两种受试物对巴豆油混合液致小鼠耳廓肿胀均有明显的抑制作用，尤以石韦受试物明显，见表1。

2.1.2 石韦和柔软石韦受试物对角叉菜胶致小鼠足趾肿胀的影响：与模型组比较，石韦和柔软石韦高、中剂量组均有显著差异(P<0.01)；石韦和柔软石韦各剂量组
比较，石韦高、中剂量组与柔软石韦高、中剂量组有显著差异(P<0.01)，结果表
明两种受试物对角叉菜胶致小鼠足趾肿胀有明显的抑制作用，石韦受试物比柔软石韦受试物作用更强，见表2。

2.2 两种受试物的镇痛作用
2.2.1 石韦和柔软石韦受试物对热板法小鼠痛阈的影响：与空白对照组相比，给
药后30，60，90 min，两种受试物各剂量给药组的痛阈值和痛阈提高百分率均有不同程度的提高。

给药后30 min除柔软石韦低剂量组痛阈值没有提高外，其余各组均有提高，小鼠的舔足时间均延长，差异有统计学意义(P<0.01)；给药后60 min除柔软石韦中、低剂量组外，其余各剂量组小鼠的舔足时间均延长，差异有
统计学意义(P<0.01或P<0.05)。

给药后90 min除低剂量组外，其余各组小鼠的舔足时间均延长，差异有统计学意义(P<0.01)。

石韦和柔软石韦各剂量组比较，
石韦高、中剂量组与柔软石韦高、中剂量组有显著差异(P<0.01)。

结果表明两种
受试物有明显的镇痛作用，而且石韦镇痛作用比柔软石韦强，见表3。

2.2.2 石韦和柔软石韦受试物对醋酸致小鼠扭体反应的影响：与空白对照组比较，石韦和柔软石韦受试物高、中、低剂量组差异均有统计学意义(P<0.01或P<0.05)；石韦和柔软石韦受试物比较，差异无统计学意义(P>0.05)。

结果表明石韦和柔软
石韦受试物均可抑制醋酸所致小鼠扭体反应，具有明显的镇痛作用，见表4。

炎症是常见的临床症状。

在药理研究中，常通过对实验动物人为地实施某种干扰(如给予物理性、化学性或生物性等刺激)来模拟人类性疾病的发生、发展和处理。

但炎症过程是一个相当复杂的病理、生理过程，要制备比较完善的动物模型是相当困难的。

目前对某个药物的抗炎药理研究，主要是依据该药物在多种炎症模型中所表现的功效来综合地加用观察、分析和评价。

本实验采用的巴豆油混合物致小鼠耳廓肿胀及角叉菜胶诱发小鼠足肿胀是最常用的急性炎症模型，主要表现为局部的充血水肿及渗出等病理反应过程。

巴豆油混合物致小鼠耳廓肿胀法，不需特殊仪器，
简便易行，对两大类抗炎药物均敏感，适用于抗炎药物的筛选；角叉菜胶诱发小鼠足肿胀法是应用最广泛的炎症水肿模型，具有差异小、敏感和重复率高等特点，但特异性较低，不少非抗炎药也有效。

该实验结果表明，除了石韦和柔软石韦受试物低剂量组与模型组相比差异无统计学意义外，其余高、中剂量组对巴豆油混合物致小鼠耳廓肿胀及角叉菜胶诱发小鼠足肿胀均表现出较强的抑制作用，且石韦受试物的抑制作用比柔软石韦受试物强。

疼痛是一个极为复杂的动态过程，涉及多靶标相互作用的神经传导、神经调节系统，痛觉模型可根据致痛原因分为：物理性疼痛模型(热、机械、电、冷、光)、化学性疼痛模型(酸碱、有毒气体、药物或生物毒素)。

本实验采用的热刺激法是通过热刺激足部的感觉神经末梢致痛，类似于急性锐痛；醋酸扭体法是通过化学刺激致痛，类似于炎性疼痛[5]。

镇痛实验表明，石韦和柔软石韦受试物均对热板致痛和化学
致痛有一定的镇痛效果，石韦和柔软石韦各剂量组均能减少醋酸所致扭体反应次数及提高小鼠对热刺激的痛阈值，与空白对照组比较差异有统计学意义(P<0.01或
P<0.05)，体现其较好的止痛功效，且石韦受试物镇痛作用较柔软石韦强。

广西产的水龙骨科植物石韦Pyrrosialingua(Thunb.)Farwell和水龙骨科植物柔软石韦Pyrrosiamollis(Kune)Ching)是广西药材市场上常售的石韦药材，实验表明，在抗炎止痛方面广西产石韦比柔软石韦更具优势，至于两者化学成分及其他药效方面是否存在差别，有待于进一步的研究。

【相关文献】
[1] 国家药典委员会编.中华人民共和国药典(2005年版一部)[M].北京:化工出版社,2005：68.
[2] 包文芳，孟宪纡，周荣汉.中国石韦属化学成分与分类学的研究[J].沈阳药学院学报，1982，(15)：62-71.
[3] 徐叔云，卞如濂，陈修.药理实验方法学[M].北京：人民卫生出版社，2001：882-888.
[4] 陈奇.中药药理研究方法学[M].北京：人民卫生出版社，1996:361.
[5] 陈超，郑卫红，熊素兵，等.细辛与Verapamil镇痛作用的实验研究[J].中国药理学通报，2003,19(3)：337-339.。