病理诊断中胸腹水细胞块结合免疫组化

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World Latest Medicne Information (Electronic Version) 2019 Vo1.19 No.24
172投稿邮箱:zuixinyixue@
·医学检验·
病理诊断中胸腹水细胞块结合免疫组化
王德玉,向思敏
(中山大学附属第三医院,广东 广州 510630)
0 引言
胸腹腔积液也被称为胸腹水,是临床肿瘤性疾病的一种常见体征,晚期恶性肿瘤患者大多数会出现胸腹水。

而胸腹水的产生机制较为复杂,所以有效判断其性质对疾病诊断、临床治疗以及改善患者预后均具有重要意义。

目前胸腹水脱落细胞学检查是临床中较为常用的临床诊断方法,但是单纯细胞形态学提供的病理诊断的准确性低于组织学病理诊断,因此为疾病的临床诊断增加了一定难度。

为了进一步提升细胞病理诊断的准确率,为疾病的临床诊疗提供可靠依据,本研究对细胞块与免疫组化用于胸腹水脱落细胞学检查的应用效果作如下分析与总结。

1 资料与方法
1.1 一般资料。

在本次研究中,共计随机选择的54例研究对象,均为2015年5月至2017年6月于我院接受胸腹水液基细胞学检查后疑似肿瘤的患者,后经手术活检症状为恶性肿瘤伴胸腹水。

其中男28例,女26例;年龄29-64岁,平均(46.5±5.8)岁,其中胸水23例、腹水31例。

体液容量55-500 mL ,平均(30
2.5±8
3.5)mL ,液体颜色均呈血色或者是淡黄色。

入选研究对象中17例肺腺癌、2例恶性间皮瘤,5例肺鳞癌、14例小细胞癌、16例鳞状细胞癌。

1.2 方法。

将所有入选本次研究的患者胸腹水液基细胞进行细胞块及切片制作,并分比采用HE 常染色以及免疫组化染色。

细胞学涂片制备:静止胸腹水样品30 min 后,用吸管将距离瓶底的液体吸取8 mL ,放置在离心管当中,以3500 r/min 的速度进行15 min 的离心操作,弃上清液后,将试管底部的沉淀物涂在切片上进行固定,并采用瑞士-姬姆萨实施染色,直至涂片呈紫红色。

细胞块切片:积液量超过200 mL 的样本需要在室温条件下静置6h ,弃上清液后保证积液量低于100 mL ,按照1:9的比例甲醛溶液与积液量进行配置,将40%的甲醛溶液加入到积液当中,充分摇匀,并在室温条件下静置过夜。

于次日去上清液后,摇匀瓶底沉积物,并放置在离心管当中,以3500 r/min 的速度进行15 min 的离心操作,并将离心后沉淀物实施脱水、浸蜡、包埋等操作后进行HE 染色。

免疫组织化学染色:依据细胞涂片的形态学改变选择一组抗体,采用En Vision 两部法实施免疫组化,需要严格依据试剂说明书进行操作,选用的一抗试剂为SP 、TTF-1、CK5/6、CK7、CK20、CA125、CEA 、CR 、EMA 、EA 、DES 、MC 等。

切片厚度为4 um ,采用防脱玻片对切片进行
裱片,并在高温、高压条件下修复。

将一抗样本放置在4℃的冰箱内过夜,DAB 显色后,使用苏木素进行复染。

1.3 观察指标。

对比两种染色方法的阳性诊断准确率。

阳性率判断标准:CR 以及TTF-1等免疫组织化标记物阳性表达定位位于细胞核,CK5/6、EMA 以及CEA 阳性表达定位于细胞膜,CA125、DES 、Vim 、CK7以及CK20的阳性表达定位于细胞浆,可见棕黄色颗粒分布,并且目标细胞超过10%可认定为阳性。

1.4 统计学分析。

使用SPSS 20.0软件开展统计分析,以n (%)
表示,结果以χ2
检验,以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果
常规染色方法实施病理诊断的阳性诊断准确率77.78%(42/54),而采用细胞块与免疫组化实施病理诊断的阳性诊断准确率96.3%(52/54),两组病例诊断的阳性诊断准确率差异比较存在统计学意义(χ2=8.207,P =0.004)。

3 讨论
胸腹水主要是指病理性液体积聚在人体胸膜腔中的临床症状,胸膜腔中存在液体因为不同因素造成吸收减少、增多的情况下,则会造成胸腹水。

而胸腹水多为恶性肿瘤患者出现的典型症状,在诊断疾病性质、实施临床治疗等方面均发挥着重要作用[1]。

虽然影像学检查能够对积液位置以及积液量的多少进行有效明确,但目前细胞学检测仍然是病理诊断肿瘤良恶性的主要方法。

传统使用细胞离心沉降液涂片进行诊断的准确率较低,而细胞块能够实现切片的大量保存,应用胸腹水细胞块结合免疫组化方法可作为传统细胞涂片的辅助方法,有效弥补常规细胞涂片的缺点,有利于进一步实施检测。

同时制取胸腹水细胞沉渣石蜡切片的相关技术操作相对简单,对细胞实施沉渣石蜡包埋后操作后,可取得常规活检组织块样的连续切片,能够有效集中细胞,避免遗漏。

蜡块制取的切片可有效避免细胞因涂片过厚出现成团、重叠以及结构不清晰的现象,并且极少会出现掉片情况,有利于进一步提高染色定位的可靠性和准确性,在背景清晰的条件下,更利于提高判断的准确性[2]。

并且胸腹水沉渣蜡块可实现反复的连续切片,可依据临床诊断需求进行原位核酸分子杂交染色、细胞化学染色以及免疫组化染色等操作。

免疫组化是通过利用已知的特异性抗体对细胞内未知的抗原实施监测,依据形成的有色反应,进一步对细胞活性、
(下转第177页)
摘要:目的 探究使用胸腹水细胞块与免疫组化实施病理诊断的应用效果。

方法 随机在我院2015年5月至
2017年6月经手术活检证实为恶性胸腹水积液的患者中共计选择54例为研究对象,将入选研究对象的胸腹水细胞块样本分别实施HE 常规染色以及免疫组化染色,将两种染色方法的病理诊断结果实施对比分析。

结果 采用细胞块结合免疫组化染色实施病理诊断的阳性诊断准确率显著高于HE 常规染色,差异有统计学意义(P <0.05)。

结论 联合使用免疫组化染色与细胞块实施细胞学病理检查可有效提升肿瘤细胞阳性诊断准确率。

关键词:胸腹水细胞块;免疫组化;病理诊断;效果
中图分类号:R826.63 文献标识码:B DOI :10.19613/ki.1671-3141.2019.24.125
本文引用格式:王德玉,向思敏.病理诊断中胸腹水细胞块结合免疫组化[J].世界最新医学信息文摘,2019,19(24):172+177.
世界最新医学信息文摘 2019年 第19卷 第24期
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考了之后,针对异常蛋白质和异常对象,采取相应的早期筛查和早期诊断,对于排查患者肿瘤情况有着重要的实际意义。

正因为这样的特殊性意义,所以在临床检查的过程中,积极利用18F-FDG PET/CT 的方法来进行早期的恶性肿瘤筛查是十分重要的,也同时具备着较强的临床意义[6-8]。

如上报道数据所显示,18F-FDG PET/CT 方法在临床筛查恶性肿瘤中有着较强的实际意义,恶性肿瘤的检出率较高,可以有效提高恶性肿瘤的检出率,早发现从而进一步早治疗,提升患者的生命质量,降低死亡率。

参考文献
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(上接第174页)
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(上接第172页)
细胞分布以及定位情况进行显示。

通过制作胸腹水细胞块进行免疫组化染色的效果优良,有利于使细胞得到集中,使细胞观察更为方便。

并且有着与组织块的处理相同的处理过程,使阳性细胞脱落以及抗原受损的问题得到解决,可取得与组织块相同的结果,使细胞学检测的阳性率得到相应提高,有利于准确分析和判断组织来源[3]。

通过实施细胞块联合免疫组化后,有利于使病理学诊断的准确性、细胞学阳性检出率相应提高,有效降低了误诊及漏诊的发生几率。

同时采用细胞块联合免疫组化能够实现恶性肿瘤细胞的鉴别诊断及组织来源的分析判断,为区分恶性肿瘤的种类提供重要依据。

主要是因为TTF-1、CEA 等抗体常用于恶性间皮细胞、腺癌细胞以及出现增生现象的间皮细胞;甲状腺上皮以及肺上皮是TTF-1抗体的主要存在位置,而该抗体在鳞癌及其他多种典型类癌中的表达则呈阴性;间皮细胞以及间皮瘤中,并不存在CEA 抗体表达,但却主要标记上皮细胞肿瘤,所以CEA 抗体是对间皮瘤和癌实施区分的有效标记[4]。

CK7抗体在非上皮来源不表达,移行上皮细胞以及正常组织的腺上皮是其主要标记位置,并且在胃肠道表达呈阳性;CK20主要存在与正常的移行上皮、胃肠道上皮中,但是在乳腺癌、卵巢非
粘液性肿瘤、肺癌以及神经内分泌肿瘤中则不表达[5]。

因此采用免疫组化不仅能够有效协助临床医师实施对疾病的诊断与鉴别,还能够实现肿瘤细胞来源和类型的判断。

而在本次的研究结果中,胸腹水细胞块结合免疫组化染色的阳性诊断准确率远比常规染色方法实施病理诊断的阳性诊断准确率显著要高。

综上所述,采用细胞块联合免疫组化对胸腹水实施病理诊断,可有效提高阳性检出率,值得在临床中推广使用。

参考文献
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